苍小鑫，赵小明，钟润涛，王文霞，尹 恒，朱靖博，丁 燕

(1.中国科学院 大连化学物理研究所，辽宁大连 116023； 2.大连工业大学 食品学院，辽宁大连 116034；3.大连海事大学 环境科学与工程学院，辽宁大连 116026)

基于液滴技术的烟草细胞免疫应激信号的检测

苍小鑫1,2，赵小明1，钟润涛3，王文霞1，尹 恒1，朱靖博2，丁 燕2

(1.中国科学院 大连化学物理研究所，辽宁大连 116023； 2.大连工业大学 食品学院，辽宁大连 116034；3.大连海事大学 环境科学与工程学院，辽宁大连 116026)

基于液滴微流控芯片技术，用壳寡糖(chitosan oligosaccharide ，COS)处理悬浮培养的烟草细胞(BY-2 cell)，对烟草细胞产生的免疫应激信号分子(H2O2和Ca2+)进行荧光检测。用50 μg/mL的壳寡糖水溶液分别刺激装载过氧化氢和钙离子荧光探针的烟草细胞，在荧光显微镜下观察到烟草细胞产生的荧光；以液滴微流控芯片为实验平台，研究发现水相流速为100 μL/h，油相流速为300 μL/h时，液滴尺寸为300 μm，适合烟草细胞的包裹，在该条件下将COS与荧光探针孵育后的细胞包裹在液滴中，在荧光显微镜下观察到液滴中的荧光；后用荧光酶标仪检测96孔板和液滴承载的细胞的荧光强度，结果显示1 h内两者的变化趋势一致。试验为液滴微流控芯片在植物免疫诱导剂和生物农药方面的研究提供了参考。

液滴微流控芯片；壳寡糖；烟草细胞；H2O2荧光探针；Ca2+荧光探针

植物病毒病的防治一直是世界范围内的一个难题[1]，其中烟草病毒病危害面积广，经济损失大且难以防治[2]。虽然化学农药可以快速有效防治，保证高产，但是随之而来的农药残留高、环境污染严重和抗药性增强等问题日益增多[3]，这些问题严重威胁到人类健康。……