李光超　张倩　武婧

[摘要] 目的 分析STAT1基因敲除小鼠免疫相关因子表达差异，观察STAT1基因敲除小鼠感染EV71病毒后的症状表现及病毒载量，为EV71抗病毒治疗提供数据基础。 方法 LPS刺激STAT1基因敲除小鼠后，利用微珠免疫分析（CBA）方法对血清免疫相关因子定量分析；EV71感染STAT1基因敲除小鼠后，观察症状及病理表现，利用实时荧光定量检测对肌肉病毒RNA定量分析。 结果 LPS刺激后，STAT1基因敲除小鼠血清多种细胞因子分泌水平下降（P < 0.01）；EV71感染后，STAT1基因敲除小鼠病理损伤加重，肌肉中病毒载量升高（P < 0.01），与野生型小鼠相比表现出更严重的症状与更高的死亡率。 结论 STAT1在抗EV71感染的免疫过程中扮演重要角色，提示STAT1基因敲除可以提高小鼠对EV71病毒的敏感性。

[关键词] 病毒感染；EV71；STAT1；炎症因子

[中图分类号] R373 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2017）05（c）-0014-05

[Abstract] Objective To analyze the differential expression of immune-associated factors in STAT1 knockout mice， and observe the symptoms and viral load after EV71 virus infection， in order to provide a data base for anti-EV71 therapy. Methods Cytometric bead assay （CBA） was used to quantitative analysis the levels of serum immune-associated factors in STAT1 knockout mice after LPS-induced treatment. The symptom and tissue pathological features were observed and the level of muscle virus RNA was quantitated by real-time PCR in STAT1 knockout mice after EV71 virus infection. Results The levels of multi- immune-associated factors were decreased in STAT1 knockout mice after LPS stimulating （P < 0.01）， and pathological damage was aggravated accompanied by the higher viral load in muscle （P < 0.01）， also severe symptoms and higher mortality when compared to wide type mice after EV71 infection. Conclusions STAT1 plays an important role in the immune responseafter EV71 infection.Thus， STAT1 gene deletion can improve the sensitivity of mice to EV71 virus.

[Key words] Virus infection； EV71； STAT1； Inflammatory cytokines

手足口病是嬰幼儿最常见的传染病，好发于5岁以下婴幼儿[1]。肠道病毒71型（EV71）属于人类肠道病毒A属的小RNA病毒科，为常见的引起手足口病的病毒之一。病毒在肠道存活时间可达10周[2]，引起严重的临床症状，甚至导致患者死亡[3]。婴幼儿感染EV71后，常发生手、足、口疱疹，以及引发无菌性脑膜炎、脑干脑炎、急性迟缓性麻痹、神经源性水肿等多种神经性疾病[4]。据统计，手足口病患者中感染EV71所导致的患者死亡率始终居高不下[5]。

JAK/STAT信号通路是一条由细胞因子刺激的信号转导通路。STAT1作为STAT家族发现的第一个成员，是JAK/STAT信号通路中的关键转录因子，具有免疫调节、抑制细胞生长和促进细胞凋亡等功能[6]，在机体抗肿瘤免疫中也发挥重要的作用[7]。脂多糖（LPS）是革兰阴性细菌细胞壁中的一种成分，作为细菌引起机体发热反应的主要成分之一，可引起免疫炎性反应[8]。研究发现当给予小鼠LPS刺激后，STAT1可与TLR4协同作用，使细胞因子分泌水平升高，发挥免疫调节的功能[9]。……