郭尚　李艳婷　周林

摘 要：Fomitiporia yanbeiensis S. Guo & L. Zhou是从山西雁北地区沙棘腐木上分离获得的嗜蓝孢孔菌属的新种，这个种类具有特殊功能成分，具有很高的药用价值。该研究对其菌丝培养条件即温度、pH值、碳源营养、氮源营养进行了试验和分析。結果表明，该菌菌丝体在人工培养基上容易生长，其最适生长温度为25℃，在最适温度下30d左右可长满平皿。最适培养条件：pH为6.0，碳源为葡萄糖，氮源为蛋白胨。这些结果为该菌的人工驯化栽培和功能食品开发提供了参考和依据。

关键词：Fomitiporia yanbeiensis S. Guo & L.Zhou；培养条件；温度；pH值；碳源；氮源

中图分类号 R284 文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2017）15-0025-3

Abstract：Fomitiporia yanbeiensis S. Guo & L. Zhou is isolated from the thermophilic fungus spore species of blue hole in Shanxi Yanbei area. This species has a special functional component and has high medicinal value. The mycelial culture conditions， temperature， pH value， carbon source nutrition and nitrogen source nutrition were tested and analyzed. The results showed that the mycelium was easy to grow on the artificial medium， and the optimum growth temperature was 25 ℃， and the culture dish could be filled by mycelium in 30 days at the optimum temperature. The optimum culture pH was 6，carbon source was glucose，and nitrogen source was peptone. These results provide a reference and basis for the domestication cultivation and functional food development of the medicinal fungi.

Key words：Fomitiporia yanbeiensis S. Guo & L. Zhou；Culture conditions； Temperature； pH ； Carbon source； Nitrogen source

Fomitiporia yanbeiensis S. Guo & L. Zhou是一种从山西雁北地区沙棘树分离获得的嗜蓝孢孔菌属真菌，属担子菌门（Basidiomycota）、伞菌纲（Agaricomycetes）、锈革孔菌目（Hymenochaetales）、锈革孔菌科（Hymenochaetaceae）、嗜蓝孢孔菌属（Fomitiporia），子实体蛋白质含量16.10%，粗多糖2.14%，粗脂肪1.02%，氨基酸12.51%，还含有三萜类化合物、葡聚糖、黄酮等多种对人体有益的功能性成分，是一种具有很高开发和利用价值的药食两用菌类[1]。本试验初步研究了Fomitiporia yanbeiensis S. Guo & L. Zhou菌丝体的培养条件，探究了其最适温度、pH值、最佳C源和N源，以期为新菌子实体的培养与开发利用提供技术依据。

1 材料与方法

1.1 菌株 试验菌株材料采集于山西雁北地区，地区海拔1352m；为针阔叶林和混交林地生长地带，寄主为沙棘树（Hippophae rhamnoides Linn.），标本编号SXSYJBB1510，保存于山西省农业科学院食用菌研究所内。以采集的新鲜子实体，进行组织分离得到纯菌株，保存于山西省农科院食用菌所内（SXSYJJZ No.1510）和中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC No.13380）。

1.2 培养基及培养方法 从温度、pH值、不同营养成分C源和N源4个方面对Fomitiporia yanbeiensis S. Guo & L. zhou菌丝进行室内培养，将试验菌种0.5cm×0.5cm母钟菌块接种到培养皿（90mm×90mm）10mL培养基中，探索其最适温度、pH值、最佳C源和N源。

1.2.1 温度试验培养条件及其对菌丝生长的影响 以马铃薯琼脂培养基为基础培养基，分别在15℃、20℃、25℃、30℃、35℃的温度下进行培养，每个培养皿（90mm×90mm）为一个处理，共5个处理，每个处理5个重复。每天测量菌落的直径，计算平均生长速度，探索菌丝体生长的最适温度。马铃薯琼脂培养基成分：马铃薯（去皮）200g、葡萄糖20g、琼脂20g、磷酸二氢钾1g、维生素B110mg，水1000mL，pH自然。

1.2.2 pH值试验培养条件及其对菌丝生长的影响 以马铃薯琼脂培养基为基础培养基，灭菌前用1mol·L-1的NaOH溶液和1mol·L-1的HCl溶液进行调节，pH值分别为5.0、6.0、7.0、8.0、9.0，共5个处理，每个处理5个重复。为便于测量，在25℃下培养，每天测量菌落直径，计算平均生长速度，探索菌丝体生长的最适pH值。

1.2.3 不同C源对菌丝生长速度的影响 选择葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、玉米粉、可溶性淀粉等5种作为C源，分别加入无C基础培养基，共5个处理，每个处理5个重复，培养条件25℃，每天测量菌落直径，计算平均生长速度，探索菌丝体生长的最适C源。无C基础培养基：KNO3 3.0g、KH2PO4 1.0g、K2HPO4 0.4g、MgSO4 0.5g，定容至1000mL，pH6。

1.2.4 不同N源对菌丝生长速度的影响 选择蛋白胨、尿素、牛肉浸膏、酵母汁、硫酸銨等5种作为N源，分别加入无N基础培养基，共5个处理，每个处理5个重复，在25℃下培养，每天测量菌落直径，计算平均生长速度，探索菌丝体生长的最适N源。无N基础培养基：葡萄糖20.0g、KH2PO4 1.0g、K2HPO4 0.4g、MgSO4 0.5g，定容至1000mL[2]，pH6。

