贾梅林

（黑龙江省食品药品审核查验中心）

摘 要：本实验研究头孢氨苄缓释片的制备方法并建立反相高效液相色谱法测定头孢氨苄缓释片中头孢氨苄的含量。方法：采用安捷伦十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱（218mm×4.6mm，5μm），甲醇-水-4%醋酸-3.86%醋酸钠溶液（240∶742：3∶15），检测波长为254nm，流速为1.0ml/min，柱温为30℃。头孢氨苄在50～300μg·mL-1范围内呈良好的线性关系。结论：本制剂稳定、可靠，测定方法简便、准确。

关键词：头孢氨苄；制备；研制

头孢氨苄化学名为（6R，7R）-3-甲基-7-[（R）-2-苯乙酰氨基]-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂双环[4，2，0]辛-2-烯-2-甲酸一水化合物。头孢氨苄能抑制细胞壁的合成，使细胞内容物膨胀至破裂溶解，杀死细菌。头孢氨苄为广谱抗生素，对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均有抗菌作用。头孢氨苄主用于革兰氏阳性菌和阴性菌感染。头孢氨苄主要用于治疗产青霉素酶敏感细菌所引起的呼吸道、尿路、皮肤软组织等部位的轻症感染。本实验研究头孢氨苄缓释片的制备方法并建立反相高效液相色谱法测定头孢氨苄缓释片中头孢氨苄的含量。

1 仪器与试药

1.1 仪器：CH-0108A手动压片机（东莞市创宏仪器设备有限公司）、高效液相色谱仪（北京美华仪科技有限公司）、奥豪斯Explorer专业型分析天平（奥豪斯仪器上海有限公司）、EX623 EXPLORER精密天平（美国奥豪斯仪器（上海）有限公司）、台式双频数控超声波清洗器（北京恒奥德仪器仪表有限公司）、pHS-2C型精密酸度计（上海精科雷磁厂）、Kertone实验室超纯水机（科尔顿（中国）有限公司）、德国优莱博TW20通用水浴槽（上海沃珑仪器有限公司）、电热蒸馏水器（西安太康生物科技有限公司）、RC-3药物溶出仪（天津大学无线电厂）。硬脂酸（曲阜市天利药用辅料有限公司）、HPMC （曲阜市天利药用辅料有限公司）、微晶纤维素（曲阜市天利药用辅料有限公司）、可压性淀粉（郑州明瑞化工产品有限公司）。

1.2 色谱柱：安捷伦 十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱（218mm×4.6mm，5μm）。

1.3 对照品：头孢氨苄购自中国药品生物制品检定所。

1.4 试剂：甲醇（济宁佰一化工有限公司）、乙腈（济宁佰一化工有限公司）、磷酸二氢铵（济南汇丰达化工有限公司）、三乙胺（济南汇丰达化工有限公司）、醋酸（济宁佰一化工有限公司）、醋酸钠（济南汇丰达化工有限公司）。

2 制备方法

2.1 制备方法

将头孢氨苄过80目，辅料过60目，混合均匀，压片。

2.2 辅料的选用

HPMC为骨架材料，以微晶纤维素、可压性淀粉调节释放度，采用正交试验设计筛选处方。

2.3 压片压力的选择

分别制备硬度为3.0±0.1kg，6.0±0.1kg，9.0±0.1kg的头孢氨苄缓释片，测定其释放度，考察压片压力对头孢氨苄缓释片的影响。

3 释放度的测定

3.1 含量测定

3.1.1 流动相的选择

分别考察0.04moloL-1磷酸二氢铵溶液-乙腈-三乙胺（60∶40：0.01），甲醇-水-4%醋酸-3.86%醋酸钠溶液（240∶742：3∶15），甲醇-水-冰醋酸（13∶86∶1），水-甲醇-冰醋酸（90∶30∶0.12）不同比例的流动相，结果以甲醇-水-4%醋酸-3.86%醋酸钠溶液（240∶742：3∶15）为流动相，供试品各峰分离效果最好，故选用甲醇-水-4%醋酸-3.86%醋酸钠溶液（240∶742：3∶15）为流动相。依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下[1-5]。流动相：甲醇-水-4%醋酸-3.86%醋酸钠溶液（240∶742：3∶15）检测波长：254nm，流速：1.0m·min-1。柱温：30℃。理论板数按头孢氨苄峰计算应不得低于2000。

