郭 蕊，丁国涛，孙晓霞，罗 莉，侣丽莎，仵 春，鲍春铭

（河南省产品质量监督检验院，河南 郑州 450004）

芝麻饼肥中芝麻素和芝麻林素含量的测定

郭 蕊，丁国涛，孙晓霞，罗 莉，侣丽莎，仵 春，鲍春铭

（河南省产品质量监督检验院，河南 郑州 450004）

利用高效液相色谱法同时测定芝麻饼肥中芝麻素和芝麻林素的含量。液相色谱条件为：流动相为甲醇水溶液（V甲醇∶V水=80∶20），流速 1.0 mL/min，进样量 5.0 μL，柱温为室温，紫外检测器波长287 nm。检验结果表明：被测两峰完全分离，且峰形较好，芝麻素和芝麻林素均在1～100 mg/L范围内线性关系良好，R2分别为1.000 0、0.999 9；该方法的精密度、重现性及准确度均较好，芝麻素平均回收率在98.2%～100.2%之间，芝麻林素平均回收率在96.7%～99.8%之间；样品提取液在2 h内稳定。芝麻饼肥中芝麻素和芝麻林素总含量为1.2～133.7 mg/100 g，芝麻素与芝麻林素含量比例为0.9～3.1。试验验证了高效液相色谱法同时测定芝麻饼肥中芝麻素、芝麻林素含量的可行性，为芝麻饼肥的质量检测提供了技术支持。

芝麻饼肥；芝麻素；芝麻林素

0 引言

芝麻饼是芝麻榨油加工后剩下的残渣，含有大量的有机质、蛋白质和维生素等，营养成分浓度高。芝麻素和芝麻林素是芝麻中特有的木酚素类物质，制取芝麻油后产生的芝麻饼粕中仍然含有相当量的木酚素类化合物[1-2]。此外，芝麻饼粕还含有一定的油脂和脂肪酸化合物，吸水较慢，是一种迟效性有机肥，一般有机质含量为75%～85%，氮为2%～7%，磷为 2%～3%，钾为 1%～2%，还含有微量元素，必须经过微生物的发酵分解后，才能发挥肥效。研究表明，配施芝麻饼肥可以有效改良土壤微环境，更有利于土壤养分的释放和利用，在同等条件下，芝麻饼肥要比其他肥料肥效高、肥效长、肥性稳定[3]。配施芝麻饼肥对烟草的生长起到很大的作用，施肥后不但花木的叶片油绿肥厚，而且花大、色艳。

芝麻素与芝麻林素的含量与比值可以用作判断芝麻饼肥中芝麻饼含量高低的依据。芝麻素、芝麻林素的检测主要有薄层色谱法[4]，紫外分光光度法[5]，高效液相色谱法[6]等。本文以芝麻饼肥为原料，利用高效液相色谱法同时测定芝麻饼中芝麻素和芝麻林素的含量，为芝麻饼肥的质量检测提供技术支持。

1 材料与方法

1.1 材料

芝麻饼肥，经粉碎机粉碎后过0.25 mm孔径筛，去除筛上物，在室温下保存。

芝麻素标准品（607-80-7）、芝麻林素标准品（526-07-8）：Sigma公司；甲醇：色谱纯，Merck公司；无水乙醇：优级纯，国药集团化学试剂有限公司；水为超纯水。

1.2 仪器

e2695高效液相色谱仪（Waters公司，配备紫外检测器）；AUY 220电子天平（梅特勒-托利多公司）；VORTEX 1涡旋混匀器（IKA公司）；SK3300H超声波清洗仪（上海科导超声仪器有限公司）。

1.3 检测波长的确定

芝麻中木酚素类化合物在200～400 nm紫外区有特征吸收，其中芝麻素在287 nm和235 nm处有最大紫外吸收，芝麻林素在288.5 nm和235 nm处也有较大的紫外吸收，考虑到287 nm处特征吸收较明显，杂峰干扰小[5]，选取紫外检测波长为287 nm。

1.4 高效液相色谱法测定芝麻素和芝麻林素的含量

1.4.1 标准溶液的配制

准确称取10.0 mg芝麻素、芝麻林素标准品于100 mL容量瓶中，用80%乙醇水溶液定容，配制成100 μg/mL的芝麻素、芝麻林素混合标准储备液。精密吸取 1.0、2.0、5.0、10.0、20.0、40.0 mL 标准储备液，置于100 mL容量瓶中，用80%乙醇水溶液定容至刻度，摇匀，配制成质量浓度为 1、2、5、10、20、50 μg/mL的系列芝麻素、芝麻林素混合标准溶液。

