彭桂兰?陈嘉慧?荣丹箐

[摘 要]DNA测序技术作为人类探索生命秘密的重要手段之一，在短短的四十年間经历了从无到有，从有到精的高速发展过程，进入了第四代基因测序时代。就第四代测序技术的原理和发展等进行综述。

[关键词]第四代测序技术；原理；发展

[中图分类号]Q78 [文献标识码]A

DNA测序即核酸DNA分子一级结构的测定，是现代分子生物学一项重要的测定。如今，广泛应用于生命科学、医学等领域，对其发展起着巨大的推动作用。自诞生以来， DNA测序技术的发展非常迅速，经历了几代技术的变革. 第一代技术主要使用的是1977年Sanger等人发明的利用DNA聚合酶和双脱氧链终止测定DNA核苷酸序列的方法，精度超高，因测序成本高，通量低等，具有很大的局限性。第二代测序技术的基本原理是边合成边测序，成本低、高通量，是目前应用最广泛的。第三代技术以单分子实时测序为主要特点，但测量精度。

1 第四代测序技术的原理

第四代测序技术又称为纳米孔测序技术，不需要对 DNA 进行生物或化学处理， 而是基于物理的原理进行测序。其简要原理是将经过提取的DNA的一端与一种特殊的蛋白相互连接，该蛋白主要起到与测序纳米孔的连接及控制序列进入速度的作用，同时将DNA的另一端连接，这样DNA的正义链和反义链可以依次通过纳米孔。通过纳米孔的DNA单链可以产生微弱的电流变化，感应器感受电信号并导出。通过对随时间变化的电信号进行解析，可以以识别基因中碱基对的排列顺序。……