闫春霞

摘要：以MS为基本培养基，添加不同浓度6-BA、IBA、KT植物生长调节剂，对藤本月季多特蒙特的组培快繁技术进行了研究，同时进行了试管苗移栽基质筛选试验。结果表明，适宜的诱导发芽培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.5 mg/L；增殖培养基以MS+KT 1.0 mg/L+IBA 1.0 mg/L效果最好，以上培养基且使芽生长健壮；适宜的生根培养基为1/2MS+IBA 0.5 mg/L，生根率可达92.5%，且根粗壮发达；在移栽试验中，适宜的移栽基质为蛭石+泥炭（1∶1），在每年5、6和9月适宜进行试管苗移栽，其移栽成活率可高达94.5%。

关键词：藤本月季；多特蒙特；组织培养；扩繁

中圖分类号：S685.12 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2017）10-1960-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2017.10.040

Technology of Climbing Rose Dortmund Tissue Culture and Rapid Propagation

YAN Chun-xia

（Garden Branch of Science and Technology，Xinjiang Agricultural Vocational Technical College，Changji 831100，Xinjiang，China）

Abstract： Taking MS as basic medium，adding plant growth regulator 6-BA，IBA，KT of different concentration，studying the technology of Dortmund Climbing Rose tissue culture and rapid propagation，and carried out test tube plantlet transplantation and substrate screening experiment. Results showed that medium suitable for Induced germination is MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.5 mg/L. Best medium for multiplication is MS+KT 1.0 mg/L+IBA 1.0 mg/L. Medium mentioned above can make sprout a robust growth. Best medium for root growth is 1/2MS+IBA 0.5 mg/L，with a thick and robust rooting rate of 92.5%. In transplantation experiment，the best medium is vermiculite+peat，and the best tube plantlet transplantation period is May，June and September，with a survival ratio above 94.5%.

Key words：climbing rose；dortmund；tissue culture；propagation

藤本月季为蔷薇科蔷薇属攀缘植物，是近年来选育出的可用于城市园林绿化的新的月季品种。其三季开花，花朵繁多，略加修剪可形成圆球状、圆柱状、拱门形、花山等景观，是城市垂直绿化美化中的优良品种。藤本月季目前常采用扦插和嫁接繁殖，但其过程漫长，用工量大。

近年来，组织培养法快速繁殖各种花卉苗木的技术得到了广泛应用。藤本月季多特蒙特为北方较耐寒、且在栽培中各项生长指标较好的品种。本试验以适宜新疆地区种植的藤本月季品种多特蒙特为试验材料，进行了诱导、继代及生根的组织培养特性研究，优化了适合该藤本月季品种组培快繁的最佳配比的培养基和移栽基质，为北疆地区适宜栽培的藤本月季组培快繁提供依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

以二年生藤本月季多特蒙特植株母枝为基础材料，选择生长健壮、无病虫害植株、芽体饱满的当年生枝条中段为外植体。将选取的外植体剪去叶片、保留叶柄，自来水冲洗干净后，在超净工作台上将其剪成保留2～3个芽的茎段，放入高温灭菌的瓶中，加入75%乙醇溶液浸摇30 s后，用0.1%的升汞溶液消毒8～10 min，再用无菌水彻底冲洗5次待接种。

1.2 培养基

1）诱导培养基：A1.MS+6-BA 0.5 mg/L；A2.MS+6-BA 1.0 mg/L；A3.MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.5 mg/L；A4.MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.1 mg/L。

2）增殖培养基：B1.MS+6-BA 0.5 mg/L+IBA 0.5 mg/L； B2.MS+KT 0.5 mg/L+IBA 1.0 mg/L； B3.MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 1.0 mg/L；B4.MS+KT 1.0 mg/L+IBA1.0 mg/L。

3）生根培养基：C1.1/2MS；C2.1/2MS+IBA 0.05 mg/L；C3.1/2MS+IBA 0.1 mg/L；C4.1/2MS+IBA 0.5 mg/L。

4）移栽基质：D1.基质∶蛭石；D2.基质∶珍珠岩； D3.基质∶蛭石+泥炭（1∶1）；D4.基质∶河沙。

1.3 方法

1.3.1 诱导培养 用镊子去除消毒茎段上的叶柄，使腋芽显出，再将茎端切成长1.5 cm的单芽小段，分别接种于诱导培养基A1、A2、A3、A4，每个处理重复3次，每个重复接种25个单芽茎段，接种7～15 d后观察芽萌发情况。

1.3.2 芽的增殖继代培养 将已萌发且芽高1.5 cm以上的丛生芽切成单芽，转接到增值继代培养基B1、B2、B3、B4中，每个处理接种30个单芽，接种5～7 d后观察离体芽的增殖情况。

1.3.3 试管苗的生根培养 将继代培养苗中生长健壮，苗高在2 cm以上的无根苗切成单株，转接到生根培养基C1、C2、C3、C4中，每个处理接种40个单株，接种7 d后观察幼苗的生根情况。

