邢丹 马铭鸿 吴航伸 孙海琼 王珏玉 汪春蕾 赵敏

(东北林业大学，哈尔滨，150040)

CotA漆酶的固定化及其对溴麝香草酚蓝脱色的效果1)

邢丹 马铭鸿 吴航伸 孙海琼 王珏玉 汪春蕾 赵敏

(东北林业大学，哈尔滨，150040)

将林地土壤中分离的枯草芽孢杆菌中克隆的CotA漆酶基因，在毕赤酵母菌中进行表达；以海藻酸钙为载体，采用包埋法固定毕赤酵母菌表达的CotA漆酶，固定化效率为32.2%，正交试验优化后的固定化效率比优化前提高了30.1%。优化了游离CotA漆酶及固定化CotA漆酶对溴麝香草酚蓝的脱色条件，在30 min内，固定化CotA漆酶在70 ℃、pH为8.0时，游离CotA漆酶在60 ℃、pH为7.6时，对溴麝香草酚蓝溶液的脱色率最高，分别达到76.81%和67.12%，说明固定化CotA漆酶比游离CotA漆酶在较高温度和碱性条件下活性更高。

CotA漆酶；溴麝香草酚蓝；染料脱色

溴麝香草酚蓝(BTB)是结构比较稳定的杂环类染料[1-2]，应用于植物性别鉴定[3]、食品中铅的检测[4]、种子生活力的检测[5]等方面，并作为生物反应的指示剂而被大量使用。染料不仅对水体的溶氧度和可视度造成影响，还会被降解成联苯胺等致癌物质，因此印染废水的处理备受关注[6-8]。漆酶能够使多种染料脱色，与介体联用或与固定化酶技术相结合，使其应用范围更广[9-10]。真菌漆酶广泛应用于染料脱色，但大多数真菌漆酶只在酸性条件下具有活性，且热稳定性较差[11]。而一般工业印染废水具有高温、高pH和高盐等特点[12]，真菌漆酶在处理工业印染废水时容易失活，而不能起到很好的作用。与真菌漆酶相比，细菌漆酶具有热稳定性好及耐碱性等优点，在印染废水处理领域比真菌漆酶具有更好的应用优势[13]。……