刘淑媛++艾仄宜++陈玉琼++倪德江

摘要：试验对Caco-2细胞膜上蔗糖酶和麦芽糖酶这两种α-葡萄糖苷酶活性进行不同培养时间检测，并以儿茶素单体EGCG作为抑制剂，探究其对Caco-2来源的蔗糖酶和麦芽糖酶的抑制效果。结果表明，Caco-2细胞培养18 d后膜表面具有较高活性的蔗糖酶和麦芽糖酶，可用于进行α-葡萄糖苷酶抑制剂筛选。儿茶素EGCG具有蔗糖酶和麦芽糖酶抑制活性，抑制IC50分别为31.08 μg/mL和36.44 μg/mL。

关键词：茶；EGCG；蔗糖酶；麦芽糖酶；Caco-2细胞

中图分类号：S571.1 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2017）13-2479-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2017.13.020

Alpha-glucosidase Inhibitory Activity of EGCG in Caco-2 Cells

LIU Shu-yuan， AI Ze-yi， CHEN Yu-qiong， NI De-jiang

（Key Laboratory of Horticultural Plant Biology， Ministry of Education/College of Horticulture and Forestry Sciences，

Huazhong Agricultural University， Wuhan 430070， China）

Abstract： This research used the Caco-2 cell monolayer model in vitro to simulate the α-glucosidase activity at different culture days. EGCG was used as an inhibitor to investigate the inhibition activities on sucrase and maltase in Caco-2 cells. The results illustrated that Caco-2 could be used to estimate α-glucosidase inhibitory activity after 18 days with high sucrase and maltase activities. EGCG showed inhibitory effect on sucrase and maltase in Caco-2 cells， with the IC50 values of 31.08 μg/mL and 36.44 μg/mL， respectively.

Key words： tea； EGCG； sucrase； maltase； Caco-2

茶作為世界上三大饮品之一，其抗癌、抗氧化、降血糖、降血脂等健康功效已得到广泛证实[1-4]。儿茶素被认为是茶发挥其健康功效的主要成分。表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）是茶叶中儿茶素的重要单体，占儿茶素总量的约80%。已有大量文献以儿茶素EGCG为研究对象，研究其在细胞上抑制肿瘤细胞生长、保护细胞膜损伤、信号通道等作用机理[5-7]。

α-葡萄糖苷酶在碳水化合物消化吸收方面发挥重要作用，是Ⅱ型糖尿病治疗的靶点之一。本茶生理生化课题组实验室前期体外实验研究发现EGCG是茶叶中对α-葡萄糖苷酶起抑制作用的主要成分，其抑制IC50仅为0.059 mmol/L，远小于阳性对照阿卡波糖（阿卡波糖IC50为7.19 mmol/L）[8]。Matsumoto等[9]利用大鼠体内试验研究发现儿茶素短时间（提前30 min）灌胃Wistar大鼠，可降低大鼠小肠上皮黏膜蔗糖酶活性。人结肠腺癌细胞系Caco-2模型具有与人小肠上皮细胞相似的糖消化、吸收和葡萄糖异生相关的酶，可应用于α-葡萄糖苷酶抑制剂的筛选[10，11]。为此，试验采用Caco-2模型，分析儿茶素EGCG对蔗糖酶和麦芽糖酶这两种α-葡萄糖苷酶的抑制效果，以期为儿茶素抑制餐后血糖升高，减缓糖尿病症状提供科学依据。……