蒋超，赵群，金艳，袁媛*，赵玉洋

(1.中国中医科学院 中药资源中心，北京 100700；2.皖西学院 化学与生命科学系，安徽 六安 237012)

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快速PCR技术鉴别中药材蛤蚧的方法研究△

蒋超1，赵群2，金艳1，袁媛1*，赵玉洋1

(1.中国中医科学院 中药资源中心，北京100700；2.皖西学院 化学与生命科学系，安徽 六安237012)

目的：建立简单快速鉴别蛤蚧的特异性PCR方法。方法：对比蛤蚧及其伪品细胞色素C氧化酶I亚基基因(CO I)序列，设计蛤蚧特异性PCR鉴别引物，优化特异性PCR条件，对蛤蚧及其7种常见混淆品进行扩增及荧光检测。结果：扩增产物经琼脂糖凝胶电泳和荧光检测，所有蛤蚧药材均能扩增出约400bp的特异性条带，加入SYBR Green I染料后，在365nm下出现强烈绿色荧光，混伪品不具特异条带和绿色荧光，鉴别操作可在30min内完成。结论：快速PCR结合荧光染料检测可快速鉴别蛤蚧及其常见伪品，为蛤蚧的快速鉴定提供了新的思路和方法。

快速PCR；分子鉴定；蛤蚧；荧光检测

中药蛤蚧来源于壁虎科动物蛤蚧GekkogeckoLinnaeus.的干燥体，在临床上主要用于肺肾不足、虚喘气促、劳嗽咳血等。以蛤蚧为主要原料的中成药，如蛤蚧精、蛤蚧补肾丸、蛤蚧定喘丸等应用广泛，用量甚大。近年来随着蛤蚧资源的缩减，蛤蚧伪品时有出现，市场上出现过的蛤蚧伪品多达18种，包括东方蝾螈、中国瘰螈、变色树蜥、无蹼壁虎、多疣壁虎、红螺疣螈、喜山岩蜥、青海沙蜥、石龙子、变色沙蜥等[1-3]。对其中一些品种，蛤蚧正品与之形态学特征差别细微，传统的方法难以对其药材进行鉴定[4]。为确保药材市场中蛤蚧的质量及其临床疗效，需要建立快速、准确的方法进行鉴定。……