1.4.2 样品处理

称取试样约0.5 g，置于10 mL离心管中，加入5 mL 80%乙醇水溶液，涡旋混匀，超声15 min，常温下8 000 r/min离心6 min，取上清液于试管中；残渣中再加入5 mL 80%乙醇水溶液按同样步骤提取，合并提取液，混匀，经0.45 μm有机相滤膜过滤后待液相色谱分析。

1.4.3 色谱分析

液相色谱条件：流动相为甲醇水溶液（V甲醇∶V水=80∶20），流速 1.0 mL/min，进样量 5.0 μL，柱温为室温，检测器波长287 nm。取芝麻素、芝麻林素标准系列溶液，连同样品依次进样，进行液相色谱分析，依据保留时间定性，外标法定量。

2 结果与分析

2.1 标准曲线

分别根据各系列标准溶液的色谱图，以峰面积为纵坐标，各标准溶液质量浓度为横坐标，绘制标准曲线（见图1、图2），得到芝麻素、芝麻林素质量浓度（x）与峰面积（y）之间的线性回归方程分别为：y=12.906 5x+0.772 3，R2=1.000 0；y=10.169 9x-1.502 7，R2=0.999 9。芝麻素、芝麻林素的标准色谱图见图3，芝麻饼肥样品溶液的色谱图见图4。

图1 芝麻素标准曲线Fig.1 Standard curve of sesamin

图2 芝麻林素标准曲线Fig.2 Standard curve of sesamolin

图3 芝麻素、芝麻林素标准溶液色谱图Fig.3 Chromatogram of sesamin and sesamolin standard solutions

图4 芝麻饼肥样品溶液色谱图Fig.4 Chromatogram of sesame cake fertilizer sample solution

结果表明，芝麻素、芝麻林素均在1～100 mg/L范围内线性良好，由图3、图4可以看出，芝麻素、芝麻林素两峰完全分离，且峰形良好。芝麻素的保留时间为6.06 min，芝麻林素的保留时间为7.29 min。

2.2 检出限

按信噪比（S/N）等于3计算检出限，该方法的芝麻素检出限为0.02 mg/100 g，芝麻林素检出限为0.04 mg/100 g。

2.3 精密度试验

准确称取同一芝麻饼肥样品1份，按“1.4”方法进行预处理后，按以上色谱条件进行测定，连续进样6次，分别计算芝麻素和芝麻林素峰面积的相对标准偏差（RSD），结果见表1。

表1 精密度试验结果Table 1 Results of precision tests

由表1得出芝麻素、芝麻林素峰面积RSD值分别为0.30%、0.35%，说明试验结果的精密度较高，数据可靠。

2.4 重现性试验

取某一芝麻饼肥样品按照上述方法进行预处理和分析，同时做6个平行试验，计算相对标准偏差（RSD），考察方法的重现性，结果见表2。

表2 重现性试验结果Table 2 Results of repeatability tests

由表2中芝麻素、芝麻林素的RSD值可以看出，该检测方法的重现性较好。

2.5 回收率试验

分别取高、中、低水平且已知芝麻素、芝麻林素含量的芝麻饼肥样品，进行加标回收试验，分别添加高、中、低浓度的芝麻素、芝麻林素标样，每个水平同时测定3次，平均回收率计算结果见表3。

表3结果表明，芝麻素平均回收率在98.2%～100.2%之间，芝麻林素平均回收率在96.7%～99.8%之间，说明上述方法准确度高。

2.6 稳定性试验

取同一样品提取液，分别在 0、10、30、60、90、120 min后按上述方法测定其中芝麻素和芝麻林素含量，计算相对标准偏差（RSD），考察提取液中芝麻素和芝麻林素在常温下的稳定性，结果见表4。

表3 样品回收率试验结果Table 3 Results of sample recovery tests

表4 稳定性试验结果Table 4 Results of stability tests

由表4可知，样品在提取后2 h内，芝麻素和芝麻林素含量的测定结果相差不大，RSD分别为1.00%和1.67%，说明提取液在2 h内稳定，在其间测定出的芝麻素和芝麻林素含量的数据是可靠的。

2.7 芝麻饼肥样本中芝麻素和芝麻林素含量分析对河南省内不同企业生产的56个芝麻饼肥样品进行检测分析，检验结果见表5，芝麻素和芝麻林素总含量、芝麻素与芝麻林素含量比值分布分别见图5、图 6。

图5 芝麻素和芝麻林素总含量分布Fig.5 Distribution of total content of sesamin and sesamolin

表5中56个不同芝麻饼肥样品基本可以覆盖河南省内企业生产芝麻饼肥的基本状况。由表5可以看出，芝麻饼肥中芝麻素和芝麻林素总含量范围为1.2～133.7 mg/100 g，芝麻素与芝麻林素含量比例波动范围为0.9～3.1。由图5、图6可知，省内企业生产的芝麻饼肥中芝麻素和芝麻林素总含量大部分集中在 20～40 mg/100 g、70～110 mg/100 g之间，芝麻饼中芝麻素与芝麻林素含量的比值在2左右。

