王君正，于长平

(1.山东师范大学附属中学，山东济南 250014；2.山东省医学科学院山东省皮肤病性病防治研究所，山东济南 250022)



济南市犬体表皮肤癣菌携带情况的调查

王君正1，于长平2*

(1.山东师范大学附属中学，山东济南 250014；2.山东省医学科学院山东省皮肤病性病防治研究所，山东济南 250022)

通过对济南市犬体表皮肤癣菌的分离鉴定，了解皮肤癣菌在该地区犬体表的携带分布状况，为人畜共患皮肤真菌病的防治提供一定流行病学依据。分别从116只犬体表的4个部位刷集毛样，在沙氏葡萄糖琼脂培养基和皮肤癣菌试验培养基上接种培养，行铜圈法小培养，并在尿素沙氏培养基、米饭培养基及马铃薯培养基上接种。根据菌落形态、小培养镜下结构及培养基色素变化鉴定种属。结果表明，116只受试犬真菌镜检阳性率为31.89%，真菌培养阳性率为30.17%。共分离皮肤癣菌86株，其中犬小孢子菌占45.35%,石膏样小孢子菌占32.56%，须癣毛癣菌22.09%。腹部分离的皮肤癣菌数最高占35.34%(P<0.05)，幼年犬皮肤癣菌携带阳性率高于成年犬只(P<0.05)，不同性别间皮肤癣菌携带阳性率无显著性差异(P>0.05)。济南市犬体表皮肤癣菌携带率相对较高，为避免造成人畜共患皮肤真菌病的发生，应做好相应防护工作。

皮肤癣菌；体表；调查;犬

随着人们生活水平的提高，饲养犬的人群在逐年上升,调查显示2003年-2013年10年间我国的宠物数量增长了近900%，养狗的家庭增至约1.7%，是世界第3大宠物饲养国[1-2]，犬真菌性皮肤病的发病率亦越来越高，有报道其发生率约在4%～10%[3]。犬真菌性皮肤病病情顽固，容易复发，并可造成人畜交叉感染，不仅影响犬自身的生长发育，也可能威胁人类健康。因而，犬皮肤真菌感染情况的流行病学调查具有较为重要的临床意义。本文调查分析济南市犬体表皮肤癣菌携带情况，以期对该地区犬皮肤真菌病的防控提供一定参考。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 仪器与试剂 光学显微镜，Olympus(中国)有限公司产品；电热恒温培养箱，天津市华北实验仪器有限公司产品；分析天平97G-328A 型，上海国营长江仪器厂生产；沙氏葡萄糖琼脂培养基(SDA含氯霉素及放线菌酮)、皮肤癣菌试验培养基(DTM)，贝瑞特生物技术(郑州)有限责任公司产品；尿素沙氏培养基、米饭培养基及马铃薯培养基自备。

1.1.2 试验用动物 2016年7月～9月间取山东大学动物中心17只、宠物美容医院61只、多个居民小区38只饲养犬,共116只作为研究对象，。其中雌性犬45只，雄性犬71只，幼年犬(1岁以下)33只，成年犬(1岁以上)83只。

1.2 方法

1.2.1 标本收集 每只犬用4支无菌硬牙刷，分别用力梳刷犬头部、背部、腹部及尾部体表各1遍，尽可能使牙刷上粘有足够量被毛和皮肤碎屑。用无菌纸袋将牙刷封好，分别标记备用。

1.2.2 真菌镜检 用镊子采取毛发和皮肤碎屑置载玻片上，滴加100 g/L氢氧化钾溶液，加盖玻片，微热处理后显微镜下观察菌丝及孢子形态。

1.2.3 真菌培养 培养基编号备用，将头部、背部、腹部及尾部不同部位所取毛发和皮肤碎屑分别接种于SDA和DTM培养基各2管，置25℃恒温培养箱内培养，分别于第7、14、21天观察菌落生长情况，3周内未见菌落生长者判为真菌培养阴性。

1.2.4 真菌鉴定 采用铜圈法进行小培养，置25℃恒温培养1周～2周观察结果。根据镜下结构鉴定种属，仍不能明确者，进一步转种于尿素沙氏培养基、米饭培养基及马铃薯培养基培养。根据菌落形态，小培养镜下结构，色素变化鉴定种属[4]。

1.2.5 数据统计分析 SAS9.13统计软件包进行数据分析，分别对不同年龄、不同性别犬只和犬只不同部位皮肤癣菌携带阳性率进行比较，采用x2检验，P<0.05具有统计学意义。

