杜春彦,杨 静,王晓晨,冯泽国,郭全义,戴 鑫



IFN-γ预处理骨髓间充质干细胞及其抑制小胶质细胞活化作用的影响

杜春彦1,杨 静1,王晓晨1,冯泽国1,郭全义2,戴 鑫3

目的 探讨干扰素γ(interferon-γ，IFN-γ)预处理大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells，BMMSCs)及其抑制脂多糖(lipopolysaccharide ,LPS)诱发的小胶质细胞(microglia，MG)活化作用的影响。方法 采用全骨髓贴壁法分离培养大鼠BMMSCs，利用含100 ng/ml 的IFN-γ完全培养液对BMMSCs进行预处理；利用LPS(10μg/ml)诱导大鼠小胶质细胞活化。小胶质细胞分离纯化后，以1×105/孔种植于6孔板中，按以下分组将小胶质细胞和BMMSCs以直接接触的方式进行共培养24h：B组(单纯BMMSCs组)、L+B组(LPS+ BMMSCs组)、I+B组(IFN-γ预处理BMMSCs组)、L+I+B组(LPS+IFN-γ预处理BMMSCs组)、M组(单纯MG组)、L+M组(LPS+MG组)、B+L+M组(BMMSCs+LPS+MG组)、I+B+L+M组(IFN-γ预处理BMMSCs+LPS+MG组)。采用ELISA技术检测培养液上清TNF-α、IL-1β水平，免疫荧光法检测小胶质细胞表面标记物CD68表达。结果 L+M组小胶质细胞CD68表达增高，分泌TNF-α、IL-1β含量明显增多；B+L+M组以及I+B+L+M组的小胶质细胞CD68表达水平、TNF-α、IL-1β分泌量低于L+M组，且B+L+M组与I+B+L+M组相比有统计学差异(P<0.05)。结论 BMMSCs和IFN-γ预处理的BMMSCs均可以直接接触的方式抑制LPS诱发的小胶质细胞的活化且经IFN-γ预处理后的BMMSCs对小胶质细胞活性抑制作用更强。

骨髓间充质干细胞；小胶质细胞；活化；预处理；干扰素γ

神经病理性疼痛是由躯体感觉神经系统的损伤或疾病造成的慢性疼痛，近年来多个研究发现间充质干细胞移植可减轻外周或中枢神经损伤造成的机械性和热性痛觉过敏[1-3]。Procko 等[4]发现,干细胞可被移植微环境中的炎性因子激活，通过自身的旁分泌功能抑制小胶质细胞的激活，进而发挥减轻神经病理性疼痛的作用[5,6]。王炜炜和李恒等[7]发现，移植微环境中的炎性反应因子能激活BMMSCs的免疫抑制作用。但是，目前尚无研究涉及炎性反应因子预处理干细胞能否增强其抑制小胶质细胞活化的功能，本研究拟利用IFN-γ对BMMSCs进行预处理，探讨其对小胶质细胞活化作用的影响。……