高 盼，鲁照明，刘襄艳，张幸丽，凡 丞，师莹莹，侯桂琴

郑州大学药学院 郑州 450001

miR-199a-3p在食管鳞癌细胞中的表达及其对细胞增殖和凋亡的影响*

高 盼，鲁照明，刘襄艳，张幸丽，凡 丞，师莹莹，侯桂琴#

郑州大学药学院 郑州 450001

miR-199a-3p；食管鳞癌；细胞增殖；细胞凋亡

目的：探讨miR-199a-3p在食管鳞癌细胞中的表达情况及其对细胞增殖、凋亡的影响。方法采用Real-time PCR法检测miR-199a-3p在5株食管鳞癌细胞TE1、Eca109、EC9706、KYSE450、KYSE790中的表达。用siRNA-MateTM转染试剂将人工合成的miR-199a-3p模拟物 mimics转染Eca109、EC9706细胞后，采用Real-time PCR法检测miR-199a-3p的表达，采用克隆形成实验、CCK-8法及双染法检测细胞克隆形成能力、增殖能力和凋亡率，Western blot检测mTOR、p-p70S6K和Bcl-2蛋白的表达。以未转染细胞为空白对照，以转染mimics阴性对照的细胞为阴性对照。结果miR-199a-3p在5株食管鳞癌细胞中均有表达，表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。与空白对照组和阴性对照组细胞相比，转染mimics的Eca109和EC9706细胞中miR-199a-3p相对表达量显著升高(P<0.001)，细胞克隆形成能力降低(P<0.001)，细胞增殖能力降低(P<0.001)，细胞凋亡率增加(P<0.001)，mTOR、p-p70S6K及Bcl-2蛋白表达水平降低。结论miR-199a-3p可能是通过调节mTORC1/p70S6K信号通路来抑制食管鳞癌细胞的增殖并促进细胞的凋亡。

食管癌是一种较常见的消化道恶性肿瘤，我国90%以上的食管癌患者其病理学类型为食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma，ESCC)[1]。微小RNA(microRNA，miRNA)是一种内源性的非蛋白质编码的小分子RNA，可通过与靶基因mRNA的非编码区域(3’-untranslated region，3’UTR)互补匹配，干扰mRNA分子的翻译，从而下调靶基因的表达[2]。miR-199a-3p是miR-199a的一个亚基，能够调控细胞增殖和凋亡。报道[3]证实，miR-199a可通过与MeCP2结合调节mTOR信号通路，影响RTT(Rett Syndrome Phenotypes)疾病的发展过程；通过抑制mTOR和c-Met的表达而提高肝癌细胞对多柔比星的敏感性[4]；也可通过靶向mTOR的3’UTR，抑制mTOR的表达，从而抑制子宫内膜癌细胞的增殖[5]；还可通过抑制Met和mTOR的表达，抑制乳头状甲状腺癌细胞的增殖和迁移[6]。作……