许诚楷 丁元林 孙明谨 陆春丽 褚加成

(广东医科大学流行病与卫生统计学教研室,广东 东莞 523808)

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还原型谷胱甘肽对早期慢性肾脏病患者氧化应激、血管新生及免疫功能指标的影响

许诚楷 丁元林 孙明谨1陆春丽1褚加成1

(广东医科大学流行病与卫生统计学教研室,广东 东莞 523808)

目的探讨还原型谷胱甘肽(GSH)治疗早期糖尿病慢性肾脏病(CKD)患者对氧化应激水平、免疫水平及血管新生的影响。方法90例早期糖尿病CKD患者，采用抽签法随机分为试验组和对照组各45例，两组患者基础治疗相同，试验组同时给予GSH治疗，检测并比较两组患者治疗前后的肾功能、氧化应激及免疫等指标。结果治疗前，两组的血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、血管内皮生长因子(VEGF)、内皮抑素(ES)水平差异无统计学意义(P>0.05)；治疗后，试验组的SOD高于对照组、MDA、VEGF、ES水平低于对照组(P<0.05)，CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平高于对照组、CD8+低于对照组(P<0.05)。结论早期糖尿病(CKD)患者应用GSH治疗可显著改善患者免疫、氧化应激水平，减少异常新生血管生成。

糖尿病；慢性肾脏病；还原型谷胱甘肽；氧化应激

长期严重的糖尿病会导致肾脏病变，其中老年患者居多，临床特点为起病隐匿、病情复杂、治疗困难〔1〕。糖尿病慢性肾脏病(CKD)与细胞免疫应答下降、血管异常新生、氧化应激有关，早期不易被察觉，并且受到多种因素的影响，但其具体的发病机制尚未完全明确〔2〕。目前，已有还原型谷胱甘肽(GSH)治疗糖尿病CKD的研究〔3〕，认为其主要原理与GSH清除氧自由基的作用有关。本文拟进一步探讨早期糖尿病CKD患者应用GSH治疗对氧化应激水平、免疫水平及血管新生的影响。

1 资料与方法

1.1一般资料 90例早期糖尿病CKD患者采用抽签法随机分为试验组和对照组各45例。试验组男28例、女17例，年龄44～78岁，平均(61.9±8.4)岁，体质量指数(BMI)(23.1±2.0)kg/m2，糖尿病病程3～16年，平均(8.5±4.4)年，空腹血糖(FPG)(8.09±1.82)mmol/L，尿蛋白排泄率(UAER)(118.5±62.0)mg/24 h。对照组男30例、女15例，年龄48～79岁，平均(62.0±8.1)岁，BMI(22.8±1.9)kg/m2，糖尿病病程5～18年，平均(9.5±4.1)年，FPG(8.30±1.94)mmol/L；UAER(109.7±55.3)mg/24 h。两组年龄、性别、糖尿病病程、BMI、FPG、UAER水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。

1.2纳入、排除标准

1.2.1纳入标准〔4〕(1)糖尿病的诊断参考1998年世界卫生组织(WHO)制定的诊断标准；(2)年龄≤78岁；(3)CKD的诊断参考2002年NKF-K/DOQI指南标准，CKD分期属于1～2期；(4)研究取得患者的知情同意，获得医学伦理委员会的批准。

1.2.2排除标准〔4〕(1)伴高血压的患者；(2)伴肾小球肾病、肾源性肾病的患者；(3)合并慢性肝炎、恶性肿瘤、其他类型代谢性疾病的患者；(4)对治疗药物严重不耐受的患者。

1.3治疗方法 入院后均采取常规的基础治疗，坚持适度锻炼，禁止食用高脂、高糖食物，严格控制饮食；口服阿卡波糖(国药准字：H20010716，拜耳医药保健有限公司)50 mg/次，二甲双胍(国药准字：H20023370，中美上海施贵宝制药有限公司)0.25 g/次，均3次/d。对照组患者口服福辛普利(国药准字：H19980197，中美上海施贵宝制药有限公司)30 mg/次，2次/d，共8 w。实验组患者在对照组治疗的基础上采用还原型谷胱甘肽(国药准字：H20031625，上海复旦复华药业有限公司)加入5%葡萄糖注射液中静脉滴注治疗，1次/d，共治疗8 w。

