唐燕青 陈秋莉 陈碧艳 张 强 韦 媛 何 升

广西壮族自治区妇幼保健院遗传代谢中心实验室(南宁，530003)

15 969例轻型α地中海贫血的基因型和血液学分析

唐燕青 陈秋莉 陈碧艳 张 强 韦 媛 何 升*

广西壮族自治区妇幼保健院遗传代谢中心实验室(南宁，530003)

地中海贫血是世界上较为常见的单基因遗传病，属常染色体隐性遗传，主要包括α及β地贫两大类[1]。α-地中海贫血是由于α-珠蛋白基因缺失突变导致α-珠蛋白肽链缺如或合成减少而引起的一种遗传性溶血性疾病[2]。α-地中海贫血主要分布在东南亚和地中海等地区[3]，在我国以广西、广东等地多见，广西人群基因携带率为17.6%[4]。α-地中海贫血的分子缺陷有基因的大片断缺失和非缺失突变两大类。其中缺失型是我国α-地中海贫血的主要类型，已阐明95%以上的α-地中海贫血是由于α珠蛋白基因大片段缺失(缺失型)所致[5]。由于α-地中海贫血可以引起致死的Hb Bart's水肿胎(--/--)或严重影响生命质量的HbH病(-α/--或αTα/--)，而目前该病尚无理想的治疗方法[6]。虽通过规范的长期输血和应用铁螯合剂是治疗重型地中海贫血的最主要方法，但这给患者个人、家庭、社会带来沉重的精神和经济负担，因此做好地贫筛查工作，及早发现高危人员，对优生优育的意义尤为重大。本研究旨在探讨轻型α-地中海贫血的基因分布特征及其血液学特点，丰富轻型α-地中海贫血的资料。

1 对象与方法

1.1 研究对象

以2010年1月-2015年1月在广西壮族自治区妇幼保健院确诊为轻型α-地中海贫血的患者15 969例为研究对象。其中男性7381例，女性8588例，年龄1天～47岁。

1.2 方法

1.2.1 红细胞参数测定 采用LH750全自动血细胞计数仪(贝克曼库尔特有限公司，美国)测定全血红细胞参数，如红细胞计数(RBC)、血红蛋白浓度(Hb)、平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白量(MCH)等指标，采用全自动毛细管电泳仪(sebia公司，法国)测定HbA2、HbF。检测方法室内质控后进行标本检测。

1.2.2 基因检测 采用裂口PCR(Gap-PCR)技术检测缺失型α-地中海贫血基因，采用PCR结合反向斑点杂交技术(RDB)检测非缺失型α-地中海贫血基因，试剂由深圳益生堂生物企业有限公司提供。

1.3 统计学处理

2 结果

2.1 α-地中海贫血基因分布特征

在15 969例轻型α-地中海贫血患者中，基因型以缺失型为主，其中以--SEA/最为多见，其等位基因数为14 397例(90.2%)，其次基因型-α3.7/、-α4.2/、--THAI/αα的等位基因数分别为684(4.3%)、307(2.0%)、61(0.4%)；非缺失型以αCSα/多见，其等位基因数为268(1.7%)，其次为基因型αWSα/、αQSα/的等位基因数分别为219(1.4%)、33(0.2%)。

2.2 不同类型轻型α地贫与血液学表型的关系

新生儿和幼儿因生理性因素，其血液学指标尚不稳定，且正常参考范围不同于成人，故选取成人患者10 193例作为研究对象，该类成人患者已排除缺铁性贫血。因基因型αWSα/αWSα、-α3.7α/αQSα、αQSα/αCSα、-α4.2α/αQSα、αWSα/αQSα标本例数过少，未行相应指标的统计学检验分析。根据基因类型的不同，将患者分成4个小组，即--/αα组、-α/-α组、-α/αTα组和αTα/αTα组。其中--/αα组包括--SEA/αα和--THAI/αα；-α/-α组包括-α3.7/-α4.2、-α3.7/-α3.7、-α4.2/-4.2；-α/αTα组包括-α3.7α/-αCSα、-α3.7α/αWSα、-α4.2α/αCSα、-α4.2α/αWSα；αTα/αTα组包括αWSα/αCSα、αCSα/αCSα。根据比较分析，--/αα组中--SEA/αα和--THAI/αα各项血液学指标相比，差异均无统计学意义(P>0.05)。-α/-α组中-α4.2/-α4.2、-α3.7/-α4.2、-α3.7/-α3.7的各项血液学指标两两相比，差异均无统计学意义(P>0.05)。-α/αTα组中-α/αCSα与-α/αWSα相比，-α/αCSα的Hb、MCV、MCH、HbA2值较低，差异有统计学意义(P<0.05)。αTα/αTα组中αWSα/αCSα与αCSα/αCSα各项血液学指标相比，差异均无统计学意义(P>0.05)。4个小组的血液学指标，除Hb值外，其他指标两两相比差异有统计学意义(P<0.05)，其中--/αα组的指标值最低。见表1。

