刘苗苗，程家慧，林海燕，沈志成，王志勇，林朝阳

(1.浙江大学植物保护系，昆虫科学研究所，浙江 杭州 310058； 2.海南大学农学院，海南 海口 570228)

抗草甘膦转基因玉米AG16分子特征和抗性鉴定

刘苗苗1，程家慧1，林海燕1，沈志成1，王志勇2，林朝阳1

(1.浙江大学植物保护系，昆虫科学研究所，浙江 杭州 310058； 2.海南大学农学院，海南 海口 570228)

抗草甘膦转基因玉米(Zeamays)能有效降低杂草防治成本，具有重要的应用前景。浙江大学转基因抗虫植物和生物安全实验室前期通过农杆菌介导法，以玉米Hi-Ⅱ品种为受体导入新型抗草甘膦基因G10evo，获得不同的抗草甘膦玉米转化系。在此基础上，筛选了具有良好草甘膦抗性的转基因玉米转化系AG16。本研究利用PCR、Western杂交、Southern 杂交、ELISA等方法对AG16进行分子特征检测，并对AG16的草甘膦抗性水平进行鉴定。结果表明，G10evo在AG16中为单拷贝插入；G10evo蛋白在AG16的根、茎和叶组织中表达；ELISA分析表明，草甘膦喷洒前，嫩茎中G10evo蛋白的表达量达到9.975 μg·g-1。温室中草甘膦抗性测定结果显示，AG16能抗4～8倍田间浓度的草甘膦，远高于草甘膦在实际生产中的使用量。因此，AG16草甘膦抗性水平达到生产需求，具有产业应用潜力，为培育具有自主知识产权的抗草甘膦玉米提供了种质资源。

G10evo基因；PCR检测；Southern 杂交；Western杂交；蛋白定量；抗性鉴定；杂草防治

玉米(Zeamays)是全球主要的粮食作物之一，也是世界上产量最高的粮食作物之一[1]，同时，玉米生产过程中投入少，产出高，光合产物总量有50%～60%贮存于秸秆当中，是理想的饲料和工业原料[2-3]。自1990年第1株转基因玉米问世以来，转基因技术在玉米育种中发挥了巨大作用，定向改良抗病虫、抗逆性、抗除草剂、雄性不育等性状，在玉米遗传改良方面展示出了良好的应用前景[4]。……