马新福 刘 梅 戈 锐 赵久达

(青海大学附属医院胃肠外科，青海 西宁 810000)

结直肠癌中血小板反应蛋白-1和生存素的表达及临床意义

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(青海大学附属医院胃肠外科，青海 西宁 810000)

目的检测结直肠癌中血小板反应蛋白(TSP)-1和生存素(Survivin)的表达，探讨二者在肿瘤中的关系及意义。方法确诊为结直肠癌患者62例为观察组，正常结肠黏膜组织21例为对照组，均留取术后蜡块组织，切片后应用免疫组化SP法检测TSP-1和Survivin的表达。结果观察组TSP-1表达阳性率明显低于对照组，Survivin表达阳性率明显高于对照组。观察组中TSP-1和Survivin表达阳性率与肿瘤最大径、脉管累犯相关，Survivin表达阳性率与肿瘤淋巴结转移和分化程度密切相关。相关分析显示观察组中TSP-1和Survivin无明显相关性。结论结直肠癌中TSP-1低表达、Survivin高表达对肿瘤形成和进展有一定促进作用，二者无明显协同作用。

结直肠癌；血小板反应蛋白-1；生存素；免疫组化

结直肠癌好发于中老年人，病变形成中上皮细胞异型增生，呈浸润性生长，可以对局部组织形成破坏，部分患者伴有转移〔1〕。肿瘤形成中相关蛋白出现明显异常〔2〕。血小板反应蛋白(TSP)-1是TSPs家族A亚组中的成员，参与调节细胞活动、细胞骨架组织和细胞分化的过程〔3〕。生存素(Survivin)是被发现的凋亡抑制蛋白家族中最小的新成员，具有强大的抗凋亡作用〔4〕。研究显示Survivin表达升高对肿瘤形成和进展中有一定的促进作用〔5〕。本文关注TSP-1和Survivin在结直肠癌中的表达特征及相关性。

1 资料与方法

1.1临床资料 2014年1月至2016年7月青海大学附属医院确诊为结直肠癌患者62例为观察组，均经手术治疗，并经术后病理医师阅片确诊，其中男33例，女29例；年龄37～79(平均56.8)岁；其中高分化20例，中分化27例，低分化15例。排除标准：①近3个月有严重感染；②有先天性疾病；③合并其他器官恶性肿瘤。正常结肠黏膜组织21例为对照组，其中男11例，女10例；年龄40～76(平均53.6)岁。两组一般临床资料无明显差异，具有可比性。

1.2免疫组化检测TSP-1和Survivin的表达 术后组织均经甲醛溶液固定，常规取材，脱水，石蜡包埋，切片后应用免疫组化SP法检测TSP-1和Survivin的表达，应用二氨基联苯胺(DAB)显色，操作均由病理科主管技师进行操作，严格按说明书进行操作，做好质量控制工作。

1.3TSP-1和Survivin的判读 TSP-1和Survivin的阳性部位是细胞质，以出现淡黄到棕黄色颗粒为阳性。先在低倍镜下选择上皮细胞集中的区域进行观察，再在高倍镜下选择5个视野进计数，取平均值。阳性率<10%为阴性，≥10%为阳性。

1.4统计学方法 采用SPSS17.0统计软件进行χ2检验和线性相关分析。

2 结 果

2.1两组TSP-1和Survivin阳性率比较 观察组较对照组TSP-1明显低表达，Survivin明显高表达(P<0.05)。见表1。

表1 两组TSP-1和Survivin阳性表达率比较〔n(%)〕

2.2观察组TSP-1和Survivin表达阳性率在不同临床病理特征中的比较 观察组中TSP-1和Survivin表达阳性率与肿瘤最大径、脉管累犯相关；Survivin表达阳性率与肿瘤淋巴结转移和分化程度密切相关。见表2。