1.4观察指标及检测方法 检测并对比两组患者治疗前后的血清氧化应激指标：丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)；血管新生相关指标：血管内皮生长因子(VEGF)、内皮抑素(ES)；免疫功能指标：CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+；肾功能相关指标：尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、UAER。

所有患者均清晨空腹采取静脉血约5 ml，测定MDA(试剂盒来自上海抚生实业有限公司)、SOD(试剂盒来自北京博迈斯科技发展有限公司)、VEGF(试剂盒，来自北京健平九星生物医药科技有限公司京械注准20152400398)、ES(试剂盒来自上海纪宁实业有限公司)；免疫荧光标记2 h内流式细胞术(试剂盒购于上海卡努生物科技有限公司)。检测CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平。

1.5统计学方法 应用SAS10.0软件进行分析，计量数据比较采用t检验。

2 结 果

2.1两组患者的SOD、MDA水平比较 治疗前，两组血清SOD、MDA水平差异无统计学意义(P>0.05)；治疗后，试验组的SOD高于对照组、MDA水平低于对照组(P<0.05)，见表1。

表1 两组患者治疗前后氧化应激水平比较

2.2两组患者治疗前后的VEGF、ES水平比较 治疗前，两组血清VEGF、ES水平差异无统计学意义(P>0.05)；治疗后，试验组的VEGF、ES水平低于对照组(P<0.05)，见表2。

表2 两组患者治疗前后VEGF、ES水平比较

2.3两组患者治疗前后免疫水平比较 治疗前，两组CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平差异无统计学意义(P>0.05)；治疗后，试验组的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平高于对照组、CD8+低于对照组(P<0.05)，见表3。

2.4两组患者治疗前后肾功能比较 治疗前，两组的BUN、Scr、UAER水平差异无统计学意义(P>0.05)；治疗后，试验组的BUN、UAER水平低于对照组(P<0.05)，见表4。

表3 两组患者治疗前后免疫水平比较

表4 两组患者治疗前后肾功能比较

3 讨 论

糖尿病CKD早期症状较少，起病隐匿，早期微量蛋白尿不易引起注意，当出现大量蛋白尿或者水肿后才被发现，一旦发生，疾病逆转的可能性极小，最终形成肾功能不全〔5〕。糖尿病CKD患者糖代谢处于异常状态，肾脏组织产生过多的活性氧簇，机体正常的氧化还原动态平衡遭到破坏〔6〕。活性氧簇是细胞重要的信号分子，经过多条信号通路产生生长因子和细胞因子，进一步加速糖尿病CKD的发生〔7〕。因此，早期预防并发现糖尿病CKD具有重要的临床意义，应当早期干预，早期去除危险因素，并且做出合理评估，有效预防其恶化〔8〕。

患者体内葡萄糖和糖基化蛋白发生进一步氧化，自由基水平升高，机体抗氧化能力下降，脂质过氧化物增多，如MDA等，SOD活性下降〔9〕。VEGF属多功能细胞因子，可增加血管通透性，同时还可促进血管新生〔10〕。VEGF和ES呈正相关，ES能够抑制VEGF的表达，抑制内皮细胞增生，起到抑制血管新生的作用〔11〕。因此，VEGF和ES的水平均能准确反映患者血管的新生状态〔12〕。GSH能够提供含有巯基的半胱氨酸，为谷胱甘肽抗氧化的关键。ES能结合氧自由基，清除过氧化氢或其他过氧化物，减轻各种过氧化物对机体的伤害〔13〕。此外，研究证实ES能够改善高血压患者的血管内皮功能〔14〕。总而言之，有望通过清除氧自由基改善患者氧化应激水平、免疫水平及血管新生状态，从而有效治疗早期糖尿病CKD。

