许 玲王元琮何晓兰 黄益洪 徐照龙 邵宏波张大勇

江苏省农业科学院农业资源与环境研究所 / 盐土农业研究中心, 江苏南京 210014

大豆转录因子GmMYB52的克隆、表达及结合功能分析

许 玲**王元琮**何晓兰 黄益洪 徐照龙 邵宏波*张大勇*

江苏省农业科学院农业资源与环境研究所 / 盐土农业研究中心, 江苏南京 210014

MYB类转录因子在植物的生长发育和逆境响应中有重要的调控作用。依据课题组前期获得的盐胁迫相关的数字表达谱(DGEP)数据, 获得盐胁迫响应显著上调基因GmMYB52, 利用RT-PCR方法从栽培大豆(Williams 82)中克隆该基因片段, 并与已公布的Williams 82基因组数据库序列比对, 该基因与GmMYB52序列一致。生物信息学分析表明, GmMYB52编码区(CDS)全长1083 bp, 编码360个氨基酸。其编码的氨基酸序列具有MYB类转录因子的共同特征, 其距N端110～160氨基酸残基处有MYB结构域; 系统进化树分析表明, 该基因编码的蛋白与GmMYB62、拟南芥AtMYBSt1、苜蓿MtMYB52、水稻OsMYBS3及木豆CcMYB-like protein J的亲缘关系最近; 实时荧光定量PCR结果表明, 大豆根部GmMYB52的转录水平受外界非生物逆境的调控, 用脱落酸(ABA)和低温(4℃)处理后12 h明显上调, 用氯化钠和PEG处理0.5～24.0 h后检测到GmMYB52的转录水平在50%～600%区间内呈现出先上调后下调再上调的趋势。GmMYB52为组成型表达, 在大豆的幼苗期和开花期表达较多, 在成熟期表达相对较低。GmMYB52在茎叶与开花期的花中表达较强, 在根的表达较弱, 而在成熟期的豆荚中几乎不表达。亚细胞定位的结果表明, GmMYB52定位于细胞核, 符合典型转录因子的定位特征。酵母杂交系统检测表明, GmMYB52具有转录激活特征,并且能够与MYB相关顺式作用元件基序相结合。……