黎金燕　王春晖　黄俊文

摘要：将不同浓度DPI添加到尾叶桉（Eucalyptus urophylla）愈伤组织诱导培养基中，分析DPI对其愈伤组织诱导和SOD、POD、CAT、APX 4种抗氧化酶活性的影响。结果表明，高于1.5 μmol/L的DPI显著抑制尾叶桉愈伤组织的诱导，0～0.25 μmol/L的DPI能减轻褐化，0.1 μmol/L DPI抗褐化效果最好，褐化率仅9.82%。0～0.25 μmol/L的DPI处理后，尾叶桉APX活性随DPI浓度升高而升高，SOD、POD、CAT活性随DPI浓度升高呈先升高后降低的趋势。添加0.10 μmol/L DPI可提高保护酶活性，减轻褐化，促进尾叶桉愈伤组织诱导。

关键词：尾叶桉（Eucalyptus urophylla）；DPI；愈伤组织诱导；抗氧化酶

中图分类号：S792.39 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2017）11-2153-04

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2017.11.040

Abstract： The callus of Eucalyptus urophylla was induced by adding different concentrations of diphenyleneiodonium（DPI） to the callus induction medium. And SOD，POD，CAT and APX activities of the callus were measured. The concentration of DPI higher than 1.5 μmol/L significantly inhibited callus induction. 0～0.25 μmol/L DPI can reduce browning，of which 0.1 μmol/L concentration can get the best anti-browning effect，browning rate only 9.82%. In the DPI treatment of 0～0.25 μmol/L，the activity of APX increased，while the activities of SOD，POD and CAT increased first and then decreased with the increase of DPI concentration. The results showed that addition of 0.10 μmol/L DPI could promote the callus of Eucalyptus urophylla induction by increasing the protective enzyme activity and reducing the browning.

Key words： Eucalyptus urophylla；DPI；callus induction；antioxidase

尾葉桉（Eucalyptus urophylla）为桃金娘科（Myraceae）桉属（Eucalyptus）植物，原产于印尼，中国1976年开始引种[1]。尾叶桉U6无性系具有抗病、抗风、速生、易繁殖、萌芽力强、综合性能好、实用性强等优点，深受各地林农的喜爱，已成为营造桉树速生丰产造林的主要树种之一[2]。桉树是世界上主要产材树种之一，其人工造林占世界人工造林的五分之一，桉树组织培养是林木组织培养研究最早、最多的一大类，目前全世界已对60种桉树进行了组织培养技术的研究[3]。

二苯基氯化碘盐（Diphenyleneiodonium chloride，DPI）是植物NADPH氧化酶的专一性抑制剂。ROS主要发生于质膜上的氧化还原系统，质膜NADPH氧化酶是此系统产生活性氧的主要功能蛋白质[4，5]。DPI能够通过结合到NADPH氧化酶的两个氧化还原元件上抑制其活性[6]。ROS的过度积累会引起植物细胞膜系统等细胞结构的氧化损伤，而生物膜的完整性和渗透性是外植体褐化的重要因素之一[7]。研究表明，DPI能影响植物根的伸长、气孔开闭等[6，8]。本研究通过向尾叶桉愈伤组织诱导培养基中添加不同浓度的DPI，探究DPI对尾叶桉愈伤组织诱导及其对抗氧化酶活性的影响，以期为桉树组织培养研究提供参考。……