林英+司春灿+黄莉萍+高洁

摘要：纳米技术用于作物的病害防治对农业的可持续发展具有重要意义，综述纳米技术在作物病害防治中的具体应用，采用纳米农药用于作物病害的防治、利用纳米传感器对作物病原体进行检测、利用纳米肥料提高作物的抗病能力等，旨在为纳米技术在作物病害防治中提供参考。

关键词：纳米技术；病害防治；可持续发展；作物；应用；抗病能力；研究进展

中图分类号： S435文献标志码： A文章编号：1002-1302（2017）11-0011-05

农作物病害是主要的农业灾害之一，病害的暴发对国民经济、特别是农业生产常造成重大损失。据报道，就全球范围而言，每年由病原真菌或病原细菌引发的植物病害导致作物减产14.1%，直接经济损失达220亿美元/年[3]。因此，对作物病害的防治一直是农业研究的重点和热点。

本研究就纳米技术在作物病害防治中的应用，包括采用纳米农药用于作物病害的防治、利用纳米传感器对作物病原体进行检测、通过施用纳米肥料提高作物的抗病能力等方面的研究进展进行综述，旨在为纳米技术在作物病害防治中的应用提供参考。

1纳米农药用于作物病害的防治

纳米农药指的是将农药原药或者载体粒子纳米化后，形成具有纳米效应、降低用量、提高药效、环境友好等特性的新型农药制剂[4-5]。目前常见的纳米农药有以下几种类型。

1.1纳米包埋型农药

纳米包埋型农药是指将农药与纳米材料通过溶解、包裹作用于粒子内部，或者通过吸附、附着作用于粒子表面[6]。目前常见的用于包埋农药的纳米材料有聚合物基纳米材料、固体脂质纳米材料、无机多孔纳米材料、纳米黏土材料等。这些纳米材料经过加工组装后又形成了不同形状的纳米包埋型农药，如纳米胶囊、纳米球、胶束、纳米凝胶、脂质体、无机多孔纳米粒等[5-6]。与传统农药相比，纳米包埋型农药能起到可控缓释，延长药物的持续性，增强药剂有效成分的溶解性，抑制药物因受光、紫外线、雨水、温度、微生物等因素的影响而过早降解的作用[6-7]。如Kaushik等将相对分子质量分别为600、1 000、1 500、2 000的聚乙二醇和5-羟基间苯二甲酸二甲酯共聚制得的4种嵌段共聚物纳米胶束用于包埋福美双，发现没有采用纳米包埋技术的福美双在水中释放后第7天就检测到了最高浓度，而采用纳米包埋技术的福美双在水中释放后分别于第15、21、28、35天时才检测到最高浓度[8]。除了具备上述纳米包埋型农药共有的优点外，不同的纳米材料由于自身特殊的性质，在防治作物病害的应用方面也具有各自的优点。目前常见的合成纳米包埋型农药的材料性质、合成类型及在防治作物病害上的优点如表1所示。表1常见的合成纳米包埋型农药的材料性质、合成类型及在防治作物病害上的优点

材料性质合成类型在防治作物病害上的优点聚合物基纳米材料

纳米胶囊、纳米球、胶束、纳米凝胶

基于天然聚合物如多糖、海藻酸钠、几丁质等加工成的纳米农药具有无毒、易降解、生物相容性好等优点，得到了广泛的关注和应用[9]；此外，纳米水凝胶和土壤结合后还能增加土壤的持水能力、渗透性、土壤通气量，有利于植物的生长[10]固体脂质纳米材料脂质体容易通过植物的角质层[1]无机多孔纳米材料无机多孔纳米粒无毒、生物相容性好、机械性能稳定、孔径可调节[11]

1.2纳米材料用作农药

最近的研究结果表明，镁、锌、铜、二氧化钛、氧化锌、氧化镁、氧化铜、石墨烯等金属或无机材料被制成纳米级微粒之后本身就具有抑制病原真菌或病原细菌的功效，它们不仅在室内离体试验条件下能抑制病原菌的生长，而且在活体试验条件下也对作物病害表现出了很好的抑制效果[12-14]，但目前还不清楚其抑菌机理。常见的金属或无机纳米材料对病原菌的抑制种类及抑制机理如表2所示。表2常见的金属或无机纳米材料对病原菌的抑制种类及抑制机理

