张 辉，白 晨，王华忠，张惠忠，李晓东，付增娟，赵尚敏，鄂圆圆，张自强，王 良

(1.中国农业科学院，北京 100081；2.内蒙古自治区农牧业科学院，内蒙古 呼和浩特 010031；3.中国农业科学院 甜菜研究所，黑龙江 哈尔滨 150080)

甜菜双向电泳体系条件的优化

张 辉1，2，白 晨2，王华忠3，张惠忠2，李晓东2，付增娟2，赵尚敏2，鄂圆圆2，张自强2，王 良2

(1.中国农业科学院，北京 100081；2.内蒙古自治区农牧业科学院，内蒙古 呼和浩特 010031；3.中国农业科学院 甜菜研究所，黑龙江 哈尔滨 150080)

为了获得甜菜叶片双向电泳中蛋白质最佳提取方法，建立甜菜叶片蛋白质双向电泳最佳的双向电泳体系。以甜菜叶片为材料，通过比较分析，研究甜菜叶片总蛋白提取方法、IPG胶条pH 值及其对应上样量等因素对甜菜叶片蛋白质双向电泳结果的影响。结果表明：酚提取法、TCA/丙酮提取法和可溶性蛋白提取法3种蛋白提取方法中TCA/丙酮法提取效果较好，pH值4～7与pH值5～8的双向蛋白电泳比较发现：pH值4～7胶条蛋白点清晰且在图谱上的蛋白点分布均匀，无蛋白点集中现象，更适合甜菜叶片的蛋白质组分析。采用7 cm 线性固相 IPG 胶条进行双向电泳，150 μg上样量蛋白点明显增多，双向电泳效果更好，pH值4～7的17 cm胶条300 μg上样量胶点更多更清晰，试验结果为甜菜蛋白质组学的研究提供了最佳的试验方法。

甜菜；蛋白质提取方法；双向电泳；体系优化

甜菜是二年生作物，重要的糖料作物之一，主要分布在黑龙江、内蒙古和新疆3个地区。国家将粮、棉、油、糖作为重要的战略储备物资，糖料也是关系国计民生的重要物资。……