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猪萨佩罗病毒间接免疫荧光方法的建立与初步应用

2017-07-18彭旺唐小明葛猛杨涛涛屈泰龙余兴龙

湖南农业大学学报(自然科学版) 2017年4期
关键词:血清检测方法

彭旺,唐小明,葛猛,杨涛涛,屈泰龙,余兴龙*

(1.湖南农业大学动物医学院,湖南 长沙 410128;2. 湖南省动物疫病预防控制中心,湖南 长沙 410007)

猪萨佩罗病毒间接免疫荧光方法的建立与初步应用

彭旺1,唐小明2,葛猛1,杨涛涛1,屈泰龙1,余兴龙1*

(1.湖南农业大学动物医学院,湖南 长沙 410128;2. 湖南省动物疫病预防控制中心,湖南 长沙 410007)

以分离的猪萨佩罗病毒PSV HuN1/2016株感染PK15细胞,制备抗原板,建立检测猪血清中PSV 抗体的间接免疫荧光(IFA)方法。结果表明:一抗最佳稀释浓度为1∶300;FITC标记的羊抗猪荧光二抗最佳稀释浓度为1∶300。该方法特异性强,敏感度高,既能将PSV抗体与PRRSV、FMDV、PCV、CSFV抗体区分开,也可以检测到中和效价 0.128的阳性血清。用该方法检测湖南省部分规模化猪场 208份临床血清样品的总阳性率为68%,表明PSV在湖南省流行普遍,且其感染主要发生在保育阶段。

猪萨佩罗病毒;间接免疫荧光;抗体检测;湖南

猪萨佩罗病毒(Porcine sapelovirus, PSV)是单股正链RNA病毒,属于小RNA病毒科萨佩罗病毒属[1]。PSV曾被命名为PEV-8,被归类为猪肠道病毒A(PEV-A)[2]。因PSV病毒特有的L蛋白和结构高度特异的 2A 基因及 5′端非编码区(UTR)能将其与其他的肠道病毒区分开,后来将其归类为一个新的属[3-4],2009年,国际病毒分类委员会(ICTV)正式将猪肠道病毒A(Porcine enterovirus A)更名为猪萨佩罗病毒(Porcine sapelovirus)[1]。萨佩罗病毒属包含猪萨佩罗病毒(Porcine sapelovirus)、禽萨佩罗病毒(Avian sapelovirus)和猿萨佩罗病毒(Simian sapelovirus)。猪萨佩罗病毒只有一个血清型,家猪和野猪均可感染[5],且感染猪只康复后依然会继续排毒,成为重要的病毒传染源[6],因此,该病毒在饲养的猪群中感染率很高[7]。……

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