3.1.2 对照品溶液的制备

精密称取头孢氨苄对照品适量，置容量瓶中，加流动相制成每1mL含100μg的溶液，即得。

3.1.3 供试品溶液的制备

取供试品，研细，精密称取适量，置具塞锥形瓶中，精密加入流动相100mL，密塞，精密称定重量，超声处理5分钟，放冷，精密称定，用流动相补足重量，摇匀，滤过。取续滤液，即得。

3.1.4 专属性试验

依照处方取除头孢氨苄，按样品制备工艺制成阴性对照样品，照3.1.3项下供试品溶液的制备方法制成阴性液，依上述方法测定，结果在头孢氨苄出峰处阴性液无色谱峰，结果阴性试验没有干扰，表明本方法专属性良好。

3.1.5 对照品的线性考察

精密称取头孢氨苄对照品5mg，置10ml容量瓶中，加入流动相使溶解并稀释至刻度，摇匀，分别精密吸取1、2、3、4、5、6mL，置于10mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀。分别精密上述溶液吸取10μL，注人液相色谱仪，依照3.1.2项下的色谱条件测定，记录色谱峰。以峰面积（Y）为纵坐标，对照品进样量（X）为横坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。结果表明，头孢氨苄在50～300μg·mL-1范围内呈良好的线性关系。

3.2 释放度测定方法

取头孢氨苄缓释片，照释放度测定法 （附录XD），采用溶出度测定法（附录XC）第二法装置，以水900ml为溶剂，转速50r/min，依法操作，在2h、6h与12h分别取溶液3ml滤过，并即时在操作容器中补充水3ml。采用3.1项下方法测定滤液含量，分别计算出每片在不同时间的溶出量。本品在2h、6h与12h的溶出量应分别相应为20%～40%、40%～65%和70%以上，均应符合规定。

4 结果

头孢氨苄缓释片的最佳组成为：HPMC K4M、可压性淀粉、微晶纤维素、硬脂酸镁。压片压力对头孢氨苄缓释片无明显影响，三种硬度的缓释片均符合要求。

5 讨论

本制剂稳定、可靠，符合中国药典相关规定。此测定方法可用于头孢氨苄缓释片中头孢氨苄的含量测定。依照上述含量测定方法，测定头孢氨苄缓释片三批样品中头孢氨苄的含量，结果三批样品的含量分别为标示量的99.1%、98.2%、98.6%。头孢氨苄缓释片中头孢氨苄的含量为标示量的95-105%。压片压力对头孢氨苄缓释片无明显影响。

参考文献

[1]杜春波，王鲁燕，俞艳红，顾觉奋.RP-HPLC法测定转化液及其中间体中头孢氨苄的含量[J].中国抗生素杂志，1998（04）.

[2]彭婷婷，王卫华.高效液相色谱法测定头孢氨苄干混悬剂中头孢氨苄的含量[J].济宁医学院学报，2011（05）.

[3]赵明，孙炜欣，朱文军.高效液相色谱法测定复方头孢氨苄片中头孢氨苄的含量[J].中国药业，2003（10）.

[4]王建宁，史宏伟，齐力，李凯.HPLC法测定复方头孢氨苄片中头孢氨苄及甲氧苄啶的含量[J].西北药学杂志，2004（02）.

[5]皮立.用反相高效液相色譜法测定复方头孢氨苄胶囊中头孢氨苄和甲氧苄啶的含量[J].沈阳药科大学学报，2000（02）.