汤 巧，夏梦宁，李 霞，刘国瑞

(1.南京医科大学附属南京医院医学检验科，南京 210036；2.南京医科大学附属儿童医院超声诊断科，南京210029；3.江苏大学医技学院医学检验系，江苏镇江 212013；4.解放军南京总医院检验医学研究所，南京 210002)

南京地区9种呼吸道病原体感染的流行病学分析

汤 巧1，夏梦宁2△，李 霞3，刘国瑞4

(1.南京医科大学附属南京医院医学检验科，南京 210036；2.南京医科大学附属儿童医院超声诊断科，南京210029；3.江苏大学医技学院医学检验系，江苏镇江 212013；4.解放军南京总医院检验医学研究所，南京 210002)

目的了解南京地区呼吸道感染人群的病原学流行现状，分析其趋势与特点。方法使用9项呼吸道感染病原体IgM抗体检测试剂盒对2013年5月至2015年4月就诊于南京医科大学附属南京医院、南京医科大学附属儿童医院、南京军区南京总医院的25 057例呼吸道感染患者的血清进行IgM抗体检测。结果共检出病原体阳性8 575例(34.22%)，其中肺炎支原体(MP)抗体阳性率最高，为23.77%；其次为呼吸道合胞病毒(RSV)5.19%、腺病毒(ADV) 4.56%、副流感病毒1、2和3型(PIVS) 4.02%、乙型流感病毒(INFB)2.28%。RSV、ADV感染季节性分布明显，在冬、春季节(12月至4月)高发，夏季较低。婴幼儿到学龄前患者阳性例数最多(5 274例)；MP抗体阳性率随着患者年龄增长逐渐下降。结论南京地区呼吸道感染病原体主要为MP，病原体感染与年龄组有相关性且有季节流行趋势。

呼吸道感染；流行病学；病原体；感染率；肺炎，支原体；南京

呼吸道疾病有多种类型，可引起呼吸道感染的病原体也有多种，临床症状无特异性，很难进行针对性治疗，容易造成抗生素滥用。因此，同时检测多种病原体对于简单、快速、特异、准确诊断呼吸道感染性疾病，为临床提供用药指导有重要意义。呼吸道感染性疾病年幼、体弱者多发，常见于儿童和老年人。本研究中3家单位均采用相同厂家的9项呼吸道感染病原体IgM抗体检测试剂盒对呼吸道感染患者进行常见呼吸道病原体IgM抗体联合检测，并对检测结果进行统计分析，以期对临床诊断和治疗提供依据。

1 资料与方法

1.1一般资料 2013年5月至2015年4月就诊于南京市第一医院、南京医科大学附属儿童医院及南京军区总医院的呼吸道感染就诊患者25 057例，年龄小于或等于98岁，平均(21.4±29.2)岁。所选病例排除自身免疫性疾病等基础疾病。

1.2试剂与仪器 统一采用西班牙VIRCELL,S.L公司的9项呼吸道感染病原体IgM抗体检测试剂盒(PNEUMOSLIDE IgM)，可同时检测嗜肺军团菌血清1型(LP1)、肺炎支原体(MP)、Q热立克次体(COX)、肺炎衣原体(CP)、腺病毒(ADV)、呼吸道合胞病毒(RSV)、甲型流感病毒(INFA)、乙型流感病毒(INFB)和副流感病毒1、2和3型(PIVS)等9种病原体。仪器均为LEICA DM500荧光显微镜。

1.3方法 采用间接免疫荧光法检测。抽取静脉血4.0 mL，离心分离后吸取上清液立即检测。操作人员统一培训合格后严格按照说明书及制订的标准操作程序完成。

1.4结果判断 可以观察到ADV、INFA、INFB或PIVS对阳性血清的1%～15%细胞的细胞核、胞浆或胞膜出现苹果绿色荧光(在PIVS和RSV中能同时观察到着色的合胞)；LPI、CP或COX中所有的细菌呈现出苹果绿色荧光；MP对阳性血清在细胞外围呈现苹果绿色荧光。阴性结果：可观察到LPI、CP和COX无荧光，MP、ADV、INFA、INFB、RSV和PIVS的细胞呈现红色，所有的阳性结果均经过双人复核，以防个体偏差，确保结果准确可靠。