纳米材料抑制病原菌的种类可能的抑菌机理纳米银立枯丝核菌（Rhizoctonia solani）[17]、炭疽菌（Colletotrichum spp.）[18]、根腐病菌（Bipolaris sorokiniana）、稻瘟病菌（Magnaporthe grisea）[19]、葉枯病菌（Xanthomonas perforans）[20]释放出银离子，银离子与细胞膜结合后破环细胞膜的完整性，随后渗透到细胞质中的银离子导致关键酶失活和细胞死亡[20]纳米二氧化钛甜瓜细菌性叶斑病菌（Pseudomonas syringae Pv.lachrymans）、霜霉病菌（Pseudoperonospora cubensis）[21]、叶枯病菌[13]经光催化反应生成的活性羟基和超氧离子能穿透细胞壁，使细胞膜中的脂质发生过氧化反应，破坏细胞结构，导致细胞死亡[22]纳米氧化锌灰葡萄孢菌（Botrytis cinerea）、青霉菌（Penicillium expansum）[23]、交链格孢菌（Alternaria alternate）、匍枝根霉（Rhizopus stolonife）、尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）[24]沉积在细胞表面的氧化锌能产生活性氧（主要是单态氧、羟基自由基），或纳米颗粒本身的机械损伤造成细胞的结构和功能发生混乱[25]纳米石墨烯禾谷镰刀菌、尖孢镰刀菌、丁香假单胞菌、小麦黑颖病黄单胞菌（X. campestris pv. undulosa）[26]通过缠绕包裹病原菌位点性损伤细胞膜，引起细胞膜电势降低和孢子电解质泄露，从而造成病原菌裂解死亡[26]

除了单一利用某种金属或无机材料制成纳米级微粒用于作物病害的防治外，目前也研发了将不同的金属或无机材料组合成一种纳米制剂后用于病害的防治。研究发现，硅虽然对植物病原菌没有直接的抑制作用，但它能激活植物的生理活性，促进植物的生长，提高植物对病害的抵抗能力[15]。而银离子能对植物病原菌具有直接的抑制作用，基于硅和银各自的特点，Park等将硅和银组合在一起加工成了具有加强效应的抑菌纳米微粒，这种新型的硅-银纳米微粒不仅在离体试验条件下能抑制植物多种病原菌的生长，还在温室和大田试验中对南瓜白粉病表现出了很好的防治效果[16]。

1.3将原农药纳米化

农药原药绝大多数不溶于水，又难以直接粉碎使用，因此在农药的生产过程中往往要添加一些农药助剂，如溶剂、渗透剂、展着剂等。而这些农药助剂对人畜造成的毒性可能比农药有效成分本身更大[27]。

采用纳米加工技术使农药原药纳米化，如将液体农药制成微乳剂或将固体农药直接制成纳米微粒制剂，可以增加农药的比表面积，改善农药在水中的分散性和稳定性，减少有机溶剂和助剂的用量，降低农药的表面张力，促进靶标的吸收，提高农药的利用率[28]。戊唑醇是一种高效、广谱的杀菌剂，在全球范围内使用广泛，但由于其水溶性低，传统的戊唑醇乳油的生产要添加二氯甲烷和丙酮，并且该农药对地下水的污染指数为2.3，对地下水源淋溶存在危险。Díaz-Blancas等通过添加丙酮、甘油、吐温80、Agnique BL1754将戊唑醇原药加工成纳米乳剂后发现，该乳剂的表面张力比纯水低50%左右，大大提高了戊唑醇的利用率，降低了其对环境的污染[27]。

2纳米技术用于作物病害的检测

农作物的大部分病害在染病初期虽然较易防治，但一般不易被人察觉，病害一旦暴发，就给防治带来很大的困难。因此，在作物发病初期对病害进行及时、正确的检测，对防止病害的暴发尤为重要。纳米技术用于植物病害的检测，主要包括以下2个方面：一是利用纳米材料直接对植物病原体进行检测，二是作为快速诊断工具检测植物因病害产生的特征化合物，为作物病害的诊断提供参考。

2.1纳米材料直接用于病原体的检测

基因芯片是准确检测各种病原体的重要工具，而纳米基因芯片可以使分子在其上的结合速度比传统方法提高1 000倍，能灵敏地检测出细菌和病毒单个核苷酸的变化。Ruiz-Garcia等利用纳米基因芯片对感染番茄植株的病原细菌和病毒进行了准确、快速的检测[29]。金纳米颗粒由于具有较高的电导率和电催化活性，目前已被制成各种传感器，广泛应用于病原菌的检测中。Singh等利用纳米金侧流免疫层析传感器灵敏地检测出了小麦黑穗病病原菌（Tilletia indicai）[30]。纳米荧光探针由于其超高的灵敏度和即便是在超痕量组分的检测下都能发出足够强的荧光等特点，目前已被用于病原菌的检测中。Yao等将二抗羊抗兔连接到包裹了联毗咤钉的二氧化硅颗粒上制成的二氧化硅荧光纳米探针，用于检测茄科植物的细菌性叶斑病病原菌，与直接用异硫氰酸荧光作荧光探针相比，二氧化硅荧光纳米探针检测到的荧光信号更明显[31]。