本研究结果提示，不仅能够抑制异常血管新生，还具有调节免疫应答和抗氧化的作用；GSH能够改善患者的免疫功能，CD3+、CD4+、CD4+/CD8+等指标水平升高，即细胞免疫水平升高。但是，本研究入选病例较少，仍需进一步深入研究。

1左满花，唐 俊.还原型谷胱甘肽对早期糖尿病慢性肾脏疾病患者氧化应激、血管新生及免疫功能指标的影响〔J〕.中华糖尿病杂志，2015；23(11)：973-7.

2魏 卓.还原型谷胱甘肽对早期2型糖尿病肾病氧化应激状态的影响〔J〕.中外医疗，2015；26(22)：136-7.

3靳新东，牛喜平.还原型谷胱甘肽对早期糖尿病肾病患者血液指标的作用〔J〕.海南医学院学报，2015；21(12)：1633-5.

4柏志强，付 熠，黄京璐，等.还原性谷胱甘肽治疗对非ST段抬高型心肌梗死患者近期预后及血浆硫氧还蛋白水平变化的影响〔J〕.热带医学杂志，2015；15(4)：507-10.

5Redzwan SM，Rosita J，Sokhini AMM，etal.Detection of serum AFB 1-lysine adduct in Malaysia and its association with liver and kidney functions〔J〕.Int J Hygien Environ Health，2014；217(4-5)：443-51.

6江 帆.维持性透析患者体内氧化应激状态及影响因素研究〔J〕.现代生物医学进展，2016；16(3)：461-5.

7王 薇，王 露，郭 丹，等.利拉鲁肽对肥胖2型糖尿病患者MDA、GSH-Px水平的影响〔J〕.中国医科大学学报，2015；44(1)：84-6.

8Watanabe K，Okada K，Fukabori R，etal.Methylglyoxal (MG) and cerebro-renal interaction：does long-term orally administered mg cause cognitive impairment in normal sprague-dawley rats〔J〕?Toxins，2014；6(1)：254-69.

9林书典，詹 锋，武 伟，等.可溶性 klotho 蛋白与慢性肾脏病患者体内氧化应激的关系研究〔J〕.中国全科医学，2016；19(11)：1297-300.

10董闪闪，张 洁，刘 璠，等.2型糖尿病肾病患者尿足细胞标志蛋白和血管内皮生长因子水平与氧化应激的相关性〔J〕.重庆医学，2016；45(10)：1334-6.

11陈 亮，姚志灵，刘文浩.甘精胰岛素联合二甲双胍对老年2型糖尿病患者氧化应激的影响〔J〕.重庆医学，2016；45(11)：1502-4.

12Garcia-Bello JA，Gómez-Díaz RA，Contreras-Rodríguez A，etal.Carotid intima media thickness，oxidative stress，and inflammation in children with chronic kidney disease〔J〕.Pediat Nephrol，2014；29(2)：273-81.

13王 爽，郑秀艳，孙文华，等.宾赛克嗪对有机磷中毒合并呼吸衰竭患者氧化应激反应及细胞免疫因子水平的影响〔J〕.现代生物医学进展，2015；15(32)：6293-5.

14Walsh J，Jenkins RE，Wong M，etal.Identification and quantification of the basal and inducible Nrf2-dependent proteomes in mouse liver：Biochemical，pharmacological and toxicological implications〔J〕.J Proteom，2014；108(100)：171-87.

〔2017-01-15修回〕

(编辑 徐 杰)

R587

A

1005-9202(2017)19-4861-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.19.078

国家自然科学基金(81273166)；广东省自然科学基金(S2012010008271)

1 湖北医药学院附属随州医院

丁元林(1967-)，男，教授，博士生导师，主要从事卫生统计与流行病学研究。

许诚楷 (1988-)，男，硕士，住院医师，主要从事糖尿病发病机制研究。