2 结果

2.1 受试犬体表真菌分离情况

受试犬体表真菌分离结果见图1。116只受试犬中真菌镜检阳性犬37只，其真菌镜检阳性率为31.89%；真菌培养阳性犬35只，真菌培养阳性率30.17%。每只受试犬4个部位取材，在全部464份被毛样本中共分离皮肤癣菌86株。

2.2 受试犬体表分离皮肤癣菌与性别及年龄关系

结果见表1。33只幼年犬中皮肤癣菌分离培养

阳性犬16只(48.48%)，83只成年犬中阳性犬19只(22.89%)，45只雌性犬中皮肤癣菌分离培养阳性犬13只(28.89%)，雄性犬中皮肤癣菌分离阳性犬22只(30.99%)。幼年犬皮肤癣菌携带阳性率高于成年犬只(P<0.05)，不同性别间皮肤癣菌携带阳性率无显著性差异(P>0.05)。

2.3 受试犬体表真菌种类的分布情况

分离的86株皮肤癣菌中，犬小孢子菌占分离菌株的45.35%(39/86)，石膏样小孢子菌株占32.56% (28/86),须癣毛癣菌占22.09%(19/86)，犬小孢子菌是犬体表携带最多的皮肤癣菌(表2)。腹部分离真菌41株，尾部分离真菌26株，头部12株，背部7株。两两比较不同部位体表携带皮肤癣菌阳性率，其中腹部携带皮肤癣菌阳性率明显高于其他部位，有显著性差异(P<0.05)(表3)。

A.犬小孢子菌;B.石膏样小孢子菌;C.须癣毛癣菌

A.Microsporumcanis; B.Microsporumgypseum;C.Trichophytonmentagrophytes

图1 犬体表分离皮肤癣菌菌落形态及显微镜下小培养形态(400×)

注：与成年犬比较,*P<0.05;不同性别间比较，**P>0.05。

Note:Compare to Adult dog, *P<0.05；Compare between gender, **P>0.05.

表2 受试犬体表分离真菌的种类分布情况

表3 受试犬不同部位真菌分离情况

注:组间比较，P<0.05；a与b，P<0.05；a与c，P<0.05；a与d，P<0.05；b与c，P<0.05；b与d，P<0.05； c与d，P>0.05。

Note:Comparison among parts,P<0.05;a vs b,P<0.05;a vs c,P<0.05;a vs d,P<0.05;b vs c,P<0.05;b vs d,P<0.05;c vs d,P>0.05.

3 讨论

皮肤病是犬类的常见病和多发病，发病率可占犬临床疾病的20%左右。犬皮肤病临床上分为15类，真菌性皮肤病是3类最为常见的皮肤病之一。其发病除与致病真菌毒力、犬自身免疫功能有关外，犬品种、性别、年龄、生活地域与环境等的不同，皮肤病的发生率也存在很大的差异[5]。致病真菌通过黏附于犬的皮肤，侵入皮肤毛发或趾甲，寄生或腐生于表皮、毛发、甲板的角质蛋白组织中大量繁殖，导致皮肤发生一系列器质性病变。发病特点是病程长、治愈难、易复发，并可在动物间，人与人、人与动物间互相传播。研究表明，高达90%的儿童真菌性皮肤病系与患病动物接触而感染[6]。宠物一旦感染真菌，其豢养者的感染率明显增高，可高达50%～70%以上[7-8]。而动物皮肤真菌病病原菌的种类、分布、流行地区及趋势的相关研究，可为有效预防皮肤真菌病等人畜共患疾病提供可靠的流行病学依据，减少人畜共患真菌病的发生。

