水稻根系耐镉促生菌的筛选
2017-08-22陆仲烟杜国冬时鹏涛秦玉燕王运儒
陆仲烟+杜国冬+时鹏涛+秦玉燕+王运儒

摘 要:根际促生菌(PGPR)是指生活于植物根际环境,并能直接或间接促进植物生长的微生物。PGPR能通过产生生长激素,铁载体、ACC脱氨酶和增加根系溶磷量等来促进植物生长,提高植物抗病性和抗逆性。本研究采用培养基加镉平板法分离出两株耐镉细菌,并对两株细菌对水稻的促生效应进行了验证。
关键词:水稻根;生菌
一、材料与方法
1.试验材料。水稻根际土壤(取于广西环江县Cd污染稻田),牛肉膏蛋白胨培养基。
2.耐镉细菌的分离。采用培养基加Cd平板法分离耐镉细菌 (陈金生等,2005)。取10 g水稻根际土放入装有90 mL牛肉膏蛋白胨液体培养基和适量玻璃珠的三角瓶中,以150 rpm,37 ℃在摇床上振荡12 h。吸取0.1 mL,分别涂布在含Cd为0 mg/L,100 mg/L,300 mg/L,500 mg/L和1000 mg/L的培养基平板上,每个处理重复3次。将平板倒置至恒温箱中37 ℃培养24 h。再将以上平板上的菌株用平板划线法接种于Cd浓度为500 mg/L的培养基上,37 ℃培养24 h。将所得菌株在500 mg/L的培养基上重复接菌培养3次。最后将分离复筛所得的菌株在4 ℃下斜面保存于冰箱中。
3.耐镉细菌生长曲线的测定。在斜面保存的菌种中挑取1环菌落接入100 mL牛肉膏蛋白胨液体培养基中,在摇床上以150 rpm,37 ℃培养12 h,得到种子培养液。吸取4 mL种子液加入含100 mL 液体培养基的三角瓶中,37 ℃,150 rpm 培养56 h,每4小时在分光光度计上测定在波长660 nm下的OD值,以时间为横坐标,OD值为纵坐标绘制耐镉细菌的生长曲线。
4.耐镉细菌对水稻促生效应。用牛肉膏蛋白胨液体培养基在37 ℃,150 rpm,pH为5.5的条件下培养菌株。将培养24 h的菌种,在10000 rpm,25℃条件下离心10 min。……