表1 9种病原体抗体阳性检测结果分布情况[n(%)]

表2 各年龄段患者呼吸道病原体IgM抗体的阳性分布[n(%)]

*：P<0.05

1.5统计学处理 采用SPSS13.0软件进行统计分析，计数资料以例数或百分数表示，采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1呼吸道感染患者病原体IgM抗体阳性率分布情况 在25 057例标本中共检测出IgM抗体阳性8 575例(34.22%)，其中MP阳性最高，5 957例(23.77%)；ADV阳性1 143例(4.56%)；RSV阳性1 300例(5.19%)；INFB阳性572例(2.28%)；PIVS阳性1 007例(4.02%)；LP1、COX、CP、INFA阳性率分别为0.26%、0.004%、0.05%、0.13%。

2.2各病原体感染时间分布 患者呼吸道感染的主要病原体为MP、ADV、RSV、PIVS和INFB；INFA感染例数较少，主要集中在春季；MP和INFB感染率随季节变化不大；RSV、ADV感染季节性分布明显，主要集中在冬、春季节(12月至4月)，夏季较低；PIVS检测阳性率不同季节变化不明显。见表1、图1。

2.3呼吸道病原体阳性率与年龄分布情况 对8 575例阳性病例按年龄分组，分为婴儿组(<1岁)、幼儿组(1～3岁)、学龄前组(3～7岁)、学龄组(7～18岁)、成人组(18～60岁)、中老年组(>60岁)，见表2、图2。8 575例阳性病例中，幼儿组、学龄前组和学龄组 MP抗体阳性率在组中所占比例分别为45.41%、44.22%、33.42%，高于其他组(P<0.05)；婴儿组、幼儿组和学龄前组RSV抗体阳性率高于其他组，差异有统计学意义(P<0.05)。

2.4两种及以上病原体混合感染分析 8 575例阳性病例中有1 498例(17.50%)为两种及以上病原体混合感染。两种病原体混合感染率为98.87%(1 481/1 498)，3种病原体混合感染率为1.13%(17/1 498)，其中混合感染率最高的是MP，混合感染病例中PIVS阳性者为436例，占到所有PIVS阳性病例中的43.30%，远高于其他病原体。对发生三重感染的17例标本进一步分析发现，16例为1岁以内，1例为31岁男子；MP+ADV+RSV阳性12例，MP+RSV+PIVS阳性4例，MP+ADV+PIVA阳性1例。见表3。

图1 5种主要病原体抗体阳性分布情况

图2 各年龄段患者主要呼吸道病原体IgM抗体阳性率患者

表3 主要病原体混合感染分析

3 讨 论

呼吸道疾病好发于儿童和年老体弱者，在急性感染性疾病中占首位。呼吸道疾病临床症状不典型，大部分诊断依靠实验室检查结果，主要方法有组织细胞培养法、病原体分离培养、血清学检测、间接免疫荧光法、聚合酶链反应(PCR)等[1-2]。以前常将病毒分离培养作为“金标准”，但其操作复杂、培养时间长、阳性率低。近年来，PCR技术因其高特异度和高灵敏度而在呼吸道感染中被广泛使用，但此项技术对操作人员素质及实验室设备要求相当高，难以在基层医院普及。目前，9项呼吸道感染病原体IgM抗体检测试剂盒(间接免疫荧光法)被各大医院广泛使用，文献也表明，9项呼吸道感染其是一种可靠性很高的检测多种呼吸道病原体和非典型病原体的方法，灵敏度高、特异度强、简单高效、成本低廉，适合临床筛查[3]。

本项研究显示，9项呼吸道病原体IgM抗体的阳性检出率为34.22%，与蒋松柏[4]报道的32.71%一致，但低于廖冰洁等[5]报道的39.23%，高于谢红梅等[6]报道的24.9%。其中以MP的感染率23.77%最高，其余依次为RSV 5.19%、ADV 4.56%、PIVS 4.02%，与廖兵等[7]研究不一致，可能由于地域差异性的原因。在本研究中，INFB的检出率超过INFA，与通常认为INFA的感染率高于INFB的观点不符[5]，究竟是地区特有的现象，还是其他原因导致，尚需要进一步研究。

