建立一种快速鉴定大西洋鳕鱼 及其制品的SYBR Green荧光PCR方法
2017-09-21孙晓飞刘淑艳
东北师大学报(自然科学版) 2017年3期
关键词:检测
孙晓飞,蒋 丹,万 超,刘淑艳,吴 斌
(辽宁出入境检验检疫局,辽宁 大连 116001)
建立一种快速鉴定大西洋鳕鱼 及其制品的SYBR Green荧光PCR方法
孙晓飞,蒋 丹,万 超,刘淑艳,吴 斌
(辽宁出入境检验检疫局,辽宁 大连 116001)
通过大西洋鳕鱼CoxI序列的比对分析,在序列的差异处设计了大西洋鳕鱼的特异性引物,建立了一种大西洋鳕鱼SYBR Green荧光PCR定性检测方法,并进行了引物特异性和灵敏度分析.结果表明:检测的大西洋鳕鱼样品和49份其他动、植物样品DNA中,只有大西洋鳕鱼样本出现显著扩增,6次平行反应的Ct值为23.216±0.113,5份大西洋鳕鱼同属鳕鱼样品和44种常见其他动、植样品均无明显扩增曲线.模拟样品灵敏度检测实验显示,该特异性引物可用于检测质量分数为0.01%的大西洋鳕鱼肉粉,灵敏度可达0.06 ng/μL.通过对市售鳕鱼片检测的验证,该方法特异性强,灵敏度高,可用于食品中大西洋鳕鱼成分真实性的鉴别.
大西洋鳕鱼成分;SYBR Green荧光PCR; CoxⅠ
大西洋鳕鱼(Gadusmorhua)为鳕形目鳕科鳕属鱼类,原产于北欧至加拿大及美国东部的北大西洋寒冷水域,是全世界年捕捞量最大的鱼类之一.鳕鱼肉味甘美、营养丰富,经济价值极高,[1]其主要出口国是加拿大、冰岛、挪威及俄罗斯.在我国鳕鱼的消费量呈逐年递增趋势.鳕形目鱼类品种繁多,由于形态学差异较小,仅用传统方法例如鳍条数、鳃耙数和脊椎骨数难以准确地区分出鳕鱼品种.而不同的鳕鱼品种市场价格差异悬殊,大西洋鳕鱼常被其他鱼类以次充好,曾经有不法商贩用 “油鱼”冒充大西洋鳕鱼导致食用者发生腹泻的报道;……
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