2 结果与分析

2.1 温度试验培养条件及其对菌丝生长的影响 从表1看出，菌丝在15～35℃之间都可以生长，从菌丝生长势上看，25℃时菌丝生长势最强。15～20℃低温时，菌丝较密，随着温度升高时菌丝生长状态变稀疏。在15～20℃时，菌丝生长速度极为缓慢，25℃时生长最快，达到2mm/d；当温度升高时，菌丝生长明显减缓，35℃菌丝生长速度只有25℃时生长速度的50%左右。而且在35℃下生长至第7天时，由于培养温度过高，培养皿内培养基变干菌丝停止生长。差异显著性测验结果表明，菌丝在25℃和30℃时生长速度最快，且与其他温度处理之间存在显著差异。

2.2 pH值试验培养条件及其对菌丝生长的影响 表2所示，菌丝在培养基pH5.0～7.0范围内都能生长。pH6.0时菌丝生长速度最快，达到2mm/d，菌丝较浓密，菌丝生长势旺盛；当pH[>]6.0时，菌丝生长速度随着pH值的升高而减慢，生长势也减慢。由此可见，该菌菌丝适于在偏酸性的环境中生长。同时，差异显著性测验结果表明，pH6.0对菌丝生长速度的影响与其他处理间有显著差异。因此，在本实验中，pH6.0为该菌菌丝生长的最适pH值。

2.3 不同C源对菌丝体生长的影响 从表3可以看出，Fomitiporia yanbeiensis S. Guo & L. Zhou对不同的碳源利用效果不同，在麦芽糖、玉米粉、可溶性淀粉的培养基中虽然菌丝生长速度很快，但菌丝非常稀疏，长势很弱；在以葡萄糖和蔗糖为主要碳源的培养基中，其菌丝生长速度较慢，但菌丝浓密或致密，生长势较强。所以综合来看，Fomitiporia yanbeiensis S. Guo & L. zhou菌丝生长的最适碳源为葡萄糖，其次为蔗糖。

2.4 不同N源对菌丝体生长的影响 从表4中可以看出，蛋白胨和牛肉浸膏的培养基上菌丝生长浓密、生长速度快、生长势强，酵母膏次之，生长速度和生长时都很好，只是菌丝浓密程度不如前者。以尿素为N源的培养基上菌丝生长极慢，生长势也弱，菌丝萌发也较迟，接种后10d才开始萌发。

3 讨论

本文从温度、pH值、不同营养成分C源和N源4个方面对Fomitiporia yanbeiensis S. Guo & L. Zhou菌丝生长状况进行了初步探讨，从菌丝生长速度，菌丝密度和生长势等的观察测试，初步找出了菌丝生长的最适温度为25℃、pH值6、最佳C源为葡萄糖和蔗糖和最佳N源为蛋白胨。

Fomitiporia yanbeiensis S. Guo & L. Zhou菌丝体在人工培养基上容易生长，在最适温度下30d左右长满培养皿，较慢于其他种类的木腐菌[3-5]。通过试验数据的分析可以看出，Fomitiporia yanbeiensis S. Guo & L. Zhou具较广的生长温度，10～35℃都能较好的生长，在25℃和30℃时生长速度最快。

在本次实验中，pH值不同，对菌丝的生长状态影响不是很显著，pH值为6时，生长势稍强，其他处理未见明显差异。但是在不同的pH条件下，对菌丝的生长速度有很大的影响，菌丝在pH6.0时生长速度最快，菌丝较浓密且生长势旺盛，虽然如此，但在从整体上看，其他pH梯度下也能较好生长，表明pH值可能不是影响其生长的主要因素。曹春蕾等在桑木层孔菌固体培养条件的研究中也得到了pH在5.5～8.0范围内变化时菌丝生长差异不大的结论[6]。

该菌菌丝对不同的碳源利用情况差异显著，在以葡萄糖和蔗糖为主要碳源的培养基中，其菌丝生长速度较慢，但菌丝浓密或致密，生长势较强，所以最适碳源为葡萄糖，其次为蔗糖。在桑木层孔菌的固体培养条件研究中也表现为以葡萄糖为碳源时生长速度比淀粉为碳源时稍慢，但长势最好[6]。菌丝在N源的利用上差异不大，蛋白胨是菌丝生长最佳的N源。但在尿素培养基上却抑制其生长，其原因有待进一步研究。

国内首次报道Fomitiporia yanbeiensis S. Guo & L. Zhou菌丝培养条件研究结果，其最适温度为25℃，最适pH为6.0，最佳碳源和氮源为葡萄糖和蛋白胨。该菌作为一新种极具研究和开发价值，本试验提供了一些人工培养基本参数，为今后该菌的菌种制备及大规模发酵利用等提供了理论依据。

参考文献

[1]郭尚，庞荣，郭丽宏，李艳婷，等.嗜蓝孢孔菌属一新种的营养成分及其急性毒性分析[J].中国食用菌，2016，4.

[2]周绪申，李娟，戴玉成.木蹄层孔菌培养条件的研究[J].西北林学院学报.2008，23（5）：127-129.

[3]刘春静，张晓阳，戴玉成，等.鲍氏层孔菌培养条件的研究[J].菌物学报，2005，24（2）：306-309.

[4]魏玉莲，周宝祥.香味全缘孔菌培养条件的研究[J].林业科学研究，2005，18（4）：451-454.

[5]戚淑威，袁理春，赵琪，等.不同培养条件对野生猪苓菌丝生长的影响[J].中国食用菌，2007，26（5）：41-43.

[6]曹春蕾，崔宝凯，包海鹰.桑木层孔菌固体培养条件的研究[J].菌物学报，2011，30（3）：486-490.

（责编：张宏民）