2.2纳米材料作为快速诊断工具检测作物因病害产生的特征化合物

植物在病害、虫害、干旱或其他胁迫条件下会产生一些与损伤相关的植物激素和信号分子，如茉莉酸、茉莉酸甲酯、水杨酸等，从而激活植物体内防御基因的表达，提高抗胁迫的能力。通过对这些信号分子的检测，可以对植物的健康状况作出诊断，但普通的电化学传感器难以对这些信号分子进行检测。Wang等采用循环伏安法，用普通的金电极没有从感染了核盘菌的油菜种子中检测到明显的氧化峰，几乎检测不到水杨酸的存在，而采用同样的方法利用铜纳米颗粒修饰的金电极则检测到了明显且稳定的氧化峰，且测得的水杨酸的浓度与采用高效液相色谱-紫外检测法测得的值非常接近[32]。

除此之外，植物在感染某种病原菌的情况下会产生一些特殊的挥发性物质，通过检测这些挥发性物质可以推测植物是否感染了某种病原菌。4-乙基愈创木酚是疫病病原菌（Phytophthora cactorum）产生的标志性挥发物，通过检测该物质可以推测疫病病菌的存在情况。Fang等利用基于二氧化钛或二氧化锡修饰的丝网印刷碳电极成功地从感染了疫病病原菌的植物中检测到了4-乙基愈创木酚[33]。

3施用纳米肥料，提高作物的抗病能力

作物的病害有生理性病害（缺素症）和非生理性病害。生理性病害一般是由于缺少某些营养元素造成的，非生理性病害是由于受到病原菌的侵染造成的，作物一旦发生生理性病害就容易发生非生理性病害。一般来说，具有最佳营养状态的植物具有最大的抗病力。因此，给予农作物全面、合理的营养，提高作物对病害的抵抗力，也是作物病害防治的一个重要方面[34]。

纳米肥料是指纳米材料技术构建、医药微胶囊技术和化工微乳化技术改性而形成的肥料，由于纳米肥料具有普通肥料不具备的优点，目前已引起了广大的关注并投入了商品化生产。从植物营养的角度来看，目前生产的纳米肥料可大体分为大量元素纳米肥料、微量元素纳米肥料、纳米材料增强剂肥料、植物促生长纳米材料4类[35-36]。

3.1大量元素纳米肥料

大量元素纳米肥料是指含有氮、磷、钾、镁、钙、硫等大量元素中的1种或几种元素的纳米肥料。传统的大量元素肥料在施用过程中，有40%～70%的氮肥、80%～90%的磷肥、50%～90%的钾肥流失到环境中[37-38]，由于作物在生长过程中对大量元素的大量需求，预测到2050年作物对大量元素的需求将达到263 Mt[39]。因此，对大量元素纳米肥料的开发是纳米肥料中优先考虑的对象。目前已开发的大量元素纳米肥料主要有氮纳米肥料、磷纳米肥料、鈣纳米肥料、镁纳米肥料等。这些大量元素纳米肥料的开发既减少了普通氮肥、磷肥、钾肥的使用量，又减少了面源污染的发生。

3.2微量元素纳米肥料

微量元素锰、铜、锌等在作物抵御病害方面有非常重要的作用，这主要是因为与植物防御反应相关的酶，如苯丙氨酸解氨酶、多酚氧化酶必须要在这些微量元素存在的情况下才能被激活[40]。然而，全球50%的土壤存在微量元素含量过低的问题，尤其是中性和碱性土壤，因此为了保证作物正常地生长，必须要依靠人工施肥来补充微量元素，而施用普通的肥料能被作物利用的微量元素小于5%[41-42]。目前已开发的微量元素纳米肥料主要有铁纳米肥料、锰纳米肥料、铜纳米肥料、锌纳米肥料、钼纳米肥料等[42-43]。微量元素纳米肥料的开发可提高作物对微量元素的利用率，增加作物的产量，减少病害的发生。

