蒋超，李军德，袁媛，金艳，赵玉洋

(中国中医科学院 中药资源中心，北京 100700)

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虻虫的PCR-RFLP鉴别研究△

蒋超，李军德，袁媛*，金艳，赵玉洋

(中国中医科学院 中药资源中心，北京100700)

目的：建立简单、准确的虻虫DNA分子标记鉴别方法。方法：扩增并分析虻虫及7种常见伪品的细胞色素C氧化酶I亚基基因(COI)序列，根据差异片段设计聚合酶链反应-限制性内切酶酶切长度多态性(PCR-RFLP)引物，使用限制性内切酶进行酶切鉴别。结果：引物对MengChong-Dig.F/MengChong-Dig.R可扩增虻虫及其伪品COI序列，产生约490bp条带，限制性内切酶DraI可以识别虻虫及其伪品的差异序列，仅虻虫的CO I片段可被酶切形成两个片段，从而特异性鉴别是否为虻虫。结论：本实验建立的PCR-RFLP可以作为虻虫的DNA鉴定方法。

虻虫；聚合酶链反应-限制性内切酶酶切长度多态性；分子鉴定；CO I序列

虻虫为虻科动物复带虻TabanusbivittatusMatsumura等的雌虫体(2015年版《中华人民共和国药典》四部)，始载于《神农本草经》，具有调经破血、消癥软坚的功能。中医临床用于经闭、瘀血作痛、跌仆损伤等病症[1]。虻虫雌虫吸食牛、马等动物血液，亦吸食人类血液。虻虫为少常用中药，随着经济的发展，个体化动物养殖减少，虻虫资源蕴藏量处于下降趋势。市场上虻虫类基源动物来源也日趋复杂，除复带虻外，同科虻属、黄虻属、麻虻属、瘤虻属多种虻虫也广泛应用。同时，作者对玉林、安国、亳州等大型药材市场调查发现，蜜蜂科昆虫中华蜜蜂ApisceranaFabricius、意大利蜜蜂A.melliferaligusticaSpin.，熊蜂属(Bombus)昆虫，胡蜂科(Vespidae)昆虫的各类成虫炮制后与虻虫形态相似……