王贵平，胡晓通，刘 帅

（湖南农业大学动物医学院，湖南 长沙 410128）

猪流行性腹泻和猪圆环病毒病混合感染的诊治

王贵平，胡晓通，刘 帅

（湖南农业大学动物医学院，湖南 长沙 410128）

2017年1月，湖南省娄底市某规模化猪场暴发了一场以新生仔猪腹泻和呕吐为主要症状的传染病，从送检腹泻仔猪中经PCR检测到了猪流行性腹泻病毒和猪圆环病毒2型。经过调整免疫程序和对症治疗，该病得到了有效的控制，现报告如下。

1 发病情况

该场存栏经产母猪500头，母猪产前60天和30天注射了国产某公司的猪流行性腹泻病毒活疫苗。上月（12月）下旬开始母猪产仔后第2天，整窝仔猪突然出现呕吐和水样喷射状腹泻。0～7日龄的仔猪腹泻后大多数死亡，8～40日龄以后仔猪腹泻后大多数经过治疗能康复，日龄越大死亡率越低。统计结果：2017年1月份产仔95窝998头，发病881头（占88.28%），死亡609头（占61.02%）。

2 临床症状及现场剖检

3 病原检测

采集6头病猪的淋巴结、肺和肠等病料，送至湖南农业大学动物医学院进行PCR检查。根据流行病学、临床症状和病理剖检变化，初步确定检查项目为猪圆环病毒2型（PCV2）和猪流行性腹泻病毒（PEDV）。

3.1 引物

参考相关文献，送上海生工生物工程股份有限公司合成（表1）。

3.2 样品处理

取病猪的肠道内容物及肠系膜淋巴结和腹股沟淋巴结等组织约0.5 g，剪碎，加1 mL无菌PBS匀浆，加入无菌EP管中，-80℃反复冻融3次，10 000 r/min离心5 min，取100 μL上清液加入无菌EP管中。

表1 本试验中所用到的引物

3.3 RNA提取及反转录

取上述上清液100 μL，按照RNA提取试剂盒操作说明提取总RNA，最后病料RNA溶于100 μL灭菌水中。……