3.3纳米材料加强型肥料

纳米材料加强型肥料是指将一些材料加工成纳米级别后用于装载或包膜肥料，这些材料本身虽然不能给植物提供营养，但经过纳米材料装载或包膜后的肥料吸附性能增强，挥发量减少，能迎合土壤与作物的需肥规律可控释放，作物对其利用率也大幅提高。目前报道的装载或包膜各种肥料的纳米材料有高岭土、沸石、高分子树脂等。值得一提的是，沸石被加工成纳米级后由于具有比表面积大、阳离子交换量高且对大量元素（如K+、NH+4等）具有很高的选择性等特点，常被用于氮肥、钾肥等各种肥料的载体，经纳米沸石装载的肥料在室内盆栽试验和大田试验中都表现出了很好的促生作用，有效地减少了肥料的流失[36]。

3.4促生型纳米材料

研究发现，有的纳米材料本身既不是植物大量元素和微量元素的来源，也不作为肥料的载体，但施用这些纳米材料后却能促进作物的生长，如纳米二氧化钛、纳米硅、碳纳米管等。钛并不是植物生长所必需的元素，土壤中也不须要添加额外的钛。但已经有多个研究报道纳米钛具有明显的促生长作用，Yang等将2.5 g/L纳米二氧化钛溶液处理菠菜的种子，待发芽后再用2.5 g/L二氧化钛溶液喷施叶片后发现与用非纳米二氧化钛相比，处理组菠菜中的生物量明显增加，且菠菜叶片中总氮、叶绿素、蛋白质的含量分别增加23%、34%、13%[44]。Jaberzadeh等分别用0.01%、0.02%、0.03%纳米二氧化钛喷施小麦叶片后发现，与对照组相比，小麥的生物量和产量都明显增加[45]。

硅也不是植物生长过程中的必需元素，但它能通过影响植物中其他元素如碳、氮、磷的代谢，促进作物种子的萌发和作物的生长。Suriyaprabha等将1%纳米硅悬浮液添加到含玉米的霍格兰水培液中，与对照组相比，处理组的玉米种子中各种大量元素和微量元素含量发生了明显的变化，但总的来看，处理组中玉米种子的萌发率提高了95.5%，玉米干质量增加了6.5%[46]。

研究表明，碳纳米管也能促进各种作物种子的萌发和生长。Lahiani等以大麦、大豆、玉米种子作为试验对象，将多壁碳纳米管添加到MS培养基中或者作为种子包衣处理上述不同作物种子，发现处理组种子的发芽率明显高于对照组[47]。Tiwari等也发现，碳纳米管在低浓度下能促进小麦种子的生长[48]。

4结语与展望

利用转基因技术培育出具有抗病害能力的农作物新品种是农作物病害防治的一个重要趋势，而在转基因技术研究中，基因载体扮演着重要的角色，它们不仅明显影响外源基因的转化效率，而且还会影响外源基因的表达特性。传统地利用农杆菌作为转基因载体存在宿主限制，外源重排率高，容易形成逃逸体、嵌合体等缺点[49]。而最近的研究结果表明，基于以纳米转基因载体的新型转化法与传统方法相比具有以下优点：纳米材料具有特殊的磁学、光学、热学性能和较多的表面活性基团，便于修饰，可以实现基因靶向递送或控制释放；纳米材料具有较高的电势和比表面积，加大了基因载量，提高了基因进入受体细胞的概率；纳米材料粒径很小，容易透过组织进入细胞，增加了基因的递送效率；纳米材料通常具有良好的生物相容性，因而对细胞的生长和代谢有较小的影响[49-50]。因此，以纳米材料介导外源基因的新型转化法为植物基因转导提供了一个新的工具，目前该方法在植物转基因中备受关注，已有不少关于利用纳米基因载体成功用于植物转基因的报道[51-53]，但利用纳米基因载体培育具有抗病害能力的转基因作物还未见报道，这是一个值得未来探讨和研究的方向。

此外，纳米材料因其小尺寸、表面效应等特殊性质容易被植物吸收，并能通过食物链富集和传递，能透过人体解剖学屏障，因此，纳米材料可能存在潜在的安全性问题[54]。但目前国际上对纳米材料的安全性评价尚没有统一的标准[55]。因此，一方面，应尽量选择无毒生物相容性高、可生物降解的纳米材料；另一方面，应尽快弄清纳米材料与植物的相互作用关系及其向食物中的迁移途径，建立定量的方法和模型，不断完善安全性评价工作和使用规范。

总之，由于纳米材料特殊的性能，利用纳米技术对作物病害进行预防和治理，有利于病害的早发现、早控制，能减少化学农药和化学肥料的使用，能弥补化学农药防治或生物防治存在的不足，提高作物病害的防治效率。这对减少农业开支、实现作物增产以及农业生产的可持续发展、生态环境的保护等具有重要的意义。

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