郝涛，马冲，李保松，刘春远，蒋宏

（滨州医学院附属医院结直肠腹壁疝外科，山东滨州256600）

Mob1a真核表达载体构建方法及对MEN通路基因表达的影响研究

郝涛，马冲，李保松，刘春远，蒋宏

（滨州医学院附属医院结直肠腹壁疝外科，山东滨州256600）

目的探讨Mobla真核表达载体构建方法及对MEN通路基因表达的影响。方法利用PCR扩增技术扩增出Mobla编码基因，将其构建到真核表达Mobla载体上，利用脂质体将构建的真核表达载体瞬时转染干细胞，采用Western blot检测Mobla蛋白是否表达，采用荧光素梅报告基因实验对MEN通路基因表达活性的影响。结果本研究成功构建Mobla真核载体，经过小鼠肝脏细胞转染后能对其蛋白质进行提取，Western blot显示：Mobla质粒在小鼠肝脏细胞中表达水平未见异常。荧光素酶报告基因试验进结果显示：Mobla能抑制MEN通路基因信号，能抑制TNF-a刺激引起的MEN通路转录活性。结论采用PCR扩增技术能成功扩增、构建出Mobla真核表达载体，并且对MEN通路基因表达存在一定的影响。

Mobla真核表达；构建方法；MEN通路；基因表达；PCR扩增技术

有丝分裂是一个多因素过程，如果有丝分裂调控中存在明显的差错后，将会引起肿瘤[1]。有丝分裂退出途径（Mitotic Exit Network，MEN）是一种相对完整的控制信号，能有效的调整信号的分裂退出途径，并且经过联级放大后能有效的对有丝分裂的终末进行有效的控制[2]。但是，细胞有丝分裂后期需要在纺锤体下进行基因的重新组合，此时MEN则能激活退出信号，完成核定位操作，完成有丝分裂的退出[3]。细胞有丝分裂过程中，Dbf2-Mob1之间相互作用，磷酸化的Dbf2-Mob1作为效应器促进下游反应[4]。……