2.3观察组TSP-1和Survivin相关性 TSP-1和Survivin无明显相关性(P>0.05)。

表2 观察组中TSP-1和Survivin表达的阳性率在不同临床病理特征中的比较〔n(%)〕

3 讨 论

结直肠癌病变形成中涉及较多的遗传易感因素、基因组学和蛋白组学的表达异常〔6〕，研究显示其与癌基因、抑癌基因、血管生成、凋亡等肿瘤形成因素均相关〔7〕。TSP-1是最早于1971年发现的一种内源性血管生成抑制因子，在调节组织细胞和细胞外基质的黏附、迁移及增殖方面可能有一定作用〔8〕。TSP-1可以抑制血管内皮细胞及平滑肌细胞的迁移、增殖，能可以减少血管内皮细胞形成细胞索并发展成血管腔的能力〔9,10〕。由于TSP-1可以抑制血管内皮细胞的生长及运动，因此TSP-1高表达也可以抑制肿瘤浸润和转移。Survivin基因定位于染色体17q25，全长14.7 kb，由3个内含子和4个外显子组成，其表达的蛋白编码142个氨基酸〔11,12〕。Survivin在正常组织中的表达极少，而在生长活跃的胚胎组织和肿瘤组织中表达升高〔13〕。Survivin表达具有周期依赖性，只在细胞周期的G2/M期表达，肿瘤组织中Survivin表达升高使恶性转化细胞能突破凋亡的调控点处于分裂的状态中，促进肿瘤性增殖及肿瘤生长〔14,15〕。赖坤兰等〔16〕发现Survivin在结肠癌中表达升高，认为Survivin表达升高是转移的重要提示因素，同时患者预后差。

本研究提示TSP-1发挥的是抑癌作用，主要机制与对血管生成抑制有明显关联，也可能与对VEGF表达下调有关。本文提示Survivin发挥的是癌基因样的作用，这与Survivin本身对凋亡的拮抗有关，此时凋亡细胞数量减少，细胞处于增殖状态，细胞生存持续时间长。TSP-1和Survivin二者异常表达时肿瘤处于生长活跃状态，此时肿瘤体积增大，对周围组织的侵袭破坏能力增强〔17,18〕。本文结果提示二者均可以促进肿瘤细胞对脉管的侵犯，使肿瘤细胞易于播散。Survivin参与肿瘤的淋巴结转移及肿瘤内在分化过程中，由于分化是细胞由幼稚到成熟的多种阶段的表现，此时的肿瘤细胞停滞于较幼稚状态，恶性程度增加。虽然肿瘤中TSP-1和Survivin异常表达均为促进肿瘤生长的因素，但是二者的通路不在同一水平上。TSP-1对血管的影响是抑制作用，Survivin对血管的影响是促进作用，因此二者是拮抗的，但是其表达的平衡不协调〔19,20〕，二者通过各自的调节途径发挥各自的作用。TSP-1表达下调或丢失、Survivin的表达升高使肿瘤细胞易于侵袭周围组织和邻近脏器，促进肿瘤细胞增殖、血管生成和迁移。

1李晓霞,逯晓波,刘建利,等.1 075例结肠癌患者临床病理分析〔J〕.中华胃肠外科杂志,2005;8(6):484-6.

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3张春丽,杨 敏.血小板反应蛋白-1、E-Cadherin表达与大肠癌血管生成关系〔J〕.肿瘤学杂志,2009;15(2):112-4.

4Xiang Y,Yao H,Wang S,etal.Prognostic value of Survivin and Livin in nasopharyngeal carcinoma〔J〕.Laryngoscope,2006;116(1):126-30.

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16赖坤兰,邹继彬.Paxillin和Survivin在结肠癌中的表达及其意义〔J〕.实用医技杂志,2008;15(11):1404-5.

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〔2017-06-15修回〕

(编辑 苑云杰)

R735

A

1005-9202(2017)19-4817-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.19.057

1 青海大学附属医院急救中心 2 青海大学附属医院肿瘤内科

赵久达(1977-)，男，硕士，主任医师，主要从事胃癌研究。

马新福(1973-)，男， 副主任医师，主要从事胃肠疾病研究。