郑潇潇，王潇霖，黄凤，雷楠，蒋桂华

基于虫蛀对白芷有效成分的影响探讨虫蛀白芷的资源价值

郑潇潇，王潇霖，黄凤，雷楠，蒋桂华

目的：研究虫蛀白芷是否还有资源利用价值。方法：用高效液相色谱法测定10批虫蛀白芷中欧前胡素和异欧前胡素的含量，并且比较各批虫蛀前后欧前胡素的含量变化。 结果：虫蛀白芷中仍含有较多的欧前胡素和异欧前胡素，其中欧前胡素含量均高于2015版《中国药典》白芷项下含量测定的标准，且虫蛀前后欧前胡素变化不呈现有规律的下降趋势，且与虫蛀程度也无相关性。结论：虫蛀白芷仍然具有价值，可以作为提取欧前胡素和异欧前胡素的原料药。

虫蛀；白芷；欧前胡素；异欧前胡素

白芷（Angelicae dahuricae Radix）为伞形科植物白芷Angelicae dahurica(Fisch.ex Hoffm.)Benth.et Hook.f.或杭白芷Angelicae dahurica(Fisch.ex Hoffm.)Benth.et Hook.f.var.formosana(Boiss.)Shan et Yuan的干燥根。[1]是一味具有悠久的药用历史的临床常用药，具有解表散寒，祛风止痛，宣通鼻窍，燥湿止带，消肿排脓的功效，用于治疗感冒头痛，眉棱骨痛，鼻塞流涕，鼻鼽，鼻渊，牙痛，带下，疮疡肿痛[1]。

白芷的主要活性物质为香豆素类物质，是化合物欧前胡素、异欧前胡素的提取原料之一。欧前胡素和异欧前胡素具有镇痛、抗炎、抗菌、抗肿瘤、舒张血管活性的作用[2]以及活血化瘀[3]、抗内毒素血症[4]的作用。有研究[5]表明，欧前胡素是Mcl-1降解的一个诱导剂，可以有效抑制耐药性肝癌细胞的增殖。因此，欧前胡素可以作为一种有效的小分子抗癌药剂，在肝癌治疗特别是耐药性肝癌的治疗中存在巨大应用前景。另有研究表明，欧前胡素能抑制血管壁增厚、心肌肥大的作用，对高血压、动脉粥样硬化和肥厚型心肌病等有治疗作用[6]。急性毒性和安全药理学研究[7]结果表明欧前胡素安全范围较大，毒性较容易控制，且对正常动物（小鼠、大鼠、犬）的降压作用不明显，具有较大的临床应用可能性。

由于白芷富含多糖和淀粉类成分，因此容易出现虫蛀。四川产的白芷的采收季节是7月，采收堆放的白芷在高温高湿的环境下极易出现生霉、虫蛀等变质现象。虫蛀后的中药材按照相关规定不能继续作为中药材使用。通过观察不同程度虫蛀白芷的外观性状，可以发现，白芷虫蛀大多是从中心开始，是一个由内向外的过程，因此，虫蛀对木部的影响大于皮部，而白芷的根的超微结构表明[8]，白芷的活性成分主要存在于分泌道中，分泌道主要分布在中柱鞘薄壁组织和次生韧皮部中，而在木部极少分布。因此，可以假说虫蛀白芷中仍然存在香豆素类活性成分。本研究以欧前胡素和异欧前胡素为指标成分，通过测定虫蛀白芷中欧前胡素和异欧前胡素的含量，探讨虫蛀白芷是否还有资源利用价值。

1 材料

1.1 药材

白芷：实验所用药材均于2008年7月18日采自四川遂宁中脊村白芷GAP生产基地，经成都中医药大学马逾英教授鉴定为伞形科植物杭白芷Angelica dahurica(Fisch.ex Hoffm.)Benth.Et Hook.f.var.formosana(Boiss)Sham et Yuan.的根。经过在常温养护室贮藏7年后，选取10批虫蛀白芷药材药品，10批样品的虫蛀程度及外观描述，见表1。

