二烯丙基二硫上调miR-22通过Wnt-1通路抑制人胃癌细胞增殖与迁移侵袭
2017-07-25唐云云
唐云云,唐 仪,刘 芳,苏 坚,4,夏 红,苏 波,曾 希,苏 琦
(1.南华大学肿瘤研究所, 湖南省胃癌研究中心,湖南省高校肿瘤细胞与分子病理学重点实验室,湖南 衡阳 421001;2.永州职业技术学院基础医学部,湖南 永州 425100;3.南华大学附属湘潭医院病理科,湖南 湘潭 411101;4南华大学附属第二医院病理科,湖南 衡阳 421001)
二烯丙基二硫上调miR-22通过Wnt-1通路抑制人胃癌细胞增殖与迁移侵袭
唐云云1,2,唐 仪1,3,刘 芳1,苏 坚1,4,夏 红1,苏 波1,曾 希1,苏 琦1
(1.南华大学肿瘤研究所, 湖南省胃癌研究中心,湖南省高校肿瘤细胞与分子病理学重点实验室,湖南 衡阳 421001;2.永州职业技术学院基础医学部,湖南 永州 425100;3.南华大学附属湘潭医院病理科,湖南 湘潭 411101;4南华大学附属第二医院病理科,湖南 衡阳 421001)
目的 探讨二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)上调miR-22是否通过Wnt-1通路抑制人胃癌MGC803细胞增殖与迁移侵袭。方法 MTT、细胞划痕实验、侵袭实验分别检测DADS与miR-22对MGC803细胞增殖与迁移侵袭的影响。在线预测软件寻找miR-22调控的靶基因,荧光素酶报告基因检测miR-22对Wnt-1 3′UTR荧光酶活性的影响。qRT-PCR检测Wnt-1mRNA表达变化。Western blot检测Wnt-1、β-catenin与TCF-4蛋白表达。结果 MTT显示,DADS 与miR-22可明显抑制MGC803细胞增殖(P<0.05)。划痕实验显示,DADS与miR-22可明显抑制MGC803细胞迁移,而miR-22+DADS更为明显(P<0.05)。侵袭实验显示,miR-22可抑制人胃癌MGC803细胞侵袭,而miR-22+DADS更为明显(P<0.05)。在线预测软件寻找miR-22调控的靶基因显示,Wnt-1可能是miR-22的靶基因,荧光素报告基因检测证实Wnt-1是miR-22直接调控的靶基因;qRT-PCR显示,DADS与miR-22能下调Wnt-1 mRNA表达,而miR-22+DADS更为明显(P<0.05)。Western blot显示,DADS 与miR-22能下调Wnt-1、β-catenin与TCF-4蛋白表达,而miR-22+DADS尤为明显(P<0.05)。结论 DADS可上调miR-22 通过Wnt-1通路明显抑制MGC803细胞增殖与迁移侵袭。
二烯丙基二硫;人胃癌细胞;miR-22;Wnt通路;迁移;侵袭
胃癌是最常见的恶性肿瘤之一,发生率与死亡率分别为全球第4位与第3位[1]。据最新统计,胃癌在我国每年约新发67.9万,死亡49.8万人,发生率与死亡率位于第2。由于患者就诊时大多已发生侵袭转移,常规外科手术和化学药物治疗效果较差,5年生存率低于10%[2-3]。因此,开发高效低毒药物与寻找靶点对防治胃癌具有重要意义。……
