刘昌燕, 李 莉, 焦春海, 万正煌

(湖北省农业科学院粮食作物研究所, 粮食作物种质创新与遗传改良湖北省重点实验室, 武汉 430064)



5种仓储豆象的分子鉴定和检测

刘昌燕, 李 莉, 焦春海, 万正煌*

(湖北省农业科学院粮食作物研究所, 粮食作物种质创新与遗传改良湖北省重点实验室, 武汉 430064)

本研究以在检疫中经常被截获的5种豆象为研究对象,通过对GenBank中5种豆象mtDNA COⅠ序列的查询,并进行序列比对,共设计了30对引物,通过筛选获得5对能分别鉴定5种豆象的特异引物,并用50、25、10、5、1、0.5、0.1、0.05 ng/μL 8个不同浓度系列的豆象DNA模板来检测灵敏度,结果表明,豌豆象和四纹豆象特异引物对的灵敏度为0.1 ng/μL,蚕豆象、菜豆象和绿豆象特异引物对的灵敏度为0.5 ng/μL。该方法可用于快速准确地鉴定5种豆象,对于豆象类害虫的检测监测具有重要意义。

豆象科; mtDNA COⅠ基因; 特异引物; 分子鉴定

豆象是豆象科昆虫的总称,分布于除南极之外的各大陆,尤其以亚洲的热带区以及中美和南美地区数量最多[1]。豆象科昆虫目前全世界记录约1 400种,分属于58个属[2]。该科昆虫大约有84%的种类取食豆科植物种子,成为栽培豆科植物的一类重要害虫[3]。1997年浙江宁海曾发生蚕豆象大规模为害,为害率高的达到80%以上,经济损失严重[4]。绿豆象严重为害绿豆、豇豆、鹰嘴豆、蚕豆和豌豆等多种豆类[5-6],主要在仓内蛀食储藏的豆粒,造成的损失达30%以上[7]。我国共记载有18种储藏物中豆象科昆虫,其中绿豆象Callosobruchuschinensis、蚕豆象Bruchusrufimanus和豌豆象Bruchuspisorum为我国主要的储藏豆类害虫;而菜豆象Acanthoscelidesobtectus和四纹豆象Callosobruchusmaculatus为我国规定禁止入境的检疫性害虫[8]。……