谢 昆，王丽仙，王 靖，朱灵明，尹建华，叶青霞，孙 艳

(1.红河学院 生命科学与技术学院，云南 蒙自 661199；2.云南省高校农作物优质高效栽培与安全控制重点实验室，云南 蒙自 661199)

草地贪夜蛾Sf9细胞对饥饿诱导自噬的响应

谢 昆1，2，王丽仙1，王 靖1，朱灵明1，尹建华1，叶青霞1，孙 艳1

(1.红河学院 生命科学与技术学院，云南 蒙自 661199；2.云南省高校农作物优质高效栽培与安全控制重点实验室，云南 蒙自 661199)

为研究草地贪夜蛾对饥饿诱导自噬的响应。从草地贪夜蛾EST数据库中筛选到一段核苷酸序列，设计特异性引物，RT-PCR技术从草地贪夜蛾Sf9细胞中扩增该核苷酸序列，经过生物信息学分析该序列与昆虫自噬相关基因ATG8同源性最高，命名为SfATG8基因，并构建了pIEX-4-mCherry-EGFP-SfATG8载体转染Sf9细胞。Sf9细胞经饥饿(PBS)诱导4 h后，Lyso-Tracker染色、Western Blotting、共聚焦显微镜检测细胞对自噬的响应程度。结果表明，经饥饿(PBS)诱导4 h的Sf9细胞中出现SfAtg8-PE的表达，共聚焦显微镜检测到Sf9细胞膜上的自噬小体。以上证据证实饥饿(PBS)能诱导Sf9细胞发生自噬，为深入研究Sf9细胞对自噬的响应奠定了基础。

草地贪夜蛾；Sf9；饥饿；自噬

细胞自噬被称为Ⅱ型程序性细胞死亡(Program cell death Ⅱ，PCDⅡ)，以降解细胞器和细胞大分子组分形成自噬小体为特点，细胞自噬水平的增加通常由诸如饥饿信号和激素信号诱导，而过度水平的自噬可以引起自噬性细胞程序性死亡[1]。昆虫纲是节肢动物门中最大的一个纲，也是动物界中种类最多的一个纲，以黑腹果蝇(Drosophilamelanogaster，Dm)为代表的果蝇作为昆虫纲的一种模式生物被广泛应用于细胞自噬(Autophagy)的研究[2-10]。……