翟 莹，张 军，任巍巍，张 闯，赵 艳，张梅娟

(1.齐齐哈尔大学 生命科学与农林学院，黑龙江 齐齐哈尔 161006；2.黑龙江省兽医科学研究所，黑龙江 齐齐哈尔 161005)

大豆低温诱导启动子GmERF9P的克隆及活性鉴定

翟 莹1，张 军2，任巍巍1，张 闯1，赵 艳1，张梅娟1

(1.齐齐哈尔大学 生命科学与农林学院，黑龙江 齐齐哈尔 161006；2.黑龙江省兽医科学研究所，黑龙江 齐齐哈尔 161005)

为获得低温诱导基因GmERF9启动子，并分析该启动子的功能，利用PCR技术从大豆叶片基因组DNA中克隆1 885 bp的GmERF9启动子序列GmERF9P。序列分析表明，GmERF9P序列中含有多种与逆境相关的顺式作用元件。将GmERF9P构建到植物表达载体pCAMBIA1301上并转化烟草。通过PCR检测共获得6株T1阳性转基因烟草株系。对野生型烟草和转基因烟草进行低温处理2 h，通过GUS组织化学染色和实时荧光定量PCR检测GUS基因的表达量。结果显示GmERF9P在低温处理下能够提高GUS基因的表达量，具有低温诱导启动活性。

大豆；GmERF9P；启动子；低温诱导；转基因烟草

启动子是DNA分子上位于结构基因上游，具有多种顺式作用元件的一段DNA序列，能够结合RNA多聚酶从而启动结构基因的转录[1]。内源或外源基因的表达效率主要取决于启动子的活性。按照基因的表达方式，植物基因启动子可以分为组成型启动子、组织特异型启动子及诱导型启动子[2]。组成型启动子虽然能够有效地驱动外源抗逆基因过量表达，但这种无组织、无环境、无时间特异性的表达不仅会造成植物营养和能源的浪费，甚至会引起植物生理代谢紊乱，进而影响植物的正常生长发育。……