上海地区犬常见皮肤病的发病调查报告显示，1 303例皮肤病犬只中，真菌性皮肤病占27.09%[9]。广州惠州市200余只宠物犬的真菌分离培养阳性率为16.23%[10]，其中犬小孢子菌感染占91.89%，石膏样小孢子菌5.41%，须癣毛癣菌占2.70%。丁明星等[11]调查北京地区健康犬的皮肤丝状真菌带菌率为2.78%，健康猫的皮肤丝状真菌带菌率高于犬，达到9.4%。河南信阳市犬真菌性皮肤病的病原真菌主要是犬小孢子菌、石膏样小孢子菌及须癣毛癣菌，分别占统计结果的33.25%、24.94%、22.34%，而该地区犬真菌性皮肤病的夏季发病率为49.21%[12]。张兆霞[13]报道北京地区犬真菌性皮肤病主要是以马拉色菌和犬小孢子菌为主，其次是须癣毛癣菌和石膏样小孢子菌。国外文献[14-17]报道所调查的1 209只健康犬和292只健康猫的皮肤癣菌携带阳性率分别为20.93%和37.33%[14]，其中犬小孢子菌培养分离率最高，可达60%。对济南市犬体表真菌携带情况进行调查，在116只研究犬只中，选取动物中心犬17只，约占15%，其余取自宠物美容医院及多个分散居民小区的饲养犬，研究对象分布地点较广，选取研究对象具有一定代表性。结果显示，116只受试犬真菌镜检阳性率31.89%，真菌培养阳性率为30.17%，犬小孢子菌携带比例最高，占45.35%。国内外宠物带菌率的调查结果有一定差别，可能与收集的标本来源及地域不同有一定关系，但犬体表真菌携带率较高，且犬小孢子菌是首要的致病真菌在相关报道中是一致的。济南市犬体表皮肤癣菌携带率相对较高，为避免造成人畜共患皮肤真菌病的发生，应做好相应防护工作。

机体抵抗力降低是发生真菌感染的前提，犬的防御屏障机能遭到破坏，抗病能力降低时，寄生或腐生于畜禽表皮角质、毛发中的致病菌，在皮肤上大量繁殖，通过机械性刺激和有害代谢产物的作用，引起局部的炎症和病变，从而引发真菌性皮肤病。我们的调查及国内外文献报道均显示真菌性皮肤病在幼年犬的发病显著高于成年犬[16-19]，这很可能与成年动物防御机能发育健全，通过免疫系统及皮肤局部皮脂腺和顶泌汗腺分泌不饱和脂肪酸,一定程度上抑制皮肤真菌侵害有着密切的关系。本文分别对不同性别和不同年龄皮肤癣菌携带阳性百分率进行统计比较，并对体表不同部位(腹部、头部、尾部、背部)皮肤癣菌携带阳性百分率进行统计分析。不同性别间皮肤癣菌携带阳性率比较无显著性差异(P>0.05)。幼年犬皮肤癣菌携带阳性率高于成年犬只(P<0.05)，对4个部位皮肤癣菌携带阳性率进行两两比较，腹部皮肤癣菌携带阳性率最高，与其他部位比较均有显著性差异(P<0.05)。腹部是犬真菌性皮肤病最易发生的部位，本文调查结果与该类文献报道相一致[18-19]。这可能与犬喜卧于地面，增加了腹部与不洁环境中真菌接触的机会有关。因此，对于犬只的饲养生活环境需保持通风、清洁、干燥，特别是幼年犬，以减少真菌的滋生繁殖，减少真菌感染的发生。

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A Survey of Dermatophytes on Dog Hair in Jinan City

WANG Jun-zheng1,YU Chang-ping2

(1.HighSchoolaffiliated,ShandongNormalUniversity，Jinan,Shandong，250014，China; 2.ShandongProvincialInstituteofDermatologyandVenereology，Jinan,Shandong，250022，China)

The dermatophytes on dog hair were cultivated and identified to investigate carrier rate of canines dermatophytes in Jinan for providing new epidemiological information to decrease pet-transmitted dermatomycosis.Samples from four parts of 116 dogs were obtained to inoculated on Sabouraud dextrose agar(SDA) and dermatophytes test medium(DTM).Each of the fungal isolate was identified based upon its colony characteristics and hyphal and conidial cells produced by small training methods,and identified further through three kinds agars(including chritensen urea agar,rice grain medium and potato dextrose medium).The results showed that the positive rate of direct microscopic examination and fungal cultural examination respectively were 31.89% and 30.17%.In all strains,Microsporumcaniswas 45.35%,Microsporumgypseumwas 32.56%,andTrichophytonmentagrophyteswas 22.09%.The abdomen was the most commonly carrier position，accounting for 35.34%(P<0.05).The incidence of carrier rate of canine dermatophytes showed no gender deference(P>0.05).The incidence of carriage in juvenile dogs was higher than that of adult dogs(P<0.05)．The incidence of carrier rate of canine dermatophytes was relatively higher in Jinan,therefore,proper care should be taken during management of pet animals to minimize human dermatomycosis.

dermatophyte; hair; survey;dog

2016-10-21

王君正(2000-)，男，山东济南人，主要从事药物化学与微生物的学习。*通讯作者

S853.55;S858.292

B

1007-5038(2017)07-0130-04