董春林 张名义 杨睿

摘要[目的]研究玉米花药培养的影响因素。[方法]以5种基因型玉米为例，研究了基因型、培养基种类以及激素配比对花药诱导过程中形态变化及出愈率的影响。[结果]与YP、MS和玉培相比，N6培养基在花药培养中褐化率、膨大率和死亡率较低；先玉335花药诱导出愈率最高，为23.15%；2 mg/L 2，4-D+1.5 mg/L KT激素配比的效果最佳。[结论]该试验为玉米花药单倍体育种奠定了理论基础。

关键词 玉米；花药培养；形态变化

中图分类号 S513 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2017）03-0016-03

Abstract[Objective]To research the influencing factors of maize anther cultivation. [Method] With five maize genotypes as the research materials， we researched the effects of genotype， culture medium type and hormone combination on the morphological changes and recovery rate of maize in the process of anther induction. [Result] Compared with YP， MS and Yupei， culture medium N6 had relatively low browning rate， swelling rate and mortality during the process of anther induction. Xianyu 335 had the highest induction rate， which was 23.15%. And the hormone ratio 2 mg/L 2， 4D +1.5 mg/L KT had the best effects. [Conclusion] This research laid theoretical basis for the haploid breeding of maize anther.

Key words Maize；Anther cultivation；Morphological changes

自1975年谷明光等利用花药组培技术培养出第1个玉米花粉植株以来[1]，人们不断改进组培条件，在这二三十年中，育成了“桂三1号”、“桂花1号”及“玉单358”等一系列玉米品种[2-4]。然而，玉米花药组织培养存在很大的基因障碍，且愈伤组织的分化率和再生率很低，这些因素都影响了花药组培技术在玉米育种中的应用。该试验选用了生产上大面积推广的玉米杂交种，在4种培养基条件下进行培养，通过观察玉米花药形态变化，统计其出愈率，找出培养基和材料的最适组合，从而分化再生出植株，为玉米花药单倍体育种奠定理论基础。

1 材料与方法

1.1 材料

选用山西省生产上大面积推广的5个杂交种郑单958、先玉335、大丰30、晋单87和丰乐742作为供試材料。

1.2 方法

1.2.1 材料处理。

将材料分期播种于大田中，当雄穗伸出叶鞘时，镜检花药小孢子，选取发育至单核中后期，且无病虫害的雄穗，用湿纱布包好，于5 ℃冰箱中保存。

选择表面呈浅绿色的花序，剪成合适的花序段，于0.1% HgCl2中进行表面消毒4 min，之后用无菌水浸泡冲洗3次，每次5 min。……