赵斌斌 李云霞 扁长萍 朱运奎

VEGF、VEGFR-1和MMP-9对良恶性胸腔积液的诊断价值

赵斌斌 李云霞 扁长萍 朱运奎

目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)、受体VEGFR-1和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达在良、恶性胸腔积液鉴别诊断中的价值。方法 采用ELISA 法，检测35例恶性胸腔积液、33 例良性胸腔积液患者胸腔积液中VEGF，VEGFR-1和MMP-9 表达水平，并进行相关性比较分析。结果 恶性胸腔积液组中VEGF、VEGFR-1表达均明显高于良性胸腔积液，MMP-9表达明显低于良性胸腔积液，差异均有统计学意义(P<0.05)。恶性胸腔积液中VEGF，VEGFR-1和MMP-9表达水平呈正相关。VEGF，VEGFR-1和MMP-9与恶性胸腔积液的病理类型无相关性。结论 胸腔积液中VEGF，VEGFR-1和MMP-9表达可以作为良性和恶性胸腔积液鉴别诊断的标志物。

胸腔积液;恶性/良性;血管内皮生长因子;血管内皮生长因子受体-1；基质金属蛋白酶-9

The Diagnostic Value of VEGF,VEGFR-1 and MMP-9 in Malignant/benign

(ThePracticalJournalofCancer,2017,32:690～692)

胸腔积液常见病因有结核性胸膜炎和恶性胸腔积液[1]。目前由于诊断技术的不足仍有部分胸腔积液患者病因不能确诊。血管内皮生长因子(VEGF)与其受体VEGFR结合，促进肿瘤血管增殖，对胸腔积液的形成起着重要的作用[2]。基质金属蛋白酶(MMPs)能够通过降解细胞基质及基膜，增加血管壁通透性，参与恶性胸腔积液的形成[3]。目前已经证实肺癌患者VEGF及MMP-9水平显著升高[4]。在临床工作中，胸腔积液较组织标本取材容易，创伤小，研究价值较大。故本研究的目的是检测胸腔积液VEGF，VEGFR-1和MMP-9的水平，以探讨其在良恶性胸腔积液鉴别诊断中的作用。

1 资料与方法

1.1 研究对象

选择平凉市人民医院2011年12月至2014年12月住院初诊胸腔积液患者共68例，未经任何治疗。

1.2 分组

患者入院超声定位后胸腔穿刺送胸腔积液行常规检验。首先根据Light等提出的标准区分为渗出液组及漏出液组。渗出液中胸腔积液蛋白质/血清蛋白质比值大于0.5；胸液乳酸脱氢酶/血清乳酸脱氢酶比值大于0.6；胸液乳酸脱氢酶>血清乳酸脱氢酶正常上限的2/3。再对渗出液组的患者依据组织病理、细胞免疫学、影像学等资料分为为结核性胸膜炎组、恶性胸腔积液组及肺炎旁积液组。结核性胸腔积液诊断依据结核相关检查或诊断性抗结核治疗有效而确诊。恶性胸腔积液诊断依据胸腔积液脱落细胞或者病灶组织的病理学检查确诊。

1.3 标本的采集与保存

患者入院治疗前结合超声定位穿刺抽液进行常规、生化、免疫学及脱落细胞学检查。另取10 ml高速离心取上清液2 ml置管保存。

1.4 VEGF，VEGFR-1和MMP-9的测定

4 ℃解冻胸腔积液标本后，ELISA试剂盒(R&D公司生产)对胸腔积液中VEGF，VEGFR-1和MMP-9蛋白测定。

1.5 统计学方法

采用SPSS 16.0软件对数据资料进行统计学处理，计量资料组间差异采用成组t检验,比较采用配对t检验，相关性分析使用线性回归，P<0.05时差异有统计学意义。

2 结果

2.1 胸腔积液患者基本情况及病因比较

胸腔积液病因：恶性胸腔积液的病因中非小细胞肺癌21例、小细胞肺癌3例、间质瘤1例、其他(乳腺淋巴瘤、肾脏癌、消化器官肿瘤等)10例；良性胸腔积液的病因中结核性胸膜炎25例、其他(肺炎、心衰等)8例。依据标准入选患者共68例，根据分组标准分为恶性胸腔积液组和良性胸腔胸腔组。恶性胸腔积液组35例，其中男性患者19例，女性患者16例，平均年龄(63.26±14)岁，吸烟史(31.35±14.60)年。良性胸腔积液组33例，其中男性患者11例，女性患者12例，平均年龄(57.48±21)岁，吸烟史(28.64±35.20)年。恶性胸腔积液组和良性胸腔积液组在年龄、性别及吸烟史因素比较，P>0.05，无统计学意义。