1.3.4 移栽 当继代培养的升根苗根系生长良好时，可将试管苗在室内揭开封膜口炼苗2～3 d，然后轻轻取出试管苗，用温水洗净根部黏附的培养基，在温室中，移栽于厚度达15 cm的栽培基质苗床中。选用的栽培基质分别为D1、D2、D3、D4，均经高锰酸钾彻底消毒。从4月下旬开始到10月中旬为止，每月进行移栽试验，每個处理均为80棵苗。幼苗栽植后用低浓度的多菌灵溶液浇湿基质，遮阴保湿，移栽20 d后统计幼苗成活率。

1.3.5 培养条件 MS培养基中蔗糖为30.0 g/L， 1/2MS培养基中蔗糖为20.0 g/L，琼脂均为3.8 g/L，pH 5.8，培养温度为（25±2） ℃，光照度2 000～2 500 lx，光照时间10～12 h/d。

2 结果与分析

2.1 腋芽的诱导培养

藤本月季多特蒙特的茎端在接种3 d后腋芽开始萌动，但萌芽率及生长情况因植物生长调节剂浓度的不同而异。由表1可知，培养基MS+6-BA 0.5 mg/L和MS+6-BA 1.0 mg/L中由于只加入了细胞分裂素（6-BA），诱导产生的丛生芽数、腋芽萌发率和平均芽高均明显低于培养基A3。培养基A3中细胞分裂素和较低浓度的生长素（NAA）配合使用有利于腋芽的萌发，腋芽萌发率高达117.3%，平均芽高2.60 cm， 且丛生芽生长健壮。培养基A4中生长素浓度增大，腋芽萌发率下降至93.3%，平均芽高 2.01 cm，且丛生芽长势一般。综上所述，以萌芽率及生长情况作为评价标准，培养基A3（MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.5 mg/L）为藤本月季多特蒙特腋芽诱导的适宜培养基。

2.2 增殖继代培养

由表2可知，培养基B1由于生长素（IBA）浓度偏低而增殖芽数较少，增殖系数明显低于其他培养基。随着6-BA和NAA浓度的增加，培养基B2和B3增殖芽数增多，增殖系数分别达2.7和2.2，且芽生长健壮。培养基B4中将6-BA更换为KT，增殖芽和增殖系数均明显提高，且明显高于其他培养基，芽生长健壮，同时在芽基部不断有不定芽萌动的迹象。因此，培养基B4（MS+KT 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L），既可实现芽的高效增殖，又能保证分化出的芽健壮生长，为藤本月季多特蒙特适宜的增殖继代培养基。

2.3 生根培养

从表3可以看出，未使用任何植物生长调节剂的培养基C1中，幼苗培养12 d后开始生根，生根率仅有28%，明显低于其他培养基，平均生根数为4条，且根生长细弱。培养基C2和C3中根数达到6条和10条，幼苗培养8～10 d开始生根，且以培养基C4中幼苗根系发达，质量较高。培养基1/2MS中加入IBA作为生根调节剂，幼苗生根效果明显好于加入NAA的培养基，生根率达到92.5%，明显高于培养基C1和C2、C3，且其平均根数为12条，幼苗培养7 d即开始生根，小苗长势良好，根粗壮、根系发达。因此，适合藤本月季多特蒙特品种的最佳生根培养基为C4 1/2MS+IBA 0.5 mg/L，其生根率达到92.5%。

2.4 移栽成活情况

由图1可知，4个栽培基质处理均在5、6和9月移栽成活率较高，幼苗生长健壮，新叶黑而亮；而4、7、8和10月的移栽成活率相对较低，幼苗生长细弱，这可能与气温及地温的高低有关。5、6和9月气温适中（20～30 ℃），有利于试管苗的移栽；4、10月气温偏低（20 ℃以下），而7、8月气温偏高（30 ℃以上），均不利于试管苗的移栽。4个不同基质处理中，以栽培基质D3即采用蛭石+泥炭（1∶1）的处理试管苗移栽成活率都较高，其中又以5月最高，达到94.5%，7月最低，仅有65.0%。

3 小结与讨论

结果表明，在藤本月季多特蒙特的诱导培养中需较低浓度的细胞分裂素（6-BA）和生长素（IBA），适宜的诱导培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.5 mg/L；增殖培养阶段细胞分裂素选用KT比6-BA更适宜芽的增殖，最佳的继代增殖培养基为MS+KT 1.0 mg/L+IBA 1.0 mg/L；生长素IBA作为生根激素，幼苗生根效果要比NAA效果更好；最佳的生根培养基为1/2MS+IBA 0.5 mg/L。在试管苗移栽试验中，气温和栽培基质均对试管苗的移栽成活率影响明显，5、6和9月气温适中（20～30 ℃），试管苗的移栽成活率均较高，气温偏低（20 ℃以下）或偏高（30 ℃以上）都不利于试管苗的移栽。蛭石+泥炭（1∶1）通气保水，是试管苗移栽的最佳栽培基质，且适宜在5、6和9月移栽，成活率可高达94.5%；珍珠岩虽透气，但保水性太差，而泥炭吸水力过强，根系因水分过多而腐烂。

采用组培快繁技术可生产出根系发达、生长健壮的批量优质藤本月季商品苗，满足生产的需求，但本试验只是对藤本月季多特蒙特1个品种进行了研究，因此该技术在其他品种上的应用还有待进一步的研究。

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