表1 不同类型轻型α-地中海贫血的血液检测指标比较±s)

3 讨论

导致α-地中海贫血的基因缺陷主要是α-珠蛋白基因缺失，如在我国人群中常见的3种缺失型α-地中海贫血，东南亚缺失(--SEA/)、右侧缺失(-3.7/)、左侧缺失(-α4.2/)[7]。此外，少数α-地中海贫血是由于点突变所导致的。如αWSα/、αCSα/、αQSα/。α地中海贫血包括静止型、轻型、中间型和重型。轻型α地中海贫血包括α0-地中海贫血(--/αα)和α+地中海贫血纯合子或双重杂合子(-α/-α或-α/αTα)，每条染色体上各有1个α-基因发生缺失或缺陷。

本文主要总结了本地区轻型α-地中海贫血的基因类型分布及其血液学特征。结果显示，基因型主要以--SEA/为主，其次为-α3.7/、-α4.2/、αCSα/、αWSα/、--THAI/、αQSα/。缺失型基因--SEA/、-α3.7/、-α4.2/频率占96.4%，与既往报道[8]相一致。非缺失型基因频率与相关指南[9]尚不相符，该指南所陈述是αWSα/是最常见的非缺失型α-地中海贫血，而本文中显示基因型αCSα/所占比例为1.7%，比基因型αWSα/(1.4%)要高，造成此冲突的可能原因为两者的标本来源差异或标本数量的差异，为此今后将会收集更多数据来丰富该结论。在国内，泰国缺失型既往在台湾、广东、广西及福建有散在发现[10-13]，泰国缺失型与其他α地贫复合存在，在临床上可形成HbH病或非免疫性水肿胎的一种重要原因[14]。本研究中，基因型--THAI/共检出61例，基因型--THAI/虽不在常见基因检测范围内，但对于地中海贫血高发地区的广西来说，其发生率并不低，因此在地中海贫血日常检测工作中应当注意避免漏诊，防止重型地中海贫血患儿的出生。

α-地中海贫血表形的多样性与基因突变对α肽链合成的影响有关。如α2基因发生点突变时，α-链的产量比α2基因发生缺失时明显减少，这是因为当一个α-基因发生缺失时，另一个正常的α-基因往往代偿性功能增强，而一个α-基因发生突变时，另一正常α-基因功能并不受到影响，未发生代偿功能增强。此外，点突变产生的某些异常血红蛋白还可以形成不溶物直接损伤红细胞。因此，有些非缺失型α-地中海贫血的纯合子(如αCSα/αCSα/、αWSα/αWSα、αQSα/αQSα)可以表现为HbH病。由于本文中非缺失型纯合子基因型的标本例数过少，血液学资料尚无法进行统计学分析。根据比较分析，--/αα组中--SEA/αα和--THAI/αα各项血液学指标相比差异均无统计学意义。-α/-α组中-α4.2/-α4.2、-α3.7/-α4.2、-α3.7/-3.7的各项血液学指标两两相比差异均无统计学意义。-α/αTα组中-α/αCSα与-α/αWSα相比，-α/αCSα的Hb、MCV、MCH、HbA2值较低，差异有统计学意义，可能原因为αCSα/突变引起的血液学表型变化较αWSα/突变相对要严重一些。αTα/αTα组中αWSα/αCSα与αCSα/αCSα各项血液学指标相比差异均无统计学意义。而四个小组的血液学指标，除Hb值外，其他指标两两相比差异有统计学意义，其中--/αα组的指标值最低，其可能原因为--/αα缺失的是大片段所致。

广西地区人群地中海贫血基因携带率较高，人群MCV和MCH降低应疑为地中海贫血。由于部分静止型α-地中海贫血携带者的血液学无阳性表型，容易造成漏诊。故夫妇一方确定为轻型α-地中海贫血，另一方应进行地中海贫血基因分析，以避免HbH病胎儿出生。

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[责任编辑：王丽娜]

广西科学研究与技术开发计划项目(桂科攻14124004-1-5)；自筹课题(Z2014146)

2016-04-25

2016-08-07

*通讯作者：963890708@qq.com