刘敏,张晨瑶,王飞,翟彦生,肖颖,马立新,余晓岚

(生物资源绿色转化湖北省协同创新中心，湖北大学生命科学学院，湖北 武汉 430062)



融合胸腺素α1的猪干扰素α在毕赤酵母中的表达及效价测定

刘敏,张晨瑶,王飞,翟彦生,肖颖,马立新,余晓岚

(生物资源绿色转化湖北省协同创新中心，湖北大学生命科学学院，湖北 武汉 430062)

猪干扰素α(IFN-α)是在特定条件下由细胞产生的一种具有广谱、高效抗病毒活性的可溶性糖蛋白，胸腺素α1(Tα1)是一种具有免疫调节的活性肽.本研究中将Tα1基因与去掉信号肽序列的猪IFN-α N端融合，构建酵母表达载体PHBM-Tα1-IFNα，同时构建单独表达IFNα的重组质粒PHBM-IFNα，重组质粒电转化至毕赤酵母(Pichiapastoris)菌株，甲醛诱导表达.利用SDS-PAGE法检测融合蛋白的表达，并用细胞病变抑制法测定干扰素的效价.实验结果表明，酵母表达上清中IFNα的效价为2.916×106U/mL；Tα1-IFNα的效价为2.860×107U/mL，该结果证实胸腺素α1可提高融合表达蛋白猪干扰素的活性，因此，通过酵母表达体系获得高活性胸腺素-猪干扰素融合蛋白，可为高效、低成本获得抗病毒药物提供一种新的模式.

干扰素； 胸腺素Tα1； 毕赤酵母表达系统； 细胞病变抑制法

0 引言

干扰素是在特定条件下由细胞产生的一种高活性、多功能、低分子量的可溶性糖蛋白，具有广谱、高效抗病毒功能，且对免疫系统起速效多能的调节作用[1-2].干扰素根据免疫原性和分子结构的不同可分为3类：IFNα、IFNβ、IFNγ，IFNα因其独特的抗病毒活性、促机体免疫功能强、毒副作用小而并倍受研究者的重视，常用于……