余杰，毛建文，徐彬

1.广东药科大学生命科学与生物制药学院，广东广州 510006；2.广东药科大学基础学院，广东广州 510006

ClC-3基因敲除小鼠的构建及鉴定

余杰1，毛建文2，徐彬1

1.广东药科大学生命科学与生物制药学院，广东广州 510006；2.广东药科大学基础学院，广东广州 510006

目的 构建并鉴定ClC-3基因敲除小鼠，为研究ClC-3氯通道蛋白的生物学功能提供动物模型。 方法 将从2015年9月—2016年9月选取的6只赛业生物科技有限公司 (广州)构建的ClC-3flox/+小鼠与2只Jackson实验室引进的Ubc-Cre小鼠进行杂交繁殖，得到基因型为ClC-3flox/flox-Cre+及ClC-3flox/+-Cre+的小鼠。取鼠尾DNA，通过PCR法鉴定子代小鼠的基因型。结果 子代小鼠基因组DNA结果显示在357 bp与100 bp处均有条带，符合预期结果。 结论 该研究基于Cre/Loxp系统，利用loxp转基因的ClC-3flox/+小鼠和在全身表达 Cre重组酶的Ubc-Cre小鼠，成功构建并鉴定了ClC-3基因敲除小鼠。

ClC-3；基因敲除；Cre/Loxp系统

课题组自 2000年开始从事 ClC-3蛋白的生物学功能研究，致力于获得 ClC-3氯通道蛋白参与某些疾病的实验证据。有研究表明ClC-3氯离子通道参与了细胞的转运[1]、增殖[2-3]、迁移[4-8]、凋亡[9]等过程，另外，一些疾病的发生发展也与ClC-3有着密不可分的联系[10-17]，例如其在肿瘤组织中高表达[18-19]，且在不同病理分级之间存在明显差异[20]。因此，成功构建ClC-3基因敲除小鼠，为研究ClC-3基因与某些疾病的相关性提供动物模型具有重要的意义。现已有实验室成功构建组织特异性ClC-3敲除小鼠模型用于疾病研究，例如，肠特异性敲除ClC-3会加重炎症性肠病[20]，心脏特异性敲除 ClC-3基因会导致成年鼠心肌肥厚。但目前还没有实……