唐雪梅，彭小宁

（湖南师范大学医学院，长沙 410013）

MiR-148a-3p靶基因的预测与验证

唐雪梅，彭小宁

（湖南师范大学医学院，长沙 410013）

目的：预测和验证miR-148a-3p的靶基因。方法：利用生物信息学方法预测miR-148a-3p的靶基因；在神经胶质瘤细胞U87/U251中建立miR-148a过表达及抑制表达稳定细胞系。利用qPCR实验验证miR-148a-3p与靶基因的靶向关系；利用Western Blot实验检测靶蛋白表达水平。结果：生物信息学方法预测结果显示dynein light chain LC8-type 2（DYNLL2）为miR-148a-3p靶基因之一；qPCR实验结果显示DYNLL2在神经胶质细胞HA1800与神经胶质瘤细胞U87/U251中的表达有差异，在神经胶质瘤细胞miR-148a过表达及抑制表达的细胞中表达有差异；Western Blot实验结果显示DYNLL2的蛋白表达水平在神经胶质细胞HA1800与胶质瘤细胞U87/U251中有差异。结论：miR-148a-3p与DYNLL2有确切的靶向关系，DYNLL2在神经胶质细胞与胶质瘤细胞中均有表达，与正常胶质细胞相比，DYNLL2在神经胶质瘤细胞中表达下调，包括基因水平和蛋白水平，miR-148a-3p能够负向调控DYNLL2的表达。

微小RNA；miR-148a-3p；DYNLL2

微小RNA（microRNA，miRNA）是一类长度为18～24个核苷酸的内源性非编码小分子单链RNA。通过完全或不完全互补结合靶mRNA3’UTR，在转录后水平上对靶基因表达水平进行调控。有研究表明多种miRNAs参与调控神经胶质瘤的发生发展，其中包括高表达的mir-148a［1］。本课题组前期研究发现，在神经胶质母瘤组织及细胞中miR-148a-3p的表达水平明显高于正常神经胶质组织及细胞，mir-148a在神经胶质母细胞瘤中作为负性风险因子存在，高表达的mir-148a促进胶质母细胞瘤的恶性化进程的演变，且与胶质母细胞瘤患者生存率呈负向相关性。寻找mir-148a-3p的靶基因能够深入揭示mir-148a-3p在神经胶质母细胞瘤发病中的调控机制。……