王 威，谢岩黎

（河南工业大学 粮油食品学院，河南 郑州450001）

蒜氨酸酶与凝集素的分离纯化及质谱鉴定分析

王 威，谢岩黎*

（河南工业大学 粮油食品学院，河南 郑州450001）

对大蒜中的蒜氨酸酶和凝集素分离纯化并进行质谱分析。首次采用DEAE－Sepharose Fast Flow阴离子交换层析法对大蒜中蒜氨酸酶和凝集素进行了分离纯化，并采用SDS－PAGE电泳、MALDI－TOF/MS质谱法对目标蛋白进行了鉴定。结果表明：以Tris－HCl作为浸提液，经DEAESepharose Fast Flow柱纯化的蒜氨酸酶和凝集素可达到电泳纯，质谱结果表明，所分离目标物质为蒜氨酸酶和大蒜凝集素，其分子质量分别为54.147 ku和12.152 ku。

蒜氨酸酶；大蒜凝集素；分离纯化；质谱分析

0 引言

大蒜原产于西亚、中亚，与洋葱、葱、韭菜等属于百合科葱属植物（Allium tuberosum）。大蒜味辛性温，风味独特，是常见的饮食调味品，其营养组分多样，种类较为齐全，含有大量对人体健康有益的物质，如维生素、氨基酸、微量元素、含硫有机物、肽类和苷类等，具有很好的药理活性和丰富的营养价值[1]。

凝集素（lectin）是一类能够使细胞凝集的糖蛋白，具有高度的糖结合专一性，是生命科学和临床科学常用的研究工具，广泛应用于刺激淋巴细胞分裂、肿瘤治疗、艾滋治疗等分子与细胞、细胞与细胞相互作用中[2]。据Smeets等[3]报道大蒜凝集素的等电点为4.94。

蒜氨酸酶（Alliinase）在自然状态下，稳定地存在于细胞液泡中，与在葱[4]、洋葱[5]、韭菜[6]中发现的蒜氨酸酶具有较高的同源性，风味物质蒜素（Alliin）是经大蒜组织破裂后，液泡中的蒜氨酸酶进入细胞质中，作用于其中的蒜氨酸而形成的。……