诱导HO-1表达对慢性间歇性缺氧下INS-1细胞凋亡的影响
2017-06-19徐健李小莉李一禄陈济明
徐健 李小莉 李一禄 陈济明
诱导HO-1表达对慢性间歇性缺氧下INS-1细胞凋亡的影响
徐健 李小莉 李一禄 陈济明
目的 了解诱导HO-1表达对慢性间歇性缺氧下INS-1细胞凋亡的影响。方法 通过不同浓度CoPP作用于慢性间歇性缺氧下INS-1细胞,观察胰岛素水平、HO-1及Caspase-3水平,采用RT-PCR检测HO-1、Caspase-3mRNA表达。结果 随着CoPP浓度增高,胰岛素、HO-1表达逐渐增高,而Caspase-3逐渐降低,而CoPP浓度达到40umol/L时作用最强(P<0.05)。结论 慢性间歇性缺氧下诱导INS-1细胞HO-1表达,抑制凋亡相关蛋白Caspase-3,在一定程度上对细胞起保护作用。
慢性间歇性缺氧;INS-1;HO-1;凋亡;Caspase-3
阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)以睡眠中反复发作的呼吸暂停或上气道梗阻为特征,常常与打鼾、睡眠中断、白天嗜睡和血氧饱和度降低相关[1]。研究证实,OSAHS引起的睡眠结构紊乱和间歇性低氧,能诱发氧化应激、炎症反应,激活交感神经系统,损伤血管内皮功能[2-7]。研究还发现,OSAHS是独立于肥胖的代谢综合征的危险因素[8]。OSAHS与糖尿病之间关系越来越受到重视,但具体机制尚不完全清楚。已有研究发现,胰岛细胞凋亡在糖尿病发生发展是重要机制之一。HO-1系统是机体重要的内源性保护系统,主要通过抗炎,抗氧化、抗凋亡等机制起作用[9-11]。我们探讨在间歇性缺氧条件下通过CoPP诱导INS-1胰岛细胞HO-1表达,对INS-1胰岛细胞凋亡的影响。
资料与方法
一、实验材料
胰岛β细胞株INS-1(上海拜力生物科技有限公司);牛血清白蛋白(Sigma);细胞培养试剂、胎牛血清、RPMI 1640培养基(均为Gibco)。CoPP(Sigma)。
二、方法
1 细胞培养:胰岛INS-1 细胞株购买后,用含10%新生牛血清,2mmol/LL-谷氨酰胺,1mmol/L 丙酮酸钠,50mmoL/L -巯基乙醇,1×105IU/L 青霉素和100mg/L 链霉素的RPMI1640培养基,在37℃,5% CO2及饱和湿度的恒温箱中培养,每2-3d 传代一次。……
