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不同光质对仙客来愈伤组织诱导和分化及生根的影响

2017-08-28伊万伟武兴宝李方华崔兴林丁天明

上海蔬菜 2017年3期
关键词:光质红光蓝光

伊万伟 武兴宝 李方华 崔兴林 丁天明

(酒泉职业技术学院生物工程系,甘肃酒泉 735000)

不同光质对仙客来愈伤组织诱导和分化及生根的影响

伊万伟 武兴宝 李方华 崔兴林 丁天明

(酒泉职业技术学院生物工程系,甘肃酒泉 735000)

本文以仙客来种子经无菌培养获得的叶片为外植体,研究了蓝、白、红不同光质对叶片愈伤组织诱导、愈伤组织分化出芽和不定芽诱导生根的影响。试验结果表明,红光有利于仙客来愈伤组织的诱导,且促进生根作用明显;蓝光对芽的分化效果相对较好,且植物长势良好。

仙客来;组织培养;光质

仙客来(Cyclamen persicum)是报春花科仙客来属半耐寒多年生球茎类草本植物,别名一品冠、兔耳花、翻莲瓣、萝卜秋海棠,目前在培养过程中存在愈伤组织诱导率低、诱导时间长、生根效率不高等问题,严重制约了仙客来组培工厂化育苗的发展。植物的组织培养过程中光质是重要的环境因素,光质主要作为光信号来调节植物的生长、分化等,目前不同光质对仙客来组织培养效应的研究尚未见报道。本试验通过不同光质对仙客来愈伤组织诱导、分化和生根培养影响的研究,为提高仙客来组织培养效率提供理论基础和技术支撑。

1 材料与方法

1.1 试验材料

用流水冲洗仙客来种子(兰州昶荣园林有限公司提供)20min,然后将种子放在35~40℃无菌水中浸泡12h,取出后用70%酒精浸泡1min,用无菌水冲洗3次,然后再用0.1%升汞溶液浸泡并震荡8min,最后再用无菌水冲洗6次。将处理过的种子用无菌滤纸吸干水分,接入MS培养基(3%蔗糖,0.5%琼脂,pH值5.6~5.8)上,每瓶培养基接种3粒种子。培养温度15~20℃,培养45d后,90%种子已长出白色小根,70d后,张开2片叶,获得无菌苗。

仙客来组织培养基本培养基为MS培养基(蔗糖30g/L,琼脂7g/L),添加不同浓度和比例的NAA、6-BA,预先筛选出适合仙客来愈伤组织诱导培养基为M1:MS+NAA0.2mg/L+6-BA0.8mg/L;分化培养基为M2:MS+NAA 0.1mg/L+6-BA 0.5mg/L;生根培养基为M3:1/2MS+NAA 0.3mg/L。

1.2 试验方法

1.2.1 愈伤组织的诱导

取经无菌培养得到的仙客来幼嫩叶片,切成0.5cm×0.5cm方块,接种于愈伤组织诱导培养基M1上,分别置于蓝光、红光及白光下进行愈伤组织诱导,培养温度25℃,光照度2500Lx,每天照射12h,50d后统计愈伤组织诱导率。

愈伤组织诱导率(%)=(形成愈伤组织材料数/接种材料总数)×100。

1.2.2 愈伤组织的分化

将诱导出的质量较好的愈伤组织接种于分化培养基M2上,置于不同光质条件下进行不定芽诱导,培养条件和愈伤组织诱导相同,30d后观察统计不定芽的诱导和分化情况。

愈伤组织分化率(%)=(出芽愈伤组织块数/接种愈伤组织块数)×100。

1.2.3 生根培养

当仙客来无根苗高2cm时,将其转接于生根培养基M3上,置于不同光质条件下进行生根培养,30d后观察统计不定芽的生根情况。

生根率(%)=(不定芽数/生根芽数)×100。

1.2.4 光质选择

光源为LED白光(424~724 nm,459 nm)、LED红光(606~657 nm,635 nm)、LED蓝光(440~500nm,465nm)3种光质,光照培养架为钢架结构,光源设于顶部,高度可调,各光质随机排列。