呼吸道感染具有一定的季节分布性。本研究显示，MP感染率与季节变化相关性不明显，与Chen等[8]报道的夏季流行不相符。而ADV、RSV检出率在12月至4月(冬、春季)较高，与成守金等[9]报道的在冬季检出率偏高有差别。笔者认为春季高发可能是因为气温适中，适合细菌、病毒生长繁殖，且春季气温上升、天气干燥，出现皮肤干燥等，人的抵抗力下降，从而导致呼吸道免疫功能下降，感染率增高。有文献发现军团菌属夏季检出率高于冬季[10]。认为军团菌属发病率增高与供水系统中军团菌属检出率升高有一定关系。夏季供水系统中军团菌属检出率升高可能间接导致军团菌属的增加[11-12]。笔者的数据因阳性结果较少，对上述结论无法做出判断。

阳性患者在不同年龄组分布有一定差异，在8 575例阳性病例中，从婴儿到学龄段比例最高，达到61.50%(5 274/8 575)，这可能因为患者处于学习阶段，每天活动在人群密集处，感染概率较高，也有年幼者免疫系统还未健全的因素。从理论上说中老年人随着年龄增加，身体机能下降，免疫力降低，感染率可能升高，但笔者的统计结果否定了这种判断。不同呼吸道病原体在不同年龄组分布也有一定差异性，幼儿组、学龄前组和学龄组患者MP抗体阳性率分别为45.41%、44.22%、33.42%，高于其他组；婴儿组、幼儿组和学龄前组患者RSV抗体阳性率高于其他组，具体原因尚待进一步分析。

综上所述，本研究为南京地区呼吸道感染提供了可靠的流行病学和病原学资料，同时9项病原体检测对呼吸道疾病的诊断及临床治疗有指导意义。

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Epidemiologicalanalysison9kindsofrespiratorytractpathogeninfectioninNanjingarea

TangQiao1,XiaMengning2△，LiXia3，LiuGuorui4

(1.DepartmentofClinicalLaboratory,AffiliatedNanjingHospital,NanjingMedicalUniversity,Nanjing,Jiangsu210036,China;2.DepartmentofUltrasoundDiagnosis,AffiliatedChildren′sHospital,Nanjing,Jiangsu210036,China;3.FacultyofLaboratoryMedicine,MedicalTechnicalCollege,JiangsuUniversity,Zenjiang,Jiangsu212013,China;4.InstituteofClinicalLaboratoryMedicineofPLA,NanjingGeneralHospitalofNanjingMilitaryCommand,Nanjing,Jiangsu210002,China)

ObjectiveTo understand the pathogenic epidemiological status quo among populations with respiratory tract infectious in Nanjing area.MethodsThe IgM antibody detection reagent kit against 9 kinds of respiratory tract pathogen was used to conduct the IgM antibody detection in 25 057 patients with respiratory tract infection in the Affiliated Nanjing Hospital of Nanjing Medical University,Affiliated Children′s Hospital of Nanjing Medical University and Nanjing General Hospital of Nanjing Military Region from May 2013 to April 2015.ResultsA total of 8 575 cases(34.22%) of pathogen positive were detected out,in which Pneumonia mycoplasma (MP) antibody had the highest positive rate(23.77%);followed by respiratory syncytial virus (RSV,5.19%),adenovirus (ADV,4.56%),Parainfluenza virus type 1,2 and 3 (PIVS,4.02%) and influenza B virus(INFB,2.28%).The seasonal distribution of RSV,ADV and PIVS was significant and had high onset in winter and spring,but low onset in summer and autumn.Infants and young children had maximal positive cases in preschool period,which were 5 274 cases;as a whole,MP IgM antibody positive rate was gradually decreased with the age increase.ConclusionMP is the main pathogen causing respiratory tract infections in Nanjing area,followed by RSV.The pathogenic infection has a correlation with the age group,moreover which demonstrates the seasonal epidemic trend.

respiratorytract infections;epidemiology;pathogens;infection rates;pneumonia,mycoplasma;Nanjing

汤巧(1971-)，主任技师，硕士，主要从事免疫学疾病的临床诊断与研究。△

，E-mail:13952042488@163.com。

10.3969/j.issn.1671-8348.2017.28.023

R446.62

A

1671-8348(2017)28-3959-03

2017-04-10

2017-06-06)