岳耀辉 朱术会 王加才 孙新堂 宿志民 方文军 （山东省潍坊市宇洋药业有限公司 山东 高密 山东畜牧兽医职业学院 山东 潍坊）

替米考星自微乳口服液的制备及性状研究

岳耀辉①朱术会②王加才②孙新堂②宿志民②方文军①（①山东省潍坊市宇洋药业有限公司 山东 高密 ②山东畜牧兽医职业学院 山东 潍坊）

本研究依据自微乳工艺制备了替米考星自微乳口服液，并对其基本性状进行了考察，实验发现本研究制备的替米考星自微乳为淡黄色透明粘稠液体，室温放置90d后外观无变化，可以用水任意稀释，无沉淀析出；适口性实验发现，该制剂的适口性要强于市售替米考星普通粉剂。（1）替米考星[1](Tilmicosin) 是20世纪80年代开发的是一种由泰乐菌素半合成的大环内醋类畜禽专用抗生素[2]，性状为白色或类白色粉未，味苦，在甲醇、乙腈中易溶，在乙醇、丙二醇中溶解，在水中不溶。化学名为4A-O-脱(2，6-二脱氧-3-C-甲基-L-核糖-吡喃己基)-20-脱氧-20-(3,5-二甲基-1-哌啶基)-[20(顺式：反式)]泰乐菌素(如图1所示)，分子式为C46H80N2O13，分子量是869.13。（2）替米考星内服和皮下注射吸收快，但不完全，表观分布容积大，肺组织中的药物浓度高。具有良好的组织穿透力，能迅速而完全地从血液进入乳房，乳中药物浓度较高，维持时间长，乳中半衰期长达1～2d。因此，替米考星特殊的药动学特性使其适合于家畜肺炎、乳房炎等感染性疾病的治疗。替米考星不适合于静注，静脉注射可引起动物死亡，牛一次静注5mg/kg即可致死，对猪、马和灵长类也易致死，其毒作用的靶器官是心脏，可引起负性心力效应。因此，兽医临床应用当中替米考星主要使用预混剂、可溶性粉和口服液等剂型[3]。（3）替米考星适口性比较差，味道苦，对胃黏膜具有刺激性，动物厌食，影响畜禽的采食。市售常规的预混剂和粉剂，难以有效的掩盖本药的不良气味，替米考星适口性差的难题一直没有妥善解决[4,5]；另外该药物水溶性较差，分散性较低，群体直接混饲或饮水给药存在一定的困难，这严重制约了替米考星在畜禽疾病预防和治疗上的应用。有研究报道制备了替米考星分子微囊，可有效掩味，对解决替米考星本身的苦味问题有一定解决，但是该工艺存在技术要求较高，只能混饲给药，水溶性没有解决的问题。因此，研制一种水溶性好，适口性佳，适合于群体给药的替米考星制剂是十分迫切和必要的。（4）自微乳给药系统[6,7](self-microemulsifying drug delivery system，SMEDDS)是由油、表面活性剂和助表面活性剂或少量水组成的均一透明溶液，可作为疏水性、难吸收或易水解药物的载体。通过将药物包裹在油滴中，药物的不良气味能够有效掩盖，兑水或口服后遇体液在胃肠蠕动下自发分散形成 O/W 型微乳[8]。该系统可通过提高药物的溶解度，降低表面张力，形成易通过胃、肠壁的水化层，增加对肠道上皮细胞的穿透性等优势显著提高药物生物利用度[9,10]。由于自微乳的制备一些难溶药物或苦味较大的药物的水溶性，适口性，生物利用度等方面都得到了较大的改善，查阅相关文献关于替米考星自微乳的报道很少，兽医临床使用更是鲜有。本研究将替米考星制备成自微乳制剂，以有效掩盖替米考星的不良气味，增加畜禽的适口性，同时增加药物在水中的溶解性，以拓展替米考星临床使用的范围。

图1 替米考星分子结构

1 材料与方法

1.1 材料

（1）基本材料：替米考星原料药(山东天宇生物科技有限公司赠送)、电子天平(上海永琪仪器设备有限公司)、MYP11-2数显恒温磁力搅拌器(上海华岩仪器设备有限公司)、万用电烤炉(上海永琪仪器设备有限公司)、酸度计(PHS-3C，上海越磁电子科技有限公司)、高压匀质机(上海生化仪器有限公司)、胶体磨(潍坊生化仪器有限公司)、高速离心机(江苏海门市其林贝尔仪器制造有限公司)。（2）主要试剂：乙酸乙酯AR(国药集团化学试剂有限公司)、肉豆寇酸异丙酯(化学纯，国药集团化学试剂有限公司)、吐温-80(tween-80，AR，天津大茂化学试剂厂)、聚氧乙烯(40)氢化蓖麻油(RH240，AR，国药集团化学试剂有限公司)、丙二醇、无水乙醇(AR，国药集团化学试剂有限公司)、PVP—K30(博爱新开源制药股份有限公司)、PBS(pH=7.0)、磷酸(AR，天津大茂化学试剂有限公司)。其他药品、试刺均为国产分析纯。

