沈春修

( 宜春学院 生命科学与资源环境学院，江西 宜春 336000)

基于比较转录组的水稻苗期耐冷相关基因BGIOSGA032296 TALEN基因组编辑技术构建

沈春修

( 宜春学院 生命科学与资源环境学院，江西 宜春 336000)

为了挖掘水稻苗期耐冷基因，基于比较转录组分析，参考公共数据库中的基因序列信息设计靶位点，对冷胁迫条件下东乡野生稻苗期下调表达耐冷相关基因BGIOSGA032296 进行TALEN基因组编辑技术构建，克隆酶切鉴定和序列比对结果表明，BGIOSGA032296 TALEN敲除植物表达载体1301TALEN-032296构建成功，利用农杆菌介导法将TALEN敲除植物表达载体1301TALEN-032296转入水稻受体品种TP309，获得了17株转基因水稻植株，经潮霉素抗性标记基因和FokI基因特异引物PCR检测，表明获得的转基因植株皆为携带1301TALEN-032296的阳性植株。该研究为水稻BGIOSGA032296基因后续耐冷表型鉴定奠定了前期基础。

比较转录组；东乡野生稻；TALEN基因组编辑技术

水稻发源于热带和亚热带气候地区，对低温冷害特别敏感，在我国不同的水稻种植区，水稻的生长发育阶段经常会受到低温冷害的不利影响，低温冷害已经成为制约水稻产量和种植面积最主要的环境因素，转基因技术被认为是改善水稻耐冷性的重要途径，然而，对于转基因策略而言，一个重要的前提是要克隆和鉴定出大量能够提高水稻耐冷性的耐冷基因。

基因的过表达分析和基因沉默(RNAi)是目前进行未知基因功能鉴定的2种最主要的方法，通过构建基因的过表达载体已经从水稻中鉴定了OsMYB3R-2[1]、Osmyb4[2]、OsTPS1[3]、microRNA319[4]和OsDREB1F[5]等一些水稻耐冷基……