表1 10批虫蛀白芷样品的虫蛀程度和性状

1.2 试药

甲苯（分析纯）甲醇（色谱纯）、纯净水、欧前胡素对照品（中国生物制品药品检验所，批号：110826-200511）、异欧前胡素对照品（中国生物制品药品检验所，批号：111827-201008）。

1.3 仪器

鼓风干燥箱（北京中兴伟业仪器有限公司）、微型植物试样粉碎机FZ102型（北京中兴伟业仪器有限公司）、万分之一电子分析天平（SOP,赛多利斯科学仪器北京有限公司）、十万分之一电子分析天平（赛多利斯科学仪器北京有限公司）、KQ-50B型超声清洗器（昆山市超声仪器有限公司） 、Agilent 1200型HPLC仪（G1322A 泵、G1329B自动进样器、G1316A柱温箱、G1315C光电二极管阵列检测器及色谱工作站）等。

2 方法与结果

参考本课题组前期建立的HPLC方法[9]测定欧前胡素和异欧前胡素的含量。由于含量测定方法为课题组前期建立，所以本次实验未做方法学考察。

2.1 色谱条件与系统适应性实验

色谱柱WondaSil,C18(250mm×4.6mm,5μm),美国）、体积流量为1mL﹒min-1、进样量为10 μL；流动相为甲醇：水（70：30）；检测波长254nm。在选定的色谱条件下，欧前胡素和异欧前胡素对照品的色谱图，见图1。

图1 混合对照品HPLC色谱图

图2 虫蛀白芷供试品色谱图

2.2 对照品溶液的制备

精密称取欧前胡素和异欧前胡素适量，以甲醇为溶剂，制备成含欧前胡素(11.0 μg﹒mL-1)、异欧前胡素（13.24 μg﹒mL-1）的对照品混合溶液。

2.3 供试品溶液的制备

取虫蛀白芷粉末（过三号筛）约0.4g，精密称定，置50mL量瓶中，加甲醇45mL，超声处理（功率300W,频率50kHz）1小时，取出，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.4 含量测定

精密吸取供试品溶液各10μL进样，按上述色谱条件测定样品中欧前胡素和异欧前胡素的含量。供试品色谱图见图2，测定结果见表2。

表2 虫蛀白芷供试品中欧前胡素和异欧前胡素含量测定结果(%)

3 白芷虫蛀前后欧前胡素含量比较

由于课题组前期在测定相同批次未出现虫蛀现象的白芷样品中欧前胡素的含量时，所采用的方法为《中国药典》中白芷项下的含量测定方法[10]，所以，为了能够与其对比，重新用相同的方法对虫蛀后的相同批次的白芷样品中欧前胡素含量进行测定，结果见表3，虫蛀前后各批白芷欧前胡素含量变化，见图3。

表3 白芷虫蛀前后供试品中欧前胡素的含量测定结果(%)

图3 白芷虫蛀前后欧前胡素含量对比

4 结论与讨论

通过以上研究发现：虫蛀白芷中的仍存在活性成分欧前胡素和异欧前胡素。本研究中的10批虫蛀后的白芷中欧前胡素含量均符合2015版《中国药典》白芷项下含量测定要求（欧前胡素不得少于0.08%），且远高于规定值。虫蛀白芷的欧前胡素和异欧前胡素的含量或是虫蛀前后欧前胡素的变化量都与其虫蛀的程度无明显的相关性。

因此可以推测虫蛀对白芷中欧前胡素和异欧前胡素的影响不明显，10批样品中欧前胡素与异欧前胡素的含量差异主要受前期不同的加工过程影响（如是否熏硫）和不同贮藏条件（低温、对抗贮藏等）的影响。虫蛀前后白芷中欧前胡素的含量变化不呈现出有规律的大幅下降趋势与白芷的活性成分存在的部位并不是虫蛀发生的主要部位有关。

从本研究的结果可以看出，虫蛀白芷虽然不能再作为中药材使用，但仍然有作为药用资源的价值，建议从资源的合理利用减少浪费角度出发，可从虫蛀白芷中提取欧前胡素和异欧前胡素或者其他更多的活性成分。

[1] 国家药典委员会编.中华人民共和国药典.2015年版.一部[S].北京：中国医药科技出版社,2015.

