郑坚强+韩素娜+时锦锦+赵楠+彭新榜+司俊玲+许春平

摘要：将1株西方许旺酵母菌株应用于降解类β-胡萝卜素产生香味物质的体系中，为生物技术制备香精香料提供研究基础，对其液态发酵培养基及发酵条件进行优化，确定纯种液态发酵最佳培养基组分及发酵条件。以西方许旺酵母为试验菌株，采用摇瓶发酵的方式，研究培养基组分（碳源、氮源、无机盐离子）及添加量与发酵培养条件（温度、初始pH值、接种量、摇床转速）对菌种产双加氧酶的情况。结果表明，培养基最优组成为10.00 g/L葡萄糖、10.00 g/L 蛋白胨、5.00 g/L酵母粉、0.20 g/L FeSO4、0.45 g/L MgSO4·7H2O、3.00 g/L NaNO3、0.50 g/L KCl；最佳优化条件为温度27.90 ℃、起始pH值为7.21、转速为160.00 r/min、接种量为5.00%，发酵时间为72.00 h，此时酶活性达到1.23 U/mL，5次中心点重复试验结果稳定可靠；通过响应面分析发现，温度、起始pH值作用极显著，温度和起始pH值交互显著，客观反映了微生物的发酵条件。

关键词：西方许旺酵母；双加氧酶；发酵条件；优化

中图分类号： TS201.3文献标志码： A文章编号：1002-1302（2017）12-0124-07

类胡萝卜素广泛分布于自然界中，是很多化合物的前体物质，如C13-类胡萝卜素（非萜类化合物），该化合物包括紫罗酮、二氢大马酮等，是构成茶叶、玫瑰、葡萄酒等的主要香味物质[1]。这些化合物香味阈值低，其中很多是强有效的香气化合物，已经引起香精香料行业的极大关注[2]。从植物资源中萃取类胡萝卜素降解的香味物质生产成本高，而采用生物技术制备的香味物质是纯度高的天然化合物[3]。有学者利用泥土中的细菌、丝状真菌降解类胡萝卜素转化为单环、双环的单萜，但实际应用很少，还没有任何一个单萜类的生物转化已经商品化、工业化生产[4-6]。……