赵辰宇（聊城市第二中学高二七班，山东 聊城 252000）

原液中铁残留检测方法研究

赵辰宇（聊城市第二中学高二七班，山东 聊城 252000）

通过实验方法的建立，对含蛋白原液中铁残留检测方法进行摸索，确定出最简单、准确的检测方法。

铁残留；检测方法

通过查询大量资料，未发现含蛋白原液的铁残留的检测方法，有一部分药用辅料规定了铁残留的检测方法。氯化钠不仅是辅料，更是一种注射剂（医用0.9%生理盐水），同时也是原液复溶的溶剂，因此，以氯化钠的检测量及检测限为原液的检测标准较为适宜。

表1 .药典中部分原辅料铁残留检测限比较

1 实验方法的确立

由于氯化钠是小分子，原液中含有大分子蛋白会干扰最终的比色。因此，怎样建立一个有效地去除蛋白而不影响溶液中铁元素的前处理方法是原液铁残留检测标准建立的关键。

1.1 蛋白去除方法的提出及验证

通过查资料，沉淀除去蛋白的方法有很多，如酚-氯仿法、硫酸铵盐析法、冰冻乙醇法及丙酮法等。而除蛋白的方法在此应符合下面几个基本原则：一、不能影响溶液中铁元素的含量；二、尽量不引入新的杂质离子；三、尽量减少有毒、有害物质的使用。经实验验证，其中，酚-氯仿法会明显影响铁离子；硫酸铵盐析法和冰乙醇法不能完全除干净蛋白，最终的样品比色溶液中容易出现乳光，而影响比色；而丙酮需要设备较复杂，处理程序较多、时间较长，容易残留影响比色。

根据以上情况和原则，经过进一步实验摸索确立了两种方法：低pH沉淀和高温炽灼沉淀法。这两种方法的优点都不引入新的杂离子，不会干扰最终的比色判定；其次是方法简单易行，易操作、易控制。

1.2 蛋白去除方法的确立

1.2.1 低pH沉淀法：

取两个烧杯，分别放入5ml样品原液；5ml样品原液和1.5ml标准铁溶液，作为样品阳性对照；两烧杯静置半小时以上，使蛋白充分沉淀。然后离心，把上清倒入比色管，沉淀管小心洗三遍都移入比色管。下面步骤依据药典氯化钠铁残留检测，不同点是样品管和阳性对照管都不加4ml稀盐酸。重复三次检测，一次沉淀去除较好，比色成功，样品管颜色浅于对照管，阳性对照管略深于对照管。另两次样品管和阳性对照管都有淡乳光，影响比色。经过多次反复试验，结果均不理想。说明低pH沉淀蛋白的方法不太稳定，重复性不好。

1.2.2 高温炽灼沉淀法：

取三个烧杯，分别放入5ml样品原液；5ml样品原液和1.5ml标准铁溶液，作为样品阳性对照；1.5ml标准铁溶液，作为方法对照；将以上三组溶液一起进行高温炽灼。把样品原液和样品阳性对照的两个烧杯同时放在约120℃的温度迅速加热煮沸使蛋白变性，考虑到除蛋白更保险、更彻底，第一次两烧杯都炽灼到炭化，再各加4ml稀盐酸，用玻璃棒充分搅起碳化物，反应15分钟以上，使铁离子充分溶解。过滤，把滤液转入纳氏比色管后发现，溶液呈浅黄色，必定影响比色，终止试验，判定不适宜用高温炽灼碳化的方法去除蛋白。

修正此方法为高温炽灼蒸干但不碳化。其它步骤同上述。这样以来，样品和样品阳性对照滤液的颜色清亮无色，合乎要求。重复三次检测，样品等滤液均清亮无色，证明此法重复性较好，比色结果为：方法对照组与阳性对照组颜色深浅一致，说明高温炽灼对溶液铁离子没有影响。

表2 .原液样品蛋白去除主要方法的比较

3 检测结果和结论

3.1 结果

重复次数第一次第二次第三次样品管（①）明显浅于②明显浅于②明显浅于②对照管（②）略浅于③略浅于③略浅于③样品阳性对照（③）略深于②略深于②略深于②方法对照（④）与②一致与②一致与②一致

炽灼非碳化去除蛋白法最终比色结果汇总分析详见下表：

对照管颜色明显深于样品管，样品阳性管颜色略深于对照管，证明蛋白沉淀对铁离子的回收无显著影响。方法对照组颜色也与对照组一致，证明高温炽灼对铁离子回收无显著影响。

3.2 结论

炽灼非碳化去除蛋白法，对溶液铁离子没有明显影响，而且操作简单、易行，所用也是常规仪器，没有新增其它有毒、有害试剂。比色效果稳定可靠，是一个含蛋白的液体制品检测铁残留的可靠方法。

[1]2015版药典二部，正文氯化钠；附录ⅧG铁盐检查法