张伟鑫，曾 仲

(昆明医科大学第一附属医院器官移植中心，昆明 650000)

研究报告

小鼠CD4+T细胞外泌体分离及鉴定

张伟鑫，曾 仲*

(昆明医科大学第一附属医院器官移植中心，昆明 650000)

目的探讨CD4+T细胞是否具有分泌外泌体的能力，以及CD4+T细胞外泌体参与炎症及肿瘤免疫过程的可能。方法应用断颈处死的方法取出小鼠的脾脏，用磁珠分选的方法从小鼠脾脏细胞中分选出CD4+T细胞，并尝试从培养基上清液中提取CD4+T细胞的外泌体，在透射电镜下观察，后用PCR技术分析miR-23a、miR-214的表达情况。结果在透射电镜下能够观察到提取出的CD4+T细胞外泌体，且用PCR技术能检测到小鼠CD4+T细胞外泌体中miR-23a、miR-214这两个炎症及肿瘤相关的miRNA的表达。结论小鼠CD4+T细胞有分泌外泌体的能力，且为CD4+T细胞外泌体参与炎症及肿瘤相关过程提供了可能。

CD4+T细胞；外泌体；分离；鉴定；miRNA

外泌体(exosomes)是可由各种细胞脱落释放的大小均一的直径约为30～150 nm的脂质双分子层结构的囊泡，其外面的脂质双分子层膜可保护它内含物不受降解。其囊泡内含有脂质、蛋白质、mRNA、miRNA、siRNA等多种遗传物质[1]。自1985年Pan等[2]人首次在成熟哺乳动物的网织红细胞中观察到后，众多学者研究发现几乎所有细胞都可产生外泌体，其广泛存在于血液、尿液、腹水

等体液中[3]。外泌体参与着人体许多重要的生理及病理过程,它在细胞的通讯及迁移、血管新生、炎

症及免疫反应和肿瘤细胞的生长及迁徙浸润等方面有着极为重要的作用[4]，因此外泌体的研究引起了众多的关注。……