张鹏钰，袁 珍，王国瑞，王同朝，尹 钧，3，卫 丽，3，刘毓侠

(1.河南粮食作物协同创新中心，河南 郑州 450002；2.河南农业大学 农学院，河南 郑州 450002；3.国家小麦工程技术研究中心，河南 郑州 450002；4.河南省农业科学院，河南 郑州 450002)

普通小麦Trx59基因的克隆及功能验证

张鹏钰1，2，袁 珍2，王国瑞2，王同朝1，2，尹 钧2，3，卫 丽2，3，刘毓侠4

(1.河南粮食作物协同创新中心，河南 郑州 450002；2.河南农业大学 农学院，河南 郑州 450002；3.国家小麦工程技术研究中心，河南 郑州 450002；4.河南省农业科学院，河南 郑州 450002)

为进一步挖掘小麦春化相关基因，探明小麦春化发育调控机制，从不同春化发育特性小麦品种春化响应转录组高通量测序结果中筛选并克隆到1个EST序列，命名为Trx59，该基因的开放阅读框为372 bp，编码124个氨基酸，保守结构域分析显示，Trx59基因有1个Thioredoxin结构域。利用qRT-PCR分析了在春化处理过程中Trx59基因在不同春化发育特性小麦品种的表达特性，并利用VIGS技术进行基因功能的初步验证。结果表明：随着春化处理时间的延长，Trx59基因的表达量逐渐升高，从表达量和表达时间来看，Trx59基因的表达量和表达时间表现为春性品种高于且早于冬性品种。构建BSMV：Trx59重组载体并接种于小麦植株，14 d后出现明显的光漂白现象，Trx59基因的表达水平急剧降低，说明Trx59基因已被显著抑制；BSMV：Trx59接种的小麦植株穗分化明显晚于阴性对照组，初步判断Trx59基因与小麦发育有关。

小麦；春化；表达分析；病毒诱导的基因沉默；功能验证

硫氧还蛋白(Thioredoxin，Trx)是一类高度保守的低分子量蛋白。自Andersen等[1-2]在大肠杆菌中发现硫氧还蛋白作为核苷酸还原酶的氢供体以来，人们相继在动、植物中发现硫氧还蛋白并对其功能进行了诸多研究。……