图6 芝麻素与芝麻林素含量比值分布Fig.6 Distribution of content ratio of sesamin to sesamolin

3 结论

利用高效液相色谱法测定芝麻饼肥中芝麻素和芝麻林素的含量，结果表明，芝麻素和芝麻林素均在1～100 mg/L范围内线性关系良好，该方法的精密度、重现性及准确度均较好，芝麻素平均回收率在98.2%～100.2%之间，芝麻林素平均回收率在96.7%～99.8%之间，样品在提取后2 h内芝麻素和芝麻林素含量的测定结果相差不大。同时对河南省内不同企业生产的56个芝麻饼肥样品进行检测，这些样品基本可以覆盖省内芝麻饼肥质量的基本状况，检测结果显示，芝麻饼肥样品中芝麻素和芝麻林素总含量范围为1.2～133.7 mg/100 g，芝麻素与芝麻林素含量比例范围为0.9～3.1。

本文验证了高效液相色谱法同时测定芝麻饼肥中芝麻素、芝麻林素含量的可行性，同时为芝麻饼肥的质量检测提供了技术支持，芝麻素与芝麻林素的含量异常可以说明其掺假的可能性。芝麻饼粕的添加量及发酵程度均会影响芝麻饼肥样品中芝麻素、芝麻林素的含量，具体影响因素有待进一步研究。

表5 不同芝麻饼肥样本中芝麻素、芝麻林素的含量Table 5 Contents of sesamin and sesamolin in different sesame cake fertilizer samples

［1］ SUJA K P，ABRAHAM J T，THAMIZH S N，etal.Antioxidantefficacy ofsesame cake extract in vegetable oil protection［J］.Food Chemistry，2004，84:393-400.

［2］ SUJA K P，JAYALEKSHMY A，ARUMUGHAN C.Antioxidant activity of sesame cake extract［J］.Food Chemistry，2005，91:213-219.

［3］ 武雪萍，刘增俊，赵跃华，等.施用芝麻饼肥对植烟根际土壤酶活性和微生物碳、氮的影响［J］.植物营养与肥料学报，2005，11（4）：541-546.

［4］ 李泳雪，曾伟杰，吴斌.薄层扫描法测定便通胶囊中芝麻素的含量［J］.中国中药杂志，2002，27（7）：517-518.

［5］ 冯志勇，谷克仁.紫外光谱法测定芝麻素与芝麻林素含量［J］.中国粮油学报，2006，21（3）：296-300.

［6］ 陈伟，刘红彦，倪云霞.C18净化－HPLC测定芝麻中芝麻素和芝麻林素含量［J］.中国油脂，2011，36（3）：71-74.

DETERMINATION OF SESAMIN AND SESAMOLIN CONTENT IN SESAME CAKE FERTILIZER

GUO Rui， DING Guotao， SUN Xiaoxia， LUO Li， LV Lisha， WU Chun， BAO Chunming
（Henan Province Product Quality Supervision and Inspection Institute， Zhengzhou 450004， China）

The contents of sesamin and sesamolin in sesame cake fertilizer samples were determined by high-performance liquid chromatography at the same time.The determination conditions of high-performance liquid chromatography were as follows:methanol solution （Vmethanol∶Vwater=80∶20）as mobile phase，flow rate 1.0 mL/min，injection volume 5.0 μL，column temperature room temperature，and UVD wavelength 287 nm.Results showed that the two tested peaks were separated completely and had good peak shapes;both the sesamin and sesamolin had good linear relationship within 1 to 100 μg/mL with correlation coefficients of 1.000 0 and 0.999 9，respectively.The method had high precision，high repeatability and high accuracy;the average recoveries of sesamin and sesamolin were within 98.2%to 100.2%and 96.7%to 99.8%，respectively;and the sample extract was stable in two hours.The total content of sesamin and sesamolin in sesame cake fertilizer was 1.2 to 133.7 mg/100 g，and the ratio of sesamin to sesamolin was 0.9 to 3.1.The experiments verified the feasibility of using high-performance liquid chromatography to determine sesamin and sesamolin in sesame cake fertilizer at the same time，thereby providing technical support for quality detection of sesame cake fertilizer.

sesame cake fertilizers；sesamin；sesamolin

TS229

B

1673-2383(2017)03-0093-06

http://kns.cnki.net/kcms/detail/41.1378.N.20170621.1051.034.html

网络出版时间：2017-6-21 10:51:10

2016-10-31

河南省科技计划项目（2016ZJ07）

郭蕊（1987—），女，河南新乡人，硕士研究生，工程师，主要从事化工产品的分析研究工作。