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氟喹诺酮药物残留的检测方法研究进展

2017-06-16刘荣利+韩宁娟+李亮��

现代交际 2017年9期
关键词:检测方法研究进展

刘荣利+韩宁娟+李亮��

摘要:氟喹诺酮是一种人工合成的广谱抗生素,在防治动物及人类的感染性疾病中具有重要应用。由于抗生素药物的不合理使用,导致在动物源性食品中残留超标,长期食用将严重危害人体健康,因此,对于动物源性食品中氟喹诺酮残留检测具有重要的意义。有关氟喹诺酮残留的检测方法大致可分为微生物法、免疫法、色谱法和光谱法等。

关键词:氟喹诺酮药物 检测方法 研究进展

中图分类号:S859文献标识码:A文章编号:1009-5349(2017)09-0189-02

一、前言

氟喹诺酮(fluoroquinolones,FQS)是一系列由人工合成的含有4-喹诺酮母核结构,母核6位C上被氟取代的一类广谱抗菌药物,抗菌作用强,对革兰氏阳性菌与阴性菌均有作用。具有吸收快,体内分布广,血药浓度高,血浆半衰期长,合成简便,药品价格低廉等特点,常用于动物及人感染性疾病的治疗。

FQS药物在家畜、家禽的饲养中应用广泛,抗生素的不合理使用,导致其在动物性食品中的残留超标,如果人体长时间摄入该类食物,不仅会引起人体对FQS药物产生耐药性,而且药物残留通过食物对人的中枢神经系统,胃肠道等器官危害较大,严重威胁人类健康。关于乳、肉制品中FQS抗生素的残留全球都有严格规定。因此,对于动物源性食品中FQS药物残留检测具有重要的意义。现将FQS药物残留的检测方法进行综述。

二、FQS药物的检测方法

(一)微生物法

微生物检测利用FQS药物对微生物生理代谢的抑制作用,进行FQS药物残留的测定。该方法经济方便,但灵敏度和特异性较低,难以進行药物残留的准确定性定量分析,适用于大量样品的筛选,可对药物残留进行初步检测。邢应寿[1]等建立了环丙沙星、诺氟沙星、恩诺沙星三种药物在肉鸡组织中残留的微生物检测法,结果发现24h后,环丙沙星残留量较大。

(二)免疫法

1.酶联免疫法

酶联免疫法(ElISA) 基于抗原抗体的免疫反应及酶的催化反应有机结合而发展起来的一项技术,采用酶标抗体检测FQS药物残留,特异性强,方便快速,可用多种该类药物残留的筛选测定。

2.免疫亲和色谱法

免疫亲和色谱法(HPIAC)将免疫技术和色谱技术相结合,通过合适的方法将抗体或抗原结合在载体上,通过抗体与抗原之间反应的特异性和可逆性进行色谱分离,目标物经抗体洗脱后,将所得提取物采用气相或者高效液相色谱方法进行定量检测分析。Holtzapple等[3]通过HPIAC方法对牛血清中4种FQS药物残留进行了分析。将抗沙拉沙星抗体以共价键结合在免疫亲和色谱柱上,氟喹诺酮与抗体结合后,在反相色谱柱上分离,荧光检测后,得到4种样品回收率均大于95%。

(三)色谱法

1高效液相色谱法

高效液相色谱法(HPLC)具有高灵敏度的紫外或荧光检测器,选择性好,分离能力强,广泛应用于各种药物及其制剂的分析测定中。乔坤云[4]等采用HPLC法,2475荧光检测器对鸡肉中的4种FQS药物残留进行了检测。鸡肉样品加入pH=7的磷酸缓冲液匀浆提取,离心、固相萃取C18小柱净化后将收集的洗脱液经膜过滤后进行分析检测,结果表明,4种组分在浓度为0025-020μg/mL范围内线性关系良好。

2.液相色谱-质谱法联用

液相色谱-质谱法(LC-MS)联用较之于高效液相色谱其检测灵敏度更高,可在色谱分离不完全的情况下减少液相色谱中杂峰的干扰,同时进行多种FQS药物残留的定性定量分析。杨朝琳[5]采用HPLC-MS/MS快速测定了鸡蛋中8种FQS药物的残留情况。采用Eclipse plus C18柱分离,样品经提取、冷冻离心、旋蒸浓缩、除杂之后进行HPLC-MS/MS定性、定量分析。研究表明,8种药物在2-50μg/kg范围内具有良好线性关系,所得检出限为00005-022μg/kg。

(四)高效毛细管电泳

高效毛细管电泳,采用高压电场,毛细管为分离通道,根据样品中各组分之间的淌度及分配系数的差异,从而实现待测样的分离。分离效果佳,分析速度快,使用成本低。孙汉文等[6]通过高效毛细管电泳对人体尿液中8种FQS药物进行了快速有效的分离,以紫外检测器在278nm时,对8种药物同时进行检测,回收率为8182%-10424%,检出限为105-208 mg/L。

(五)光谱法

目前,紫外-可见分光法和荧光分光法是光谱法中常用的测定抗生素残留的方法。其中荧光分光法操作检便、分析快速,依据共振瑞利散射原理,可对待测物进行定性定量分析。李勤[7]等采用荧光分光光度法研究了FQS抗生素与赤藓红体系,发现赤藓红可分别与莫西沙星、加替沙星形成离子缔合物,两种离子缔合物的均在568nm、342nm与378nm出现特征谱峰。在002-27μg/mL范围内莫西沙星线性良好,加替沙星在006-102μg/mL线性范围良好。并对人体尿液中两种药物的残留进行了检测。

三、结语

除了采用微生物法、免疫法、色谱法、光谱法之外,还可通过电化学分析法对FQS药物残留进行分析检测。比较发现,微生物法和酶联免疫法适用于FQS药物残留定性分析,操作简便,成本低,适用于大量样品的筛选。高效液相色谱法、液相色谱-质谱法联用、高效毛细管电泳法、紫外-可见分光光度法、荧光分光光度法均可进行FQS药物残留的定性定量分析。随着新技术的不断涌现,FQS药物残留的检测方法将不断的提高与完善,以确保FQS药物残留的检测更加灵敏快捷,为畜牧业与养殖业的健康发展提供指导,确保动物源性食品的质量安全。

参考文献:

[1]邢应寿.三种FQS药物在鸡组织中残留的微生物法检测研究[D].安徽农业大学,2005.

[2] 魏东,杨正涛,李颖,等.氟喹诺酮类药物残留免疫学检测方法的研究[J].中国兽医学报,2009,29(12):1593-1598.

[3] Holtzapple C K,Buckley S A,Stanker L H.Determination of fluoroquinolones in serum using an on-line clean-up column coupled to high-performance immunoaffinity–reversed-phase liquid chromatography[J].Journal of Chromatography B: Biomedical Sciences and Applications,2001,754(1): 1-9.

[4] 乔坤云,孙涛,刘圣红,等.高效液相色谱荧光法检测鸡肉中4种氟喹诺酮药物残留[J].分析仪器,2015(6):43-46.

[5]杨朝琳.高效液相色谱—串联质谱法检测动物源性食品中的抗生素[D].浙江师范大学,2016.

[6]孙汉文,赵伟,何攀.毛细管电泳有效分离和同时检测8种氟喹诺酮[J].河北大学学报,2008,28(3):152-157.

[7]李勤,周尚,杨季冬.FQS抗生素与赤藓红的共振瑞利散射光谱研究及其分析应用[J].分析实验室,2011,30(1):36-40.

责任编辑:杨国栋

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