王强辉 翟健程 夏彦玲 刘伟石 李和平

(东北林业大学，哈尔滨，150040)

驯鹿EGFR基因克隆及序列分析1)

王强辉 翟健程 夏彦玲 刘伟石 李和平

(东北林业大学，哈尔滨，150040)

以快速生长期雄性驯鹿(Rangifertarandus)鹿茸顶端表皮组织为研究材料，提取其顶端表皮组织总RNA，参考GenBank数据库中牛、羊的表皮生长因子受体(EGFR)基因序列设计同源引物；采用RT-PCR技术、分子克隆技术首次成功获得雄性驯鹿茸顶端表皮组织EGFR基因编码区部分cDNA序列，片段大小为910 bp；Blast比对发现驯鹿EGFR基因与牛、羊、马、人、鲸、野猪的同源性分别是97%、96%、88%、86%、92%、89%，同源性均在85%以上，表明驯鹿EGFR基因在进化上比较保守；构建系统进化树发现驯鹿EGFR基因与牛亲缘关系最近，与人的亲缘关系最远；最后通过在线分析软件预测获得EGFR基因序列对应mRNA最小自由能二级结构。

驯鹿；EGFR基因；RT-PCR；分子克隆；生物信息学

表皮生长因子受体(EGFR)是细胞表面具有配体介导的受体酪氨酸激酶活性的跨膜蛋白，是重要的ErbB受体蛋白家族成员，又名ErbB-1[1]。EGFR分子具有3个结构域，分别是与配体结合区、跨膜区以及羧基端具有受体酪氨酸激酶活性的区域[2]。目前已经发现的ErbB家族成员有EGFR/ErbB-1、ErbB-2、ErbB-3、ErbB-4[3]，其中对EGFR研究最为广泛。研究发现，EGFR存在6种配体类型，分别是表皮生长因子(EGF)、转化生长因子(TGF)、安非调节素、Bcta-celluin、肝素结合样EGF、表皮调节素(EPR)，其中EGF、TGF、Qmhiregulin只能和EGFR结合，其余的和其他ErbB家族配体共同结合发挥作用[4]。大量研究表明，EGFR基因的过量表达或者变化与人类肿瘤的发生、转移、浸润有着密切的关系[5]，其作用机理是EGFR与配体结合进而激活本身固有的酪氨酸激酶的活性，酪氨酸残基进行自身磷酸化活化EGFR，活化后的EGFR可以通过一系列信号转导通路激活下游的生长因子活性，从而刺激细胞增殖、分化、抗凋亡等[6]。……