1.2 制备方法 制备过程。制备油相：将替米考星投至磁力搅拌器中，加入乙酸乙酯、丙二醇及吐温-80乳化剂，混合加热至溶解，维持温度50～60℃，备用。制备水相：将聚氧乙烯(40)氢化蓖麻油、无水乙醇和水加入到另一磁力搅拌罐中，搅拌混合并加热，维持温度50～60℃，备用；将溶解后的水相加入到油相容器中，搅拌至乳液透明，经过匀质机循环10min，冷却至常温，即获得替米考星自微乳。

2 替米考星自微乳性状分析

2.1 粒径分析 取替米考星自微乳加蒸馏水稀释，待自乳化完全后，取适量滴在铜网上，用的磷钨酸负染色，惊干后电镜观察见图，并用粒径测定仪测定微乳的粒径和电位。

2.2 稳定性性考察 取替米考星自微乳常温放置6个月，分别于第1、2、3、4、5、6个月取样，考察样品的稳定性。取3组试样，分别放置于4℃、40℃和60℃的环境中，分别于1h、2h、3h、4h后取样，观察样品的稳定性。

2.3 强光照射考察 取本实验制备的样品放置于25 ℃、光照4500土500LX条件下，分别与第1、3、5天取样考察样品稳定性。

2.4 水溶性及水溶性考察 取本实验制备的替米考星自微乳分别进行10倍、100倍、1000倍和10000倍稀释，观察有无沉淀和破乳现象产生。同时将稀释好的替米考星自微乳以12000r/min离心20min，观察乳液是否分层或是否变浑浊。

2.5 适口性考察 实验取20日龄、体重650g左右的健康肉鸡300只，平均分为3组，每组100只，3组实验鸡给予等量的水，其中1～2组水中分别给予相同剂量的本实验制备的替米考星自微乳、市售替米考星口服液；第3组作为对照组，不给予药物。3组实验鸡给予空白全价饲料，自由采食、自由饮水，12h后计算3组鸡的饮水量，实验连续4d，同时计算增重量。

3 结果分析

图2 替米考星自微乳透射电镜照片

3.1 替米考星自微乳性质考察结果 （1）取替米考星自微乳加蒸馏水稀释50倍，待自乳化完全后，取0.5ml滴在铜网上，用磷钨酸负染色，自然惊干后电镜观察见图2所示，本实验制备出的替米考星自微乳在透射电镜下观察其液滴呈球形，用粒径分析仪测定其粒径为15～28nm之间，符合纳米乳的范畴[11]。（2）取替米考星自微乳常温放置6个月，分别于第1、2、3、4、5、6个月取样，考察样品的稳定性。结果显示液体仍然为透明的黄色液体，无沉淀和絮状物质，电镜观察液滴分布均匀，无团聚现象。在4℃、40℃和60℃放置4h内，替米考星自微乳仍然保持澄明的黄色液体，无浑浊和沉淀产生，这说明本研究制备的替米考星自微乳性质较稳定，在60℃的高温和4℃的低温4h无明显变化。（3）考察强光照射对本实验替米考星自微乳的影响，实验设置取本实验制备的样品放置于25℃、光照4500土500LX条件下，分别与第1、3、5天取样考察样品稳定性。结果显示本实验制备的替米考星自微乳强光照射后第3天无明显变化，第5天出现少量沉淀物，这可能与替米考星药物本身对光较敏感的原因所致，建议本制剂避光室温放置。（4）制剂的水溶性与群体给药有一定的相关，水溶性较好可以通过饮水给药，可以达到群体给药的均一性，也可以节约一定的劳动成本，因此对替米考星自微乳进行了水稀释考察，结果发现替米考星自微乳分别10倍、100倍、1000倍和10000倍稀释，均没有沉淀和破乳现象产生，这说明自微乳在与水的接触瞬间成为了水包油型的纳米乳制剂。

3.2 适口性实验结果 替米考星苦味较大，适口性是临床应用的一大困难，微乳制剂可以有效包裹药物，掩盖不良气味，增进适口性，本实验制备的替米考星自微乳适口性结果如附表所示，从结果来看，使用本实验制备的替米考星自微乳的鸡饮水量与对照组无明显差异，而使用市售替米考星口服液的实验鸡饮水量明显低于第1组和对照组，这说明本实验制备的替米考星自微乳可有效掩盖主药的不良气味，有效的改善了适口性。

附表 替米考星自微乳适口性实验结果 (ml、g)

4 结论

本研究采用药物乳化工艺法制备了替米考星自微乳，纳米乳经过电镜粒径分析显示，纳米乳粒径在15～28nm之间，符合纳米乳的范畴，经过稀释和稳定性考察显示本研究制备的替米考星纳米乳能够用水稀释，稀释后迅速成为水包油型纳米乳，长时间放置无破乳、沉淀和药物析出现象，强光照射后发现有药物析出现象，因此本制剂应避光保存。临床实验证明本研究制备的替米考星自微乳适口性要好于市售普通替米考星制剂，这说明替米考星原药被制备成自微乳后不良气味被很好的掩盖，解决了替米考星适口性问题，这为拓展替米考星临床使用提供了新的剂型。

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1007-1733(2017)06-0082-03

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