2.2 良、恶性胸腔积液中VEGF，VEGFR-1和MMP-9表达的比较

恶性胸腔积液组胸腔积液中VEGF、VEGFR-1表达均明显高于良性胸腔积液(P<0.05)，恶性胸腔积液组胸腔积液中MMP-9表达均明显低于良性胸腔积液(P<0.05)，见表1。

表1 良、恶性胸腔积液中VEGF，VEGFR-1和MMP-9表达

2.3 良、恶性胸腔积液中VEGF、VEGFR-1与MMP-9相关性分析

相关性分析显示,恶性胸腔积液中VEGF和VEGFR-1，VEGFR-1和MMP-9，VEGF和MMP-9蛋白表达呈正相关(γ=0.51,γ=0.46,γ=0.58，P<0.05)。良性胸腔积液中VEGF、VEGFR-1和MMP-9蛋白间表达均无相关性(P>0.05)。

2.4 恶性胸腔积液组中不同肿瘤类型VEGF、VEGFR-1和MMP-9表达

VEGF、VEGFR-1与MMP-9蛋白在不同肿瘤类型中表达，差异无统计学意义，P>0.05，见表2。

表2 恶性胸腔积液中VEGF，VEGFR-1和MMP-9表达的比较

3 讨论

肿瘤发生浸润和转移的必要条件是血管形成，VEGF可以和血管内皮细胞表面的2种膜受体VEGFR-1和VEGFR-2结合，组成血管生成的信号转导系统[5-6]，是目前发现的最重要的促血管生长因子。血管通透性增加，血浆蛋白外渗是胸腔积液形成的主要机制之一。VEGF与受体结合激活酪氨酸激酶活性，诱发受体酪氨酸残基自身磷酸化，引起下游信号转导，增加毛细血管的通透性，提供胸腔积液形成的微环境[7]。以往许多研究一样，我们的实验中VEGF在恶性胸腔积液中表达明显升高，可以作为诊断恶性胸腔积液的一个肿瘤指标[8-9]。VEGFR-1是恶性胸腔积患者的独立的预后因子[10]，但其在鉴别良恶性胸腔积液的价值仍不明确。我们的研究恶性胸腔积液中VEGFR-1的表达明显高于良性胸腔积液，提示胸腔积液中VEGFR-1的水平可以作为鉴别良、恶性胸腔积液的有用的分子标记物。

MMP-9除了降解细胞外基质外，还可增大细胞间质空隙，提供肿瘤血管形成空间，促进肿瘤血管形成。我们实验中MMP-9在良性胸腔积液中的表达明显增高，与Alfonso的结果不同[11]，原因可能与国内良性胸腔积液中结核性胸膜炎发病率较高，而Alfonso实验中的良性胸腔积液中以肺炎旁积液等为主有关。最后，我们通过相关性分析发现，VEGF和VEGFR-1，VEGF和MMP-9，VEGFR-1和MMP-9表达呈正相关，提示其在胸腔积液形成过程中有协同作用。

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(编辑：甘 艳)

Pleural Effusion

ZHAOBinbin,LIYunxia,BIANChangping,etal.

PingliangPeople’sHospital,Pingliang,744000

Objective To investigate the value of vascular endothelial growth factor(VEGF)，its soluble receptor VEGFR-1 and matrix metalloproteinase-9(MMP-9)in differentiating benign from malignant pleural effusion.Methods Using ELISA，the levels of VEGF，VEGFR-1and MMP-9 in pleural effusion in 35 patients with malignant pleural effusion and 33 with benign pleural effusion were detected and compared.Results The VEGF,VEGFR-1 levels in malignant pleural fluid were markedly higher than those in benign pleural effusion，the MMP-9 levels in malignant pleural fluid were markedly lower than those in benign pleural effusion with a significant difference among VEGF，VEGFR-1 and MMP-9(P<0.05).In the pleural fluids,the values VEGF,VEGFR-1 and MMP-9 were significantly related to each other(P<0.05).There was no significant association among VEGF，VEGFR-1 and MMP-9 in patients with pathological type.Conclusion The measurement of VEGF,VEGFR-1 and MMP-9 levels in the pleural effusion could be useful.

Pleura effusion;Malignant/benign;Vascular endothelial growth factor(VEGF);Vascular endothelial grow factor receptor-1(VEGFR-1);Matrix metalloproteinase-9(MMP-9)

744000 甘肃省平凉市人民医院(赵斌斌，李云霞，扁长萍)；730000 解放军兰州军区总医院(朱运奎)

10.3969/j.issn.1001-5930.2017.04.051

R734.2

A

1001-5930(2017)04-0690-03

2016-06-08

2016-11-04)