金 勤 朱丹雪 周国英 李 河 何苑皞 张 茜,2

(1. 森林有害生物防控湖南省重点实验室 经济林培育与保护教育部重点实验室 中南林业科技大学 长沙 410004；2. 湖南汽车工程职业学院 株洲 412001)

绿色荧光蛋白标记枯草芽孢杆菌Y13UV在油茶体内的定殖*

金 勤1朱丹雪1周国英1李 河1何苑皞1张 茜1,2

(1. 森林有害生物防控湖南省重点实验室 经济林培育与保护教育部重点实验室 中南林业科技大学 长沙 410004；2. 湖南汽车工程职业学院 株洲 412001)

【目的】 枯草芽孢杆菌Y13UV对油茶炭疽病具有良好的防治效果，研究其在油茶体内的定殖动态，为油茶炭疽病的防治提供依据。【方法】 通过原生质体转化法引入绿色荧光蛋白质粒，构建荧光标记菌株。通过喷叶、灌根、喷叶灌根结合处理多种接种方式及重复接种，测定菌株在油茶体内不同组织部位的定殖数量，分析其定殖规律及能力。【结果】 标记菌株可以在油茶根、茎和叶内定殖，单次接种当天，根内回收的标记菌株数量为1.07×105cfu·g-1； 喷叶灌根结合处理7天后，油茶根、茎和叶内标记菌株的数量分别为8.70×102、5.00×102和7.30×102cfu·g-1，均高于喷叶、灌根单独处理。重复接种时，油茶根茎叶内标记菌株的定殖量在接种3～5天内达到高峰，然后呈现稳定趋势， 20天时定殖量开始大幅下降，第30天喷叶灌根处理的油茶根内的定殖量仅为5.30×102cfu·g-1。荧光标记菌株生长较好，稳定表达，对炭疽病菌具有良好的抑制效果。【结论】 枯草芽孢杆菌Y13UV能通过喷叶灌根方式接种在油茶体内定殖并传导，有较好的定殖能力。

绿色荧光蛋白；……