2 结果与分析

2.1 不同光质对仙客来愈伤组织诱导的影响

由表1可知,3种光质下均能诱导出愈伤组织,但诱导效果差异明显,以白光作对照,红光、蓝光与对照相比诱导率分别提高了14.9%和6.6%;红光对愈伤组织的诱导率最高,为76.6%,白光下愈伤组织诱导率只有61.7%。试验结果表明,在仙客来愈伤组织的诱导上,红光和蓝光有促进作用,且红光的促进作用更明显,植物生长良好。这一结果与王维荣等[1]在番茄组织培养、何小弟等[2]在菊花组织培养中的试验结果一致。

表1 不同光质对仙客来愈伤组织诱导的影响

2.2 不同光质对仙客来愈伤组织不定芽诱导和分化的影响

由表2可知,蓝光、红光、白光下愈伤组织均能分化,且蓝光下分化率较高(52%)。从芽数来看,无论是平均芽数或是最多芽数,均为蓝光下较多;从芽形上看,3种光质下均能形成丛生芽,但从芽长势来看,蓝光下芽的长势较好,其它光质次之。试验结果表明,3种光质条件下,蓝光对愈伤组织分化的效果较佳。但总体上仙客来愈伤组织的分化率不高,这可能与仙客来的种属特性和培养条件有关,有待进一步试验研究。

表2 不同光质对仙客来愈伤组织分化的影响

2.3 不同光质对仙客来不定芽生根的影响

由表3可知,不定芽在3种光质下都能生根,且红光下分化率相对较高(83.3%)。从根系生长情况来看,红光下根系较粗壮,发根时间也较早,表明红光对仙客来的生根具有一定的促进作用,而蓝光对生根效果的促进作用不明显。

表3 不同光质对仙客来不定芽生根的影响

3 讨论

(1)光质对植物愈伤组织诱导的影响:在不同光质条件下,愈伤组织形成的时间、生长状况及诱导率都有明显的差异。在仙客来愈伤组织的诱导上,红光和蓝光有促进作用,且红光效果更明显,植物生长良好,但是红光下诱导率并不是很高,可能是光质和激素条件共同影响愈伤组织的诱导,愈伤组织的诱导是综合因素作用的结果。(2)光质对植物愈伤组织分化的影响:光质诱导分化不定芽往往因植物愈伤组织的不同而异,在仙客来愈伤组织的分化试验中,蓝光对仙客来愈伤组织的分化与白光相比有一定的促进作用,然而整体来讲,愈伤组织的分化率还不高,可能与光周期有关,还有待进一步研究探讨。光质对植物愈伤组织分化的影响因植物种类的不同而异,黄丽华等[3]在辣椒愈伤组织诱导研究中发现,红光和白光促进辣椒子叶愈伤组织的诱导,绿光和蓝光则表现出抑制作用。这可能是由于植物基因控制着植物对不同光质的适应能力。(3)光质对不定芽生根的影响:光质对植物生根培养也有重要的诱导效应,这种效应因光质波长、植物材料而异。本试验研究表明,红光对仙客来的生根具有一定的促进作用,这与许桂芳[4]的研究结果相符,植物通过光受体感受不同的光质,然后通过它们之间的差异调节作物的生长发育。

[1] 王维荣,王咏冬,欧阳光察,等.光质对黄瓜及番茄愈伤组织培养中分化和有关酶的影响[J].植物生理学报,1991,17(2):118~125.

[2] 何小第,邵耀春,李良俊.菊花组织培养过程的光质效应初探[J].激光生物学报,1993,2(2):268~271.

[3] 黄丽华,洪亚辉,戴雄泽,等.光质对辣椒离体愈伤组织诱导及分化的影响[J].湖南农业大学学报(自然科学版),2009,35(6):615~617.

[4] 许桂芳,董减明,周吉源,等.不同光质时华黄苠愈伤组织诱导、增殖及器官分化的效应[J].华中师范大学学报(自然科学版),1994,28(4):533~537.

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