[2] 杨小花,胡晓.欧前胡素与异欧前胡素的药理学研究进展[J].南昌大学学报(医学版),2012,52(3)：95-100.

[3] 张慧,海广范,栗志勇.等.白芷中活血化瘀有效组分的谱效关系[J].中国实验方剂学杂志,2014,20(15)：139-143.

[4] 张慧,海广范,栗志勇.等.白芷中抗内毒素血症有效组分的谱效关系[J].中成药,2014,36(12)：2491-2497.

[5] 李华.欧前胡素抑制人耐药性肝癌细胞增殖及其分子机制研究[D].浙江：浙江大学.2014.

[6] Zhang Y,Cao YJ,Duan HJ,et al.Imperatorin prevents cardiac hypertrophy and the transition to heart failure via NO-dependent mechanisms in mice[J].Fitoterapia,2012,83(1)：60.

[7] 朱海,孙旖,夏振娜,等.欧前胡素急性毒性和安全药理学研究[J].药学实践杂志,2013,31(6)：428-431.

[8] 陈莹,胡正海,胡本祥,等.杭白芷根的分泌道超微结构与其挥发油分泌的关系[J].西北植物学报,2015,35(4)：0716-0722.

[9] 贾敏如,王梦月,金曲嫫,等.HPLC测定13种白芷中欧前胡素和异欧前胡素素的含量[J].华西药学志,2003,18(5)：361-362.

[10] 杨曦.白芷产地加工及贮藏技术研究[D].四川：成都中医药大学,2010：40.

Research on the resources value of Angelicae dahuricae Radix damaged by worms based on its effective component/

ZHENG Xiao-xiao, WANG Xiao-lin, HUANG Feng, LEI Nan, JIANG Gui-hua//((School of Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine; Key Laboratory of Standardization for Chinese Herbal Medicine, Ministry of Education; National Key Laboratory Breeding Base of Systematic Research, Development and Utilization of Chinese Medicine Resources, Chengdu 611137, Sichuan )

Objective: To research the value of Angelicae dahuricae Radix damaged by worms. Method: The contents of imperatorin and isoiperatorin in 10 batches Angelicae dahuricae Radix damaged by worms were detected by HPLC. The data were compared between sample before and after damage. Result: Angelicae dahuricae Radix damaged by worms still contained imperatorin and isoiperatorin. And the content of imperatorin met the requirements of Angelicae dahuricae Radix in Chinese Pharmacopoeia. The change of imperatorin content during the worm damage process didn’t show a regular downtrend and had no relationship with the worm damage. Conclusion: Angelicae dahuricae Radix damaged by worms still has the value to be used as the raw material to extract imperatorin and isoiperatorin.

Damages of worms; Angelicae dahuricae Radix; imperatorin; isoiperatorin

R 282

A

1674-926X(2017)04-003-03

国家自然科学基金（国家基础科学人才培养基金）：中药饮片调剂包装贮藏养护技术研究（J1310034-07）；四川省科技厅应用基础计划课题：基于太赫兹时域光谱的4种川产道地药材鉴别研究（重点）（2016JY0076）

成都中医药大学药学院 中药材标准化教育部重点实验室 四川省中药资源系统研究与开发利用重点实验室省部共建国家重点实验室培育基地，四川 成都 611137

郑潇潇（1990-），女（汉族），湖北荆州人，在读硕士研究生，主要从事中药品种与质量的研究Tel：15184384637 Email：1204189289@qq.com

蒋桂华（1970-），女（汉族），四川成都人，现任成都中医药大学药学院教授，博士学位，主要从事中药品种与质量的研究工作Email：11469413@qq.com

2016-12-26